EPOR和STAT5在乳腺癌细胞中的表达及rhuEPO对乳腺细胞增殖作用研究

摘要

目的:红细胞生成素(EPO)是促进红细胞生成的糖蛋白激素，可作用于未成熟红系细胞表面的红细胞生成素受体促进细胞生存、增殖和分化。：EPO和EPOR也表达于在多种非造血组织和细胞中如中枢神经系统，内皮细胞以及实体肿瘤等。信号转导与转录激活因子5(STAT5)是EPO/EPOR信号传导中起关键作用的一种蛋白质，参与细胞的增殖、分化以及调节细胞的转化。在乳腺癌的发生发展过程中发挥一定的作用。EPOR和STAT5之间的否存在相关性，临床上对乳腺癌和其他癌症患者使用重组人红细胞生成素(rhuEPO)治疗时，其表达的EPOR就可能会通过诱导细胞增殖和血管生成促进肿瘤生长，使得对癌症患者使用重组人红细胞生成素安全性提出质疑。本研究探讨了EPOR和其信号传导通路蛋白STAT5在乳腺癌细胞和组织中的表达及临床意义，分析了rhuEPO是否对乳腺癌细胞MCF-7增殖反应和对恶性肿瘤预后的影响。 方法 1、采用RT-PCR分析人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中EPOR、STAT5A、STAT5B mRNA的表达情况。 2、选取河北医科大学第四医院外科2005年12月～2006年4月确诊的原发性乳腺癌而未做放化疗患者的癌组织标50例(均经针吸术前细胞学或病理证实)，其中病理组织学分级Ⅰ级16例，Ⅱ级17例，Ⅲ级17例。以10例正常乳腺组织或良性乳腺组织标本作为对照。患者均为女性，年龄30～50岁，中位年龄43岁。所有病理切片均由两位高年资病理医师诊断复核。采用免疫组织化学S-P(链霉素抗生物素蛋白．过氧化物酶连结)法分析乳腺癌组织和正常乳腺组织中EPOR、STAT5蛋白的表达情况，分析其表达强度同组织学分级之间的关系，以及EPOR和STAT5蛋白之间的相关性。 3、采用MTT法检测经rhuEPO处理的人乳腺癌细胞株MCF-7细胞生长增殖反应和细胞凋亡水平变化。 4、采用流式细胞技术检测经rhuEPO处理的人乳腺癌细胞株MCF-7的细胞周期变化，以及EPO/EPOR信号传导通路中STAT5、BCL-2、BCL-XL蛋白表达的差异。 5、实验数据采用SPSS11.5软件进行统计分析。 结果 1、EPOR、STAq、5A和STAT5B mRNA均表达于MCF-7和MDA-MB-231细胞中。但是MCF-7和MDA-MB-231细胞株之间三种基因表达无差异。 2、EPOR在正常乳腺细胞呈阴性或弱阳性表达，无强阳性表达。EPOR在组织学分级为、Ⅱ、Ⅲ级的阳性表达率分别为56.3％、76.5％、94.1％，EPOR和乳腺癌组织学分级正相关(P=0.004)。STAAT5在正常乳腺细胞呈阴性着色，无强阳性表达。STAT5在组织学分级为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的阳性表达率分别为68.8％、76.5％、88.2％，STAT5和乳腺癌组织学分级正相关(P=0.03)。乳腺癌组织中EPOR和STAT5蛋白表达相关(X<'2>值=5.227，P=0.022)。 3、经rhuEPO处理后，MCF-7细胞凋亡水平无明显变化(P>0.05)。 4、经rhuEPO处理后，MCF-7细胞周期没有明显差异(P>0.05)。对EPO/EPOR信号传导通路中STAT5、BCL-2、BCL-XL蛋白表达均无明显影响(P>0.05)。 结论 1、EPOR、STAT5A和STAT5B在MCF-7和MDA-MBA-231细胞中均表达。 2、EPOR和STAT5在乳腺癌组织中的高表达可能与乳腺癌的发生发展密切相关，与病理组织学分级成正相关，EPOR和STAT5的表达存在相关。 3、经rhuEPO处理的人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖、凋亡率和细胞周期没有显著变化。 4、rhuEPO对EPO/EPOR信号传导通路中STAT5、BCL-2、BCL-XL蛋白表达均无影响。该结果为临床应用rhuEPO治疗肿瘤相关性贫血提供了实验依据。

目录

论文说明：英文缩写

摘要

引言

第一部分人乳腺癌细胞中EPOR和STAT5的表达

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

第二部分rhuEPO对人乳腺癌细胞增殖、凋亡和EPO/EPOR信号蛋白表达的影响

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

小结

参考文献

综述 红细胞生成素和红细胞生成素受体研究进展

致谢

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