ERCC1基因多态性对上皮性卵巢癌患者铂类化疗应答和预后的影响

摘要

目的:卵巢癌在中国女性妇科恶性肿瘤中死亡率居第一位。因其发病隐匿,进展迅速,大约有70％的患者初诊时己为晚期。晚期卵巢癌标准化治疗法案是肿瘤细胞减灭术+术后以铂类为基础的联合化疗[1]。长期临床观察证实,尽管患者对铂类化疗的应答率较高,仅有20%在首次治疗时无应答,但在对铂类化疗有效的患者中至少有75%最终出现铂类耐药[2-3]。化疗耐药性的产生严重阻碍了化疗药物的抗肿瘤效应,使卵巢癌患者的5年生存率徘徊在25%～30%左右。因此,如化疗前筛选出铂类抵抗者,对其实施其他的治疗方案,可能提高患者的总体生存时间。研究发现DNA损伤修复在铂类耐药机制中起着关键作用[4],DNA损伤修复能力增强是导致卵巢癌铂类耐药的主要原因之一。切除修复交叉互补基因1(excisionrepair cross-complementation group ERCC1)是核苷酸切除修复途径中的重要成员,不仅与肿瘤的发生相关,而且与肿瘤耐药、放疗、化疗疗效的预测以及治疗预后的判定关系密切。本论文旨在探讨核苷酸切除修复基因ERCC1的单核苷酸多态性在卵巢上皮性癌铂类化疗耐药及预后的判断中的作用,为寻找卵巢癌化疗的分子标志物和实现患者的“个体化”治疗提供理论依据。
　　 方法:本研究采用病例回顾研究方法,以209例上皮性卵巢癌患者为研究对象。所有患者均为术后病理学确诊。每位患者化疗前均留取外周静脉抗凝血5ml,采用蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chainreaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法检测ERCC1基因3'UTR8092C/A和第四外显子118C/T基因多态位点的基因型频率分布。
　　 统计学处理:数据统计分析采用SPSS13.0版软件包(SPSS Company,Chicago,Illinois,USA)进行。基因型和等位基因频率分布比较采用X2检验;基因型和临床病理参数相关性采用Fisher's确切检验;以非条件logistic回归方法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(confidence interval,CI);生存分析采用Kaplan-Meier方法分析;基因型与患者死亡和复发风险的关联采用以年龄、病理类型和病理分期等校正的Cox's模块计算。P＜0.05为差异有显著性的标准。
　　 结果:
　　 1、研究对象的临床特征与疾病复发及生存的关系:在209例患者临床特征中,肿瘤分期、分级、手术残存病灶和患者的初诊年龄与上皮性卵巢癌患者的临床预后明显相关。统计学分析显示,患者初诊时年龄≥50岁、FIGO分期为晚期、临床分级为低分化和手术残余病灶≥2cm的患者复发和死亡的风险明显增加。病理组织分型与临床预后无关。
　　 2、ERCC1两个多态性位点的基因型频率与卵巢癌患者铂类化疗的预后
　　 关系:ERCC119007 C/T基因多态的基因型频率与患者对铂类药物应答有明显关联。三种基因型频率分布(C/C、T/C、T/T)在非应答组和应答组中分别为39.4%、43.7%、16.9%和50.7%、48.6%、0.7%。两组比较差异有统计学意义(P＜0.001)。与C/C基因型相比,携带T/T基因型患者可明显增加对铂类药物的耐药性(HR=30.119,95%CI=3.448～263.087)。8092C/A基因多态中基因型频率与药物应答之间无明显关联。8092C/A基因多态三种基因型频率分布(C/C、C/A、A/A)在非应答组和应答组中分别为:60.6%、30.9%、8.5%和53.6%、39.8%、6.6%。两组比较差异无统计学意义(P=0.439)。其等位基因(C、A)的频率分别为43.5%、56.5%和31.8%、68.2%,两组比较无显著性差异(P=0.578)。
　　 3、ERCC1两个SNPs位点的基因型频率与疾病复发、生存的相关性:在ERCC119007 C/T基因多态中,携带基因型C/C、C/T和T/T卵巢癌患中位PFS分别为20月、18月、和5月;平均OS分别为36月、32月和19月。与C/C基因型相比,携带T/T基因型患者明显缩短中位PFS和平均OS。Kaplan-Meier生存曲线显示携带19007 C/T不同基因型患者PFS、OS的分布情况。Cox比例风险模型分析,经年龄、病理分级、临床分期、残余病灶组织类型等影响因素调整后,结果显示,携带T/T基因型患者与携带C/C基因型相比,明显增加疾病复发风险(HR=3.34;95%CI=1.77-6.29)和死亡风险(HR=2.67;95%CI=1.286-5.543)。在8092C/A基因多态中,携带基因型C/C、C/A和A/A卵巢癌患中位PFS分别为15月、24月、和21月;平均OS分别为32月、31月和36月。在携带不同基因型患者中,其中位PFS时间和平均OS时间没有显著差异(均P＞0.05)。在8092C/A基因多态,携带C/C基因型与C/A及A/A基因型相比,其疾病复发时间及总生存时间无统计学差异。
　　 结论:
　　 1、ERCC1第4外显子19007 C/T多态可能与上皮性卵巢癌的铂类化疗耐药性及患者生存率相关,即携带T/T基因型可增加患者对铂类药物的耐药性,增加患者死亡率。
　　 2、ERCC13'UTR8092C/A多态可能与上皮性卵巢癌的铂类化疗敏感性及生存无关。
　　 3、研究结果提示ERCC1基因上的某些多态位点可能是上皮性卵巢癌患者铂类化疗的分子标志物。