组织因子(TF)和组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)在胎膜早破患者胎膜和胎盘中的表达

摘要

目的：胎膜早破(Premature rupture of membranes，PROM)是产科常见并发症之一。根据发病孕周的不同，胎膜早破分为两种：未足月胎膜早破(Preterm premature rupture of membranes，PPROM)和足月胎膜早破(Term premature rupture of membranes，TPROM)。PPROM是指妊娠未满37周胎膜于临产前发生破裂，而TPROM指妊娠满37周胎膜于临产前发生破裂。胎膜早破尤其是未足月胎膜早破对母婴健康均有多种不利影响。胎膜早破的确切病因尚未完全明了。目前，国内外研究普遍认为，胎膜早破的发病是受多因素影响、通过多途径触发、并由多基因调控的结果，最终导致胎膜细胞外基质(Extracellular matrix，ECM)降解和胎膜细胞凋亡，从而引起胎膜破裂。近年国外文献报道提出的新观点认为，凝血功能的失衡可能是胎膜早破发病因素之一。
　　组织因子(Tissue factor，TF)和组织因子途径抑制物(Tissue factorpathway inhibitor，TFPI)是人体内重要的凝血和抗凝血因子。TFPI包括两种类型，TFPI-1和TFPI-2。其中，TFPI-2可通过抑制多种蛋白酶的活性来维持细胞外基质的稳定。
　　本课题拟通过分析胎膜早破患者与正常晚孕妇女胎膜及胎盘组织中TF及TFPI-2的表达，分析二者与胎膜早破发病的相关性，从凝血功能失衡这一新的角度探讨胎膜早破的发病机制。
　　方法：选择2011年1月～2012年1月在河北医科大学第二医院产科住院行剖宫产术分娩的正常晚孕妇女和胎膜早破患者共90例。其中正常晚孕妇女(Control组)30例，足月胎膜早破患者(TPROM组)30例，未足月胎膜早破患者(PPROM组)30例。三组孕妇均为未进入产程而行剖宫产术，胎盘娩出5分钟内，在母面近脐带根部直径3cm区域取约1.0cm×1.0cm×1.0cm的组织。同时，取近宫颈处胎膜组织约1.0cm×1.0cm大小两块。标本常规固定、包蜡、切片，行免疫组化测定。试验一抗为兔抗人TF多克隆抗体(生物学效价为1:50)、鼠抗人TTPI-2单克隆抗体(生物学效价为1:50)。用已知阳性标本做阳性对照，用1％BSA代替一抗做阴性对照，镜下观察并做结果判定。应用SPSS17.0统计软件进行数据处理。临床一般资料为计量资料采用单因素方差分析；病理标本指标比较采用两独立样本比较的秩和检验(Wilcoxon两样本比较)，以平均秩次表示，分别与对照组进行两两比较。以α=0.05为检验水准，以P<0.05认为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1.胎膜组织中TF的定位及阳性表达率比较
　　三组孕妇TF表达部位均在细胞膜或胞浆中(见Fig.1、2、3)，阳性染色均呈棕色、褐色。PPROM组较Control组胎膜组织中TF表达上调，差异有统计学意义(P<0.05)；TPROM组较Control组胎膜组织中TF表达亦上调，但差异无统计学意义(P>0.05)(见Table1)。
　　2.胎膜组织中TFPI-2的定位及阳性表达率比较
　　三组孕妇TFPI-2表达部位均在细胞胞浆中(见Fig.4、5、6)，阳性染色均呈棕色、褐色。其中PPROM组及TPROM组较Control组胎盘组织中TFPI-2表达均下调，差异有统计学意义(P<0.05)(见Table2)。
　　3.胎盘组织中TF的定位及阳性表达率比较
　　TPROM组及PPROM组胎盘组织中TF定位与Control组相同，主要分布于胎盘滋养细胞胞膜或胞浆中(见Fig.7、8、9)，阳性染色均呈棕色、褐色。PPROM组较Control组胎盘组织中TF表达上调，差异有统计学意义(P<0.05)；TPROM组较Control组胎盘组织中TF表达亦上调，但差异无统计学意义(P>0.05)(见Table3)。
　　4.胎盘组织中TFPI-2的定位及阳性表达率比较
　　TPROM组及PPROM组胎盘组织中TFPI-2定位与Control组相同，主要分布于胎盘滋养细胞胞浆中(见Fig.10、11、12)，阳性染色均呈棕色、褐色。PPROM组较Control组胎盘组织中TFPI-2表达下调，差异有统计学意义(P<0.05)；TPROM组较Control组胎盘组织中TTPI-2表达亦下调，但差异无统计学意义(P>0.05)(见Table4)。
　　结论：通过免疫组织化学法检测发现，与正常晚期妊娠相比，胎膜早破尤其是未足月胎膜早破患者胎膜和胎盘中TF的表达水平上调，与之相反，TFPI-2在胎膜和胎盘中的表达水平下调。其中，未足月胎膜早破组与正常晚期妊娠组相比差别有统计学意义(P<0.05)；而足月胎膜早破组仅TFPI-2在胎膜中的表达与正常晚期妊娠组相比差别有统计学意义(P<0.05)，但TF在胎膜和胎盘中的表达以及TFPI-2在胎盘中的表达与正常晚期妊娠组相比差别无统计学意义(P>0.05)。