人参皂甙Rg3联合5-氟尿嘧啶对小鼠移植性肝癌细胞凋亡、血管形成作用的研究

摘要

目的：肝癌起病隐匿，恶性程度高，发展迅速，死亡率高，其原因与肝癌易早期转移及复发密切相关。肝癌的发生发展、复发和转移是一个多因素多步骤的复杂过程，肝癌细胞凋亡异常、血管形成被认为在肝癌发生发展、复发和转移中起重要作用。随着分子生物学技术的发展，肝癌研究的不断深入，对凋亡抑制基因及其蛋白的研究；细胞凋亡过程中的效应细胞死亡蛋白酶的研究；以及肝癌血管形成因子的研究日益成为研究的热点。在肿瘤治疗中，肝癌对常规的化疗药物不敏感，耐受性低，治疗效果差。人参皂甙Rg3是从中药红参中提取的有效成分，国内外已有不少研究证实，人参皂甙Rg3具有抗肿瘤生长及转移的作用。5-氟尿嘧啶(5-FU)是目前肝癌化疗中应用最普遍的药物之一，但单一5-FU化疗效果并不理想。有些实验发现，人参皂甙Rg3联合化疗能增强抗肿瘤作用及减轻化疗药物毒副反应。在本实验中设立人参皂甙Rg3与5-FU联合应用组和人参皂甙Rg3、5-FU单独应用组，观察、比较三组药物对小鼠肝癌细胞凋亡、血管形成的作用大小，重点观察联合应用组是否比单独应用组对小鼠肝癌细胞凋亡、血管形成的作用更显著，并对中药单体人参皂甙Rg3抗肝肿瘤作用的机理进行相关方面的研究，为开发有效的抗肝肿瘤药物奠定理论基础。 方法：①选用昆明种小鼠6只(♀♂各半，供传代用)，昆明种小鼠140只(♀♂各半)按体重随机分为正常对照组(20只)，肝癌模型组(30只)，人参皂甙Rg3组(30只)，5-FU组(30只)，人参皂甙Rg3联合5-FU组(30只)。采用小鼠肝癌细胞株H22肝内注射建立小鼠移植性肝癌模型的方法。小鼠肝癌细胞株H22肝内注射24小时后，人参皂甙Rg3组灌胃给药，5-FU组腹腔内注射给药，人参皂甙Rg3联合5-FU组灌胃和腹腔内注射给药，连续10天后处死各组全部小鼠并留取标本进行检测。②免疫组织化学染色观察Survivin、Caspase-3、VEGF的表达。结果：①正常对照组小鼠肝组织内未见Survivin表达；5-FU组、人参皂甙Rg3组、人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织Survivin表达水平均明显低于肝癌模型组(P<0.05)；人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织Survivin表达水平低于5-FU组(P<0.05)和人参皂甙Rg3组(P<0.05)；5-FU组小鼠肝癌组织Survivin表达水平与人参皂甙Rg3组无明显差异(P>0.05)。 ②正常对照组小鼠肝组织Caspase-3表达水平明显高于肝癌模型组小鼠肝癌组织(P<0.05)；5-FU组、人参皂甙Rg3组、人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织Caspase-3表达水平均高于肝癌模型组(P<0.05)；人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织Caspase-3表达水平高于人参皂甙Rg3组(P<0.05)：5-FU组小鼠肝癌组织Caspase-3表达水平高于人参皂甙Rg3组(P<0.05)；人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织Caspase-3表达水平与5-FU组无明显差异(P>0.05)。 ③正常对照组小鼠肝组织VEGF表达水平明显低于肝癌模型组小鼠肝癌组织(P<0.05)；5-FU组、人参皂甙Rg3组、人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织VEGF表达水平均低于肝癌模型组(P<0.05)；人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织VEGF表达水平低于5-FU组(P<0.05)；人参皂甙Rg3组小鼠肝癌组织VEGF表达水平低于5-FU组(P<0.05)；人参皂甙Rg3联合5-FU组小鼠肝癌组织VEGF表达水平与人参皂甙Rg3组无明显差异(P>0.05)。结论：(1)人参皂甙Rg3联合5-FU应用时，能显著降低Survivin表达水平、提高Caspase-3表达水平，诱导肝癌细胞凋亡；能显著降低VEGF表达水平，抑制肝癌血管形成。 (2)单用人参皂甙Rg3和单用5-FU，对诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌血管形成均有一定作用。人参皂甙Rg3联合5-FU应用时，诱导肝癌细胞凋亡作用比单用人参皂甙Rg3和单用5-FU明显；抑制肝癌血管形成作用比单用5-FU明显。

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附图

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结论

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综述 细胞凋亡、血管形成与肝癌

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