兔眼玻璃体腔注射硫酸异帕米星的眼内安全性研究

摘要

目的：目前临床上常用的治疗细菌性眼内炎的方法为玻璃体腔注射万古霉素联合头孢他啶。万古霉素为临床上治疗细菌性眼内炎的一线用药，它是一窄谱杀菌抗生素，仅对革兰阳性菌有强大的杀菌作用，所以常和抗革兰阴性杆菌的头孢他啶联合应用治疗眼内炎。近年来细菌抗药性不断增加成为临床治疗感染性眼内炎的难题，任喆等研究发现革兰阳性球菌对万古霉素的敏感性有所下降，从100.0％降至84.4％：此外有研究表明万古霉素对凝固酶阴性的葡萄球菌（表皮葡萄球菌，溶血葡萄球菌，人葡萄球菌等）敏感性降低。2005年我国研究资料显示耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的发生率已达51.3％，而上海更是高达78.4％。表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌耐药菌株也有迅速增长趋势并且表现出对万古霉素的高度多样性耐药。这为临床用药敲响了警钟．头孢他啶是第三代头孢菌素类抗生素，他与万古霉素联合应用主要起抗革兰阴性菌的作用（铜绿假单胞菌）。头孢他啶随着临床用药的大剂量，长时间，以及用药不规范，革兰阴性杆菌对头孢他啶的耐药性逐年增加：2000年铜绿假单胞菌对头孢他啶的耐药率是14％。而戴滨等统计2006年铜绿假单胞菌对头孢他啶的耐药性已高达60％。硫酸异帕米星是第三代半合成氨基糖甙类抗生素，具有抗菌谱广、杀菌活性强、耐药性低、毒副作用小及良好的抗生素后效应等优势已广泛用于治疗严重感染性疾病和混合感染性疾病．国内外许多研究资料显示异帕米星表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等多种致病菌的体外抗菌活性较强，而这些正是细菌性眼内炎的主要致病菌。但眼内用药尚未见报道，本研究希望通过动物实验观察硫酸异帕米星玻璃体腔内注药后的视网膜毒性，从而为临床眼内用药提供实验依据。
　　 方法：
　　 1、筛选健康无眼疾的成年新西兰大白兔24只，常规饲养一周。
　　 2、术前常规测量并记录每只兔子的眼电生理：行全视野视网膜电流图（FERG）检查，记录暗示混合反应(Max-R)的b波振幅变化。
　　 3、将24只实验兔随机分为A、B、C、D四组，每组6只。硫酸异帕米星以生理盐水分别稀释成0.1ml含0.5，1.0，2.0，4.0mg异帕米星药液备用。随机选取每只兔的一眼为实验眼，在玻璃体内分别注射0.1ml不同浓度的药物；对侧眼为对照眼，在玻璃体内分别注射0.1ml生理盐水。
　　 4、术后1天，3天，7天，14天观察每只实验兔的眼前节及眼底情况并记录结果。每组随机抽取两只实验兔复查FERG。比较各组在各时间点的电生理值有无差异及术前术后的各时间点数值变化，然后对结果进行统计学分析。
　　 5、各组术后第3、7、14天均随机取两只兔（此时已做完电生理检查），摘取眼球，每只兔的两只眼一只放入10％福尔马林液中固定，48h后常规脱水，石腊包埋，制成石蜡切片，做HE染色，观察视网膜的大体形态。每只兔的另一只眼立即置入4℃、2.5％戊二醛液中固定，制成投射电镜图片，观察细胞超微结构改变。
　　 结果：
　　 1、裂隙灯检查：0.5mg，1.0mg，2.0mg，4.0mg四组除了0.5mg组有两只眼由于注药技术原因，在玻璃体腔注药时损伤了晶体，注药后第一天出现了晶体浑浊。其余各组均无角膜水肿、浑浊、后弹力层无皱褶；前房无出血、渗出等炎症反应；晶状体无浑浊；玻璃体无浑浊、出血。各组玻璃体注药后略见浑浊，一天后消失。
　　 2、直接检眼镜检查：0.5mg，1.0mg，2.0mg，4.0mg各组均无玻璃体浑浊、出血，视网膜均无水肿，出血，脱离，视网膜血管均无闭塞，迂曲，扩张。D组（4mg组）中一只眼于注药后第一天视网膜局部有水肿，第3天水肿明显减轻，第14天时水肿消失，其余无异常。
　　 3、视网膜电流图检查：Max-R的b波振幅，其中C(2mg)组实验眼于注药后3-7天振幅明显下降，与对照组有显著性差异，14天时又恢复正常；D(4mg)组实验眼注药后3天开始振幅下降，明显低于对照眼，与对照眼有显著性差异；其余二组各时间段实验眼b波振幅与对照眼无显著性差异。
　　 4、光镜结果：对照组和各药物剂量组在各时间段视网膜组织结构均未见异常。
　　 5、电镜结果：0.5mg，1.0mg组和2.0mg，4.0mg组的对照组各时间段视网膜组织结构均未见异常。2.0mg，4.0mg组实验眼各时间段异常改变如下：C组(2.0mg)3-7天时可见色素上皮层线粒体轻度肿胀，14天可见色素上皮层线粒体肿胀消失；D组(4.0mg)3天，色素上皮层线粒体轻肿胀，可见巨大溶酶体，7天时色素上皮层线粒体肿胀，脊消失。14天色素上皮细胞内线粒体中度水肿，外节膜盘紊乱，外从状层，内核层，节细胞中度水肿，神经纤维层水肿。
　　 结论：1.0mg剂量以下硫酸异帕米星兔眼玻璃体内注射是安全的。

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文摘

英文文摘

兔眼玻璃体腔汪射硫酸异帕米星的眼内安全性研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

参考文献

综述 异帕米星的抗菌作用及探索在眼内炎中的应用

参考文献

致谢

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