高迁移率族蛋白B1刺激的调节性树突状细胞对调节性T细胞功能的影响

摘要

目的：高迁移率族蛋白B1(HMGBl)是广泛存在于真核细胞内的高度保守的非组蛋白染色体蛋白，可由巨噬细胞或单核细胞等主动分泌，或由坏死细胞被动释放。从而作为一种炎症晚期介质参与脓毒症等病理过程，介导脓毒症和其他系统性炎症的致死性效应，研究其病理生理作用将有助于深化对脓毒症发病机制的认识，并为免疫反应的调控提供潜在的干预目标。本试验拟应用HMGBl体外刺激小鼠脾脏树突状细胞(DC)的一个亚群--CD11low CD45RBhigh DC，阐明HMGBl对CD11clow CD45RBhigh DC表面共刺激分子CD80、CD86及主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ类分子表达的影响，进一步探讨对调节性T细胞分化的影响。为初步明确HMGBl免疫功能奠定基础，旨在为脓毒症、多器官功能障碍综合征的预防和治疗提供新思路。 方法：(1)无菌分离正常雌性BABL/c小鼠脾脏CD11clow CD45RBhigh DC，在含10％胎牛血清的1640培养液中调整细胞浓度1×105/孔后置于96孔培养板，分别用0.01μg/ml、0.1μg/ml、1.0μg/ml的HMGBl刺激获取的CD11clow CD45RBhigh DC，在刺激后12、24、36小时三个不同时间点，单克隆荧光抗体染色，用流式细胞仪观察HMGBl刺激与CD11clow CD45RBhigh DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHC-Ⅱ类分子表达的时间-效应关系及剂量-效应关系。(2)经0.01 μg/ml、0.1μg/ml、1.0μg/mlHMGB1刺激24小时的CD11clow CD45RBhigh DC按1∶150的比例与CD4+T细胞混合培养24小时后，单克隆荧光抗体染色，用流式细胞仪监测调节性T细胞(Tr)的特征性分化群CD25的表达情况。 结果： (1)流式细胞仪监测HMGB1对小鼠脾脏CD11clow CD45RBhigh DC表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ类分子表达的影响：用0.1μg/ml的MHGB1刺激12、24、36小时，与正常对照组相比，CD11clow CD45RBhigh DC表面共刺激分子CD80表达上调(P＜0.05或P＜0.01)；而CD86和MHC-Ⅱ表达下调(P＜0.05或P＜0.01)。0.01μg/ml、0.1μg/ml、1.0μg/ml 的HMGB1 刺激24 小时均可诱导CD11clowCD45RBhigh DC表面共刺激分子CD86和MHC-Ⅱ表达下调(P＜0.05或P＜0.01)。但CD80表达上调(P＜0.05或P＜0.01)。(2)与正常对照组相比，随HMGB1浓度的增加，CD25表达增强(P＜0.05或P＜0.01)。 结论：(1)HMGB1能诱导小鼠CD11clowCD45RBhigh DC表面共刺激分子CD86及MHC-Ⅱ分子表达减弱，同时CD80表达有所增强。影响CD11cbw CD45RBhigh DC成熟。(2)经HMGBl刺激的CD11clowCD45RBhigh DC可影响CD4+CD25+调节性T细胞的分化，总体趋势是随着HMGBl浓度的增加CD25表达增强(P＜0.05或P＜0.01)。

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结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 调节性树突状细胞在免疫调节中的作用

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