凉润通络方对糖尿病胃轻瘫大鼠胃肠激素的影响及其机理初探

摘要

目的：糖尿病胃轻瘫是糖尿病的常见并发症之一，其发生能够影响降糖药物及其他药物的药代动力学，造成血糖不稳定。目前西医多采用胃肠动力药治疗，但是停药后易复发，且长期服用副作用较大。我们根据其阴虚燥热血瘀的基本病机，制定凉润通络方，为明确该方剂改善糖尿病胃轻瘫的疗效及作用机制，采用链脲佐菌素(STZ)注射法制作糖尿病大鼠模型，通过运用放免和免疫组化的方法，对血浆中MOT、SS、CCK进行检测，探讨其对胃肠激素和胃肠内分泌细胞的影响。 方法：68口、清洁级Wistar雄性大鼠，体重180～220g，随机分为正常对照组、模型对照组、西沙必利治疗组、凉润通络方治疗组。采用腹腔注射STZ，制作糖尿病模型。模型成功后，不予降糖药物控制，普通饲料正常喂养12周。第12周末，于各组随机抽取2只大鼠，检测胃排空率及小肠推进率，证实已存在明显胃轻瘫改变。第13周起，分别给予蒸馏水、西沙必利水溶液、凉润通络方灌胃。6周后，停药，禁食24h后，股动脉取血，4℃离心，取血浆，采用放免法检测血浆中。MOT、SS、CCK的浓度；取胃窦组织、十二指肠组织，免疫组化检测MOT、SS、CCK内分泌细胞。 结果：如下所述。 1、与正常对照组相比，糖尿病各组各时段血糖明显增高(P<0.01)；两治疗组相比各时段血糖无明显变化(P>0.05)。 2、与同期饲养的正常对照组比较，糖尿病各组体重下降明显(P<0.01)；与模型组相比，两治疗组体重在6周、12周时无明显差异(P>0.05)；18周时，两治疗组体重较模型组略有回升，有明显差异(P<0.01)；两治疗组间比较，各时段体重无明显差异(P>0.05)。 3、与正常对照组相比，糖尿病各组1周时摄食量明显增加(P<0.01)；6周、12周、18周时摄食量均减少，有明显差异(P<0.01.)。与模型组相比，两治疗组摄食量在1周、6周、12周时无显著性差异(P>0.05)；18周时两治疗组摄食量明显增加(P<0.01)。两治疗组相比，1周、6周、12周时无显著性差异(P>0.05)；18周时凉润通络组摄食量较西沙必利组为多(P<0.01)。 4、MOT浓度的比较与正常对照组比较，糖尿病各组大鼠血浆中MOT浓度均明显升高。与模型组比较，凉润通络组血浆MOT浓度明显下降(P<0.01)；西沙必利组亦有所下降(P<0.05)。两个治疗组比较，凉润通络组更加明显(P<0.05)。 5、CCK浓度的比较与正常对照组比较，糖尿病各组血浆中CCK浓度明显升高。与模型对照组比较，凉润通络组与西沙必利组血浆CCK浓度均明显下降(P<0.01)。两个治疗组比较，凉润通络组血浆CCK浓度明显下降(P<0.05)。 6、SS浓度的比较与正常对照组比较，糖尿病各组血浆SS浓度明显下降。与模型对照组比较，凉润通络组血浆SS浓度明显升高(P<0.01)，西沙必利组血浆SS浓度亦有增高(P<0.05)。两个治疗组比较，凉润通络组血浆SS浓度明显升高(P<0.01)。 7、小肠MOT内分泌细胞免疫组化染色结果(1)形态学观察：免疫反应阳性的Mo细胞，胞浆内有浅棕色反应物，胞核为阴性。主要分布于十二指肠腺上皮层及绒毛基底部上皮层，切面呈圆形、椭圆形、梭形、三角形等。(2)光镜下Mo细胞测定：与正常对照组比较，模型对照组Mo细胞数显著下降，强阳性细胞率则增多(P<0.01)。凉润通络治疗组和西沙必利组Mo细胞数、强阳性细胞率均无显著差异(P>0.05)；与模型组比较，凉润通络组和西沙必利组M o细胞数显著增多，强阳性细胞率显著减少(P<0.01)；两个治疗组比较Mo细胞数、强阳性细胞率无明显差异(P>0.05)。 8、小肠CCK内分泌细胞免疫组化染色结果(1)形态学观察：免疫反应阳性的Ⅰ细胞，胞浆内有浅棕色反应物，胞核为阴性。主要分布于十二指肠腺及肠绒毛上皮层，切面呈圆形、椭圆形、梭形、三角形等。(2)Ⅰ细胞测定：与正常对照组比较，糖尿病各组Ⅰ细胞数显著增加。模型对照组、西沙必利治疗组强阳性细胞率则显著增高(P<0.01)，凉润通络治疗组强阳性细胞率无显著差异(P>0.05)。与模型组比较，凉润通络治疗组Ⅰ细胞数、强阳性细胞率明显下降(P<0.01)，西沙必利组Ⅰ细胞数、强阳性细胞率无显著差异(P>0.05)。两个治疗组比较，凉润通络组Ⅰ细胞数、强阳性细胞率均显著低于西沙必利组(P<0.05)。 9、胃窦SS内分泌细胞免疫组化染色结果(1)形态学观察：免疫反应阳性的D细胞，胞浆内有浅棕色反应物，胞核为阴性，主要分布于胃窦粘膜的中、下层，偶见于上层，形态不规则。(2)D细胞测定结果：与正常对照组比较，糖尿病各组D细胞数显著增高，强阳性细胞率则显著下降。与模型组比较，凉润通络组D细胞数显著下降，强阳性细胞率显著增高(P<0.01)，西沙必利组D细胞数及强阳性细胞率无明显变化(P<0.05)；两个治疗组比较，凉润通络组D细胞数显著下降，强阳性细胞率显著增高(P<0.05)。 结论：1、本研究成功地利用STZ注射结合长时间喂养复制了糖尿病胃轻瘫大鼠模型，且模型形成稳定，价格低廉，操作方法比较简单。2、认为糖尿病胃轻瘫的主要病机是阴亏燥热血瘀，并制定了凉润通络方，经实验证明，其具有良好的改善胃肠功能、调节胃肠激素的作用。3、糖尿病大鼠18周时MOT、CCK、SS三者均有异常。凉润通络方为复方制剂，能够同步影响多种胃肠激素的分泌和释放，作用靶点较宽，优于西沙必利。4、通过影响胃肠激素来调节胃肠机能，可能是其改善糖尿病胃肠功能障碍的主要机理之一。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述：糖尿病胃轻瘫的中医药治疗

致谢

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