调营饮对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

摘要

目的：目前化疗仍是治疗恶性肿瘤的主要手段之一，但由于化疗药物对正常组织细胞与肿瘤细胞的破坏具有无选择性，故而化疗会导致机体一系列毒副反应。其中，骨髓抑制较为常见。严重时影响化疗如期进行而被动减量或停药，导致化疗失败。本文对调营饮对骨髓抑制小鼠造血调控进行了实验研究。
　　 方法：取昆明清洁级小鼠168只，体重18-22克，随机分为7组：正常组，模型组，调营饮治疗组，调营饮减丹参鸡血藤组，六味地黄汤组，八珍汤组，当归补血汤组。复制CTX所致小鼠骨髓抑制模型：配制10mg/ml的CTX注射液，各组小鼠每只腹腔注射0.2ml，空白组腹腔注射等量生理盐水，连续3天。造模当天，CTX注射后4小时灌胃给药，每天一次，连续10天。模型组及空白组予等量蒸馏水，于实验的第4、7、10天取静脉血，用全自动血球计数仪测外周血WBC、RBC、HGB、PLT，第7天的血同时检测EPO（放免法），之后取右侧股骨观察组织形态学改变（HE染色）及GM-CSF蛋白的表达（免疫组化法），同时取小鼠胸腺和脾计算胸腺指数和脾指数。第10天取血完毕，剥离小鼠股骨，PBS液冲出骨髓细胞，计数骨髓有核细胞计数。数据采用均数±标准差（x±s）表示，应用SPSS13.0软件进行统计学处理。采用完全随机设计的方差分析进行比较，并进行组间两两比较。
　　 结果：⑴模型组小鼠在各时段外周血中的WBC较正常组明显减少，第4天降至最低点，第7、10天略有上升，但均明显低于正常对照组水平，且有显著差异（P<0.01）。使用调营饮及各方组分后，各给药组不同时间点的白细胞数均有不同程度的升高。第4d调营饮、调营饮拆方、及八珍汤组的WBC与模型组比较有显著差异（P<0.05），第7d调营饮拆方组、六味地黄组、当归补血汤组的WBC水平虽高于模型组，但无统计学意义（P>0.05），而调营饮组、八珍汤组与模型组比较有显著差异（P<0.05）。第10d各给药组的WBC与模型组比较均有显著差异（P<0.05）；除八珍汤组外，调营饮明显优于其它各药物组（P<0.01）。⑵CTX对小鼠RBC水平的影响具有一定规律性，从注射完CTX开始，RBC呈下降趋势，第7d降至最低水平，而此后RBC水平略有上升。第4d，以调营饮拆方、六味地黄组与模型组比较差异显著（P<0.05）。第7d各用药组均能在一定程度上拮抗RBC水平的降低，而以调营饮、调营饮拆方组与模型组相比，具有显著差异（P<0.05）。第10d，用药组均有加速RBC回复的作用，各用药组与模型组比较均有显著差异（P<0.05）。调营饮组明显高于其它各治疗组，差异显著（P<0.05）。⑶CTX具有明显降低HGB水平的作用，其作用趋势同对RBC水平的影响，第7d降至最低，然后有所上升。第4d以调营饮拆方及六味地黄组能明显阻止水平HGB的下降（P<0.05）。第7d各用药组均能在一定程度上拮抗HGB水平的降低，而以调营饮、调营饮拆方、六味地黄汤组与模型组相比，具有显著差异（P<0.05）。第10d，各组的HGB均明显提高，各用药组与模型组比较均有显著差异（P<0.05）；调营饮组明显高于其它各治疗组，差异显著（P<0.05）。⑷经CTX造模各组在第4d，PLT均明显低于正常组水平，并具有显著差异（P<0.05或P<0.01），说明CTX能够成功的降低小鼠PLT水平；各药物组与模型组比较只有八珍汤组和调营饮组差异显著（P<0.05）。第7d，各给药组均不同程度的拮抗了PLT的下降，与模型组比较，除六味地黄汤组外均有显著差异（P<0.05或P<0.01）；第10d，模型组及各给药组的PLT进一步上升，与模型组比较调营饮及八珍汤组差异显著（P<0.05），调营饮虽高于八珍汤组，但二者之间并无差异。⑸模型组小鼠的脾指数和胸腺指数与正常组相比，均显著降低（P<0.05或P<0.01）；经调营饮及各治疗组治疗后，脾指数明显提高，与模型组相比，均有显著差异（P<0.05或P<0.01）；调营饮与其它各组比较无统计学意义（P>0.05）。各治疗组胸腺指数虽有不同程度的提高，但只有调营饮组与模型组比较有显著差异（P<0.05）。⑹模型组的EPO明显高于正常组，并有差异显著性（P<0.01）。经调营饮及各治疗组治疗后，进一步提高骨髓抑制小鼠血中EPO水平（P<0.05或P<0.01）；调营饮明显优于其它各药物组（P<0.05）。⑺模型组小鼠骨髓中的有核细胞较正常组明显减少（P<0.05），各药物组均能明显升高骨髓有核细胞数，除当归补血汤组外，与模型组比较有显著性差异（P<0.05），调营饮与其它各药物组比较，升高骨髓细胞的作用更为明显（P<0.05）。⑻正常组骨小梁结构清晰，造血细胞丰富，排列紧密，骨髓有核细胞及巨核细胞较多。模型组小鼠骨髓组织大量坏死、水肿，血窦扩张，骨髓有核细胞明显减少，未见有巨核细胞，并有梭形成纤维细胞增生。各给药组在连续用药7d后，骨髓造血组织不同程度地得到了修复，以调营饮组效果更为明显，血窦扩张不明显，骨髓有核细胞、巨核细胞明显增加，亦见有少量成纤维细胞⑼模型组小鼠粒细胞.巨噬细胞集落刺激生长因子（GM-CSF）表达即平均光密度值较正常组明显降低，与正常组比较有显著性差异（P<0.05）。经调营饮及各药物组治疗后，平均光密度值明显高于模型组，且有统计学意义（P<0.05）。调营饮组光密度值高于其它药物组和正常组，有显著性差异（P<0.05）。
　　 结论：①调营饮及各药物组均有不同程度的的提高外周血象、骨髓有核细胞计数的作用。在升高WBC方面，调营饮与八珍汤组效果相当，均明显优于其它各组，优势表现在起效快，升高幅度大，维持时间长；六味地黄汤、当归补血汤、调营饮拆方三者效果较差。对于RBC、HGB的影响，调营饮效果最好，拆方及六味地黄次之。在生血小板方面，调营饮与八珍汤组效果较好，均明显优于模型组。对于提升骨髓有核细胞计数的作用，调营饮组明显优于其它各组。②调营饮及各药物组均可提高骨髓抑制小鼠的脾指数。在升高胸腺指数方面，与模型组比较，只有调营饮组差异显著。提示调营饮具有免疫增强作用及促进髓外造血作用。③调营饮及各药物组均可促进EPO的分泌及GM-CSF的表达，在此方面调营饮组明显优于其它各治疗组。④调营饮及各治疗组均可不同程度的促进受损骨髓造血功能的恢复，血窦扩张不明显，骨髓有核细胞、巨核细胞明显增加，以调营饮组效果更为明显，接近于正常组。

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综述 中医药对化疗后骨髓抑制研究进展

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