益气养阴祛瘀方药对IPF大鼠氧自由基水平的影响及机制研究

摘要

目的：本研究通过检测博莱霉素(BLM)致特发性肺纤维化(IPF)大鼠模型血液及肺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)等指标的变化，运用HE、MASSON染色以及SP免疫组织化学染色等技术手段，研究IPF时氧化损伤的特点以及肺组织病理形态学改变和诱导型一氧化氮合酶(indtlciblenitric oxidesynthase，iNOS)的表达特征，并以益气养阴祛瘀中药进行干预，研究气阴两虚、脉络瘀阻与IPF发病的相关性，探讨益气养阴祛瘀法对IPF的作用机理，为临床治疗提供新的思路和实验依据。 方法：将120只Sprague Dawley(SD)大鼠(雌雄各半)置于实验环境中适应性饲养1周后，随机分为5组(每组24只)：①正常对照组(对照组，control group)；②IPF模型组(模型组，model group)；③益气养阴祛瘀方低剂量组(低剂量组，low-dose．group)；④益气养阴祛瘀方高剂量组(高剂量组，high-dose group)；⑤强的松组(prednisone group)。 根据文献方法，造模各组大鼠气管内滴注博莱霉素A，(BLMA5，5mg/kg，溶于0.2 ml无热源生理盐水)，复制IPF模型；对照组气管内滴注等量无热源生理盐水。手术后第2天始，给对照组与模型组大鼠灌服生理盐水(10ml/kg)；给低剂量组和高剂量组大鼠灌服中药水煎剂(12.3g/kg、24.6g/kg，相当于临床成人用药量的7倍和14倍)；给强的松组大鼠灌服强的松混悬液(6mg/kg)。各组动物于造模后第7d、14d、28d分3批断头处死。取血浆，并分离血清，取肺组织制成10％组织匀浆，5000r/min离心15 min，取上清液，-20℃冻存待检。在肺门处结扎取右肺1 cm×1 cm×1 cm大小组织，用4％多聚甲醛固定、包埋、切片(5 μm)，行HE、MASSON及iNOS免疫组化染色，光学显微镜下观察肺组织形态结构以及iNOS的表达情况。检测血液和肺组织中MDA、SOD、ET-1以及NO等指标变化。 结论： 1、IPF时机体MDA含量增加，SOD活力降低，表明机体氧化一抗氧化失衡是其发病的重要机制，自由基直接参与了IPF的形成过程。益气养阴祛瘀方药能有效降低MDA含量，增加SOD活力，从而影响IPF的形成过程。 2、IPF时大量产生的NO造成血管通透性增大，其结果加重了气道的炎症反应和组织损伤；而ET-1作为前纤维化因子在IPF状态下的过量增加，加剧了组织损伤程度。益气养阴祛瘀方药能通过降低ET-1、NO的合成与释放，改善机体血行状态，延缓肺纤维化的进程。 3、机体发生IPF时，肺组织中iNOS呈现高表达特征；益气养阴祛瘀方药能够有效下调其表达水平，减轻NO升高造成的组织损伤，对IPF发挥治疗作用。

目录

论文说明：英文缩写

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:肺纤维化的中医研究现状

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