眼部缺血综合征的临床分析及动物模型的初步探讨

摘要

目的：眼部缺血综合征(Ocular ischemic syndrome，OIS)是指眼的前节和后节以及眼动脉所供血的眼眶结构由于慢性缺血而引起的严重的病理状态，主要是由严重的颈动脉狭窄引起，通常伴有高血压、糖尿病等严重的全身性疾病。由于对OIS的认识不足，加上其临床表现复杂多样，因此，目前临床上对该病仍然存在较高的漏诊率和误诊率，而且OIS预后差，又无特效的治疗方法，所以，对该病的早期诊治，依然是当前预防疾病发展，降低患者死亡率的关键。开创新的有效的治疗方法是解决OIS的根本问题，深入的研究OIS的发生发展机制，可以为此提供理论依据，理想的动物模型对于深入的研究OIS是必要的，然而，目前仍然缺乏理想的动物模型用于OIS的实验研究。通过阻断血压正常大鼠的双侧颈总动脉(Bilateral common carotid artery occlusion，BCCAO)以造成眼部缺血的方法已经被逐渐应用于缺血性眼病的实验研究中，这一动物模型在一定程度上模仿了OIS的发病原因，但是，对于临床上更多见的全身合并症对眼部的影响缺乏代表性。自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensiverat，SHR)是目前研究高血压病的最理想的动物模型，采用SHR BCCAO的方法，为研究临床上最常见的OIS合并高血压的眼部改变提供了可能。本研究旨在通过对OIS患者临床资料的分析，了解OIS的临床特征，并进一步比较OIS合并高血压患者与无高血压患者眼部病变的区别，为OIS的早期诊断提供临床依据，在此基础上，应用SHR BCCAO的方法，初步观察大鼠眼部的改变，探讨该方法作为OIS动物模型的可能性，为研究OIS的发生发展机制提供实验依据。
　　 方法：
　　 1.眼部缺血综合征患者的临床分析
　　 采用回顾性的研究方法，分析124例(151只眼)在石家庄市第四医院眼科诊断为OIS患者的病例资料，主要包括性别、年龄、病史、临床表现以及颈动脉彩色多普勒超声(Color doppler flow imaging，CDFI)和眼底荧光血管造影(Fundus fluorescein angiography，FFA)等资料，计量资料用均数±标准差(X-±S)表示，计数资料以百分率(％)表示，对OIS合并高血压患者与无高血压患者的视力比较采用秩和检验，眼底病变的区别采用x2检验。
　　 2.眼部缺血综合征动物模型的初步探讨
　　 采用3月龄的雄性SHR和年龄性别匹配的Wistar-Kyoto大鼠(Wistar-Kyotot rat，WKY)各16只，分别将两种大鼠各自随机的分为缺血组和假手术组，共4组，每组8只大鼠，缺血组大鼠行BCCAO术，假手术组大鼠除不阻断双侧颈总动脉外，其余手术过程与缺血组完全相同。术后4个月，观察各组大鼠的眼部表现(n=16眼)并检测瞳孔对光反射(n=16眼)，然后将大鼠眼球用4％多聚甲醛灌注固定后再完整取出，继续后固定过夜，然后随机将一侧眼球制成视网膜铺片做ADP酶染色(n=8眼)，观察视网膜血管的改变，将另一侧眼球制成石蜡切片做苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin，H&E)染色(n=8眼)，观察视网膜神经节细胞数量和各层厚度的改变，计量资料用均数±标准差(X-±S)表示，计数资料以百分率(％)表示，对各组大鼠瞳孔对光反射灵敏程度比较采用秩和检验，对视网膜血管的面积密度、神经节细胞数量和视网膜厚度的比较采用单因素方差分析，p<0.05为差异有统计学意义。
　　 结果：
　　 1.眼部缺血综合征患者的临床分析
　　 1.1.性别和年龄分布：
　　 OIS患者年龄介于34-81岁，平均63.64±12.13岁，70～79岁患者数量最多，占37.10％，男：女=1.8:1；
　　 1.2.合并症：
　　 96.77％的患者存在不同程度的颈动脉或颈内动脉狭窄，69.35％的患者合并高血压，32.26％的患者合并糖尿病，30.65％的患者合并心脑血管疾病；
　　 1.3.症状与体征：
　　 94.35％的患者存在不同程度的视力下降，发生过一过性黑朦的患者占41.13％，所有患眼均出现视网膜动脉变细和静脉扩张，79.47％的患眼出现视网膜出血，FFA检查发现所有患眼臂-视网膜循环时间和视网膜动-静脉循环时间均有不同程度的延长，70.2％的患眼有微血管囊性扩张，71.52％的患眼存在毛细血管无灌注区；
　　 1.4.OIS合并高血压组患者的视力和眼底病变比无高血压组患者显著加重(p<0.01)。
　　 2.眼部缺血综合征动物模型的初步探讨
　　 2.1.外眼观察
　　 SHR缺血组大鼠各有6.25％眼出现白内障和眼球萎缩，其余各组大鼠外眼观察未见明显异常；
　　 2.2.瞳孔对光反射
　　 眼部缺血4个月后，SHR和WKY瞳孔对光反射较对照组均迟钝(p<0.01)，SHR缺血组较WKY缺血组更严重(p<0.01)；
　　 2.3.视网膜血管面积密度
　　 WKY缺血组显著低于WKY假手术组(0.34±0.07:0.44±0.04，p<0.01)，SHR缺血组显著低于SHR假手术组(0.27±0.06:0.38±0.05，p<0.01)，与WKY假手术组相比，SHR假手术组也显著降低(0.38±0.05:0.44±0.04，p<0.05)；
　　 2.4.视网膜神经节细胞的线密度(细胞数/mm)和厚度(μm)
　　 与WKY假手术组大鼠相比，SHR假手术组大鼠神经节细胞显著降低(62.62±2.62:66.83±3.05，p<0.05)，WKY缺血组和SHR缺血组大鼠神经节细胞均显著低于WKY假手术组和SHR假手术组(35.68±3.67：66.83±3.05，p<0.01；29.60±4.77:62.62±2.62，p<0.01)，各组大鼠视网膜总厚度的改变与神经节细胞的变化趋势一致。
　　 结论：
　　 1.OIS是一种严重的眼部慢性缺血性疾病，主要发生在老年人，男性大约是女性的两倍，FFA是诊断该病的关键方法，合并高血压的患者眼部病变比无高血压的患者显著加重；
　　 2.SHR BCCAO4个月后，眼部有多种病理改变与OIS患者表现相似，与WKY眼部缺血后病理改变相比，和OIS相似的病理改变多且更为明显，该动物模型是OIS可能的动物模型。