胆总管梗阻致胆囊炎与梗阻解除后胆囊病理、胆汁细菌学、血清及胆囊组织氧自由基变化的研究

摘要

目的：胆总管梗阻可导致全身多脏器损害，近年来大量动物实验及临床研究已对胆道梗阻致心、肝、肾等脏器受损机制，病理生理改变作了系统研究，但有关胆总管梗阻导致胆囊损害的机制、病理过程及梗阻过程中，梗阻解除后胆汁细菌学变化，氧自由基(血清、胆囊组织)变化的研究仍未见报道，本试验采用兔制备急性胆总管梗阻的模型，探索梗阻不同时段及解除梗阻后胆囊病理变化、胆汁细菌学、血清、胆囊组织一氧化氮(Nitric oxide，NO)，超氧歧化酶( Superoxidedismutase， SOD ) ，丙二醛(Malonbialdehyde，MDA)的变化，为临床上治疗胆总管梗阻引起的胆囊炎提供理论依据。 方法：选择健康家兔，雌雄各半共72只，体重2.2-2.5kg/只(购自河北医科大学实验动物中心)，随机分为9组，假手术组(NC)，梗阻后1 d组(BDL<,1>)，梗阻后3d组(BDL<,3>)，梗阻后5天组(BDL<,5>)，梗阻后7d组(BDL<,7>)，治疗组：梗阻1天后解除(T<,1>)，梗阻3天后解除(T<,3>)，梗阻5天后解除(T<,5>)，梗阻7天后解除(T<,7>)，每组8只，所有家兔手术前禁食过夜，自由饮水，用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉30-40mg/kg后，在无菌操作下行上腹正中切口(长3cm)，剖腹探查并观察肝胆大体形态，仔细游离胆总管下段，其后壁置一外径为2mm的细硅胶管(导管内穿引一根10＃丝线)，将硅胶管两端经皮下隧道由腹壁戳孔引出，腹壁引出处距正中切口2cm，提起并收紧导管和粗丝线，直视下观察以能阻止胆流和胆管梗阻为度，关腹并固定导管。BDL组分别于梗阻后1天、3天、5天、7天处死动物，治疗组均于梗阻解除后3天处死动物，无菌条件下取胆汁2ml进行细菌培养，并取血标本检测一氧化氮(NO)，超氧歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，各组均摘取胆囊，取100mg研磨成匀浆，取上清于-20℃保存用于测NO、SOD、MDA。其余胆囊组织置于10％中性甲醛中以备制石腊切片，光镜行HE染色。所有数据均采用SPSS FORWINDOW 13.0软件包进行统计学处理，所得结果，计量资料均采用均数±标准差(X±S)表示，各组间均数比较采用单因素方差分析，P<0.05认为有统计学意义。 结果：胆总管梗阻后导致胆囊炎症，梗阻早期，BDL1，BDL3组胆囊肿大，囊壁水肿、增厚，粘膜皱壁完好，光镜下粘膜上皮完好，固有膜、肌层、浆膜都有水肿，并有血管扩张充血及少量炎症细胞浸润。随着梗阻时间的延长、BDL5组胆囊的炎症加重，胆囊肿大，有絮状渗出物，囊壁增厚，胆汁混浊、粘膜可见灰黄色渗出物附着或形成假膜。部分粘膜坏死脱落，有小溃疡，同时往往伴有胆结石。光镜下粘膜上皮脱落，血管扩张充血，粘膜、固有膜、肌层、浆膜均可见大量中性白细胞弥漫性浸润。梗阻7天(BDL7组)，整个胆囊呈深暗红而发黑壁薄而脆，粘膜皱壁消失，呈坏死状。光镜下粘膜上皮消失，见大量白细胞碎屑及出血，肌层模糊不清，常伴有胆囊周围炎，严重时可出现坏疽。解除梗阻后胆囊炎症逐渐恢复，梗阻解除越早，炎症恢复越快。胆囊组织、血清中NO、MDA随着梗阻时间延长逐渐升高，BDL7组最为明显，梗阻各组之间比较均有显著性差异(P<0.05)，胆囊组织、血清中SOD随着梗阻时间延长逐渐降低，BDL7组最为明显，梗阻各组之间比较均有显著性差异(P<0.05)。治疗组与同时段梗阻组比较，胆囊组织、血清中NO、MDA均降低，SOD升高，但各组之间无显著性差异(P>0.05)，本试验结果表明，梗阻解除越早，胆囊组织、血清中NO、MDA降低越明显，SOD升高越明显，胆囊病理炎症越轻。胆总管梗阻后，随着梗阻时间延长，胆汁中细菌数量逐渐增加，以大肠杆菌为主，解除梗阻后，胆汁细菌数量明显下降，胆囊炎症逐渐恢复。 结论： 1 胆总管梗阻后导致胆囊炎症，梗阻早期，胆囊肿大，囊壁水肿、增厚，粘膜皱壁完好，随着梗阻时间的延长、胆囊的炎症加重，胆囊肿大，有絮状渗出物，囊壁增厚，胆汁混浊、粘膜可见灰黄色渗出物附着或形成假膜；梗阻解除后胆囊炎症逐渐减轻。 2 胆总管梗阻后，胆囊组织、血清中SOD随着梗阻时间延长逐渐降低，而胆囊组织、血清中NO、MDA随着梗阻时间延长逐渐升高。梗阻解除后胆囊组织、血清中NO、MDA均明显降低，SOD明显升高。表明氧自由基在梗阻所致胆囊炎症发生过程中起重要作用。 3 胆总管梗阻后，随着梗阻时间延长，胆汁中细菌数量逐渐增加，解除梗阻后，胆汁细菌数量明显下降，胆囊炎症逐渐恢复。

目录

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述(一)急性胆囊炎的病因及发病机制研究进展

综述(二)胆道梗阻与氧自由基

致谢

个人简历