TIRAP和TLR2基因多态性与结核分枝杆菌易感性相关性研究

摘要

目的:结核病是一种致死性传染性疾病，事实上每年大约有200万人死于结核。本实验通过检测TIRAP的rs595209、rs7932766、rs8177374和rs8177400四个位点与TLR2的rs5743708和rs3804099两个位点基因多态性，分析它们与结核病易感性之间的关系。
　　 方法:采用病例和对照研究方法进行实验设计。选取在河北省胸科医院住院的河北石家庄地区汉族结核病患者280例作为活动性结核病例组，选取籍贯为河北石家庄地区的、与结核病人密切接触的汉族医生、护士222例作为隐性感染者;选取在河北省人民医院进行健康体检的河北省石家庄地区汉族人187例为对照。采集所有研究对象的空腹EDTA抗凝静脉血，并提取血样基因组DNA。在样本中测序检测TIRAP与TLR基因中可能存在的基因多态性，利用多重SNaPshot分析法对三组研究对象中TIRAP的4个SNPs即rs595209，rs7932766， rs8177374，rs8177400和TLR2的2个SNPs即rs5743708，rs3804099进行分型分析，并通过统计学方法分析这些基因的多态性与结核病易感性之间的相关性。
　　 结果:
　　 1、本研究中所有研究对象均通过随机方式选取的，没有对性别和年龄进行控制。三组间性别比较，差异有统计学意义(X2=63.770，P=0.000)，进一步做两两比较，LTBI组男性所占比例为32.0％，低于对照组(56.1％)，ATB组男性所占比例为67.5％，高于对照组(56.1％)和LTBI组(32.0％)，差别均有统计学意义(P＜0.0167);三组年龄比较，差异有统计学意义（F=4.160，P=0.016），进一步做两两比较，LTBI组平均年龄为42.10±12.76，高于对照（37.73±10.79），其余两两比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。
　　 2、三组研究对象各基因型频率观察值与预期值经X2检验，均没有显著性差异（均P＞0.05），三组研究对象均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律，研究对象具有代表性。
　　 3、X2检验发现，TLR2基因的两个SNPs位点，它们的等位基因及基因型在结核病患者组与正常对照组之间、结核病患者组与隐性感染组之间及隐性感染组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P＞0.05)。TIRAP的4个SNPs位点中，rs8177400无基因多态性。rs7932766只存在CC和CT两种基因型，在结核病患者组与正常对照组之间，及结核病患者组与隐性感染者之间等位基因及基因型分布上的差异无统计学意义（P＞0.05），但是在隐性感染组与正常对照组之间等位基因及基因型均有显著差异（P＜0.05）。与正常对照组相比，隐性感染组无论T等位基因还是CT基因型均与结核易感性相关(OR=0.22，95％CI=0.06-0.81; OR=0.22，95％CI=0.06-0.80)，说明等位基因T及基因型CT为结核发病的一个保护性因素。
　　 4、进一步进行多因素方差分析发现，在控制性别和年龄后，TLR2的rs3804099位点的CC基因型在活动结核组与正常对照组之间比较有显著统计学意义(P＜0.05)。CC基因型与结核易感性相关(OR=2.04，95％CI=1.04-4.08)，是结核病发病的危险因素。TIRAP的rs7932766在多因素方差分析中，基因型CT仍然为结核发病的一个保护性因素(OR=0.26，95％CI=0.69-0.97)。
　　 5、经单因素和多因素分析，TLR2的rs5743708及TIRAP的rs595209、rs8177374位点的基因型及等位基因分布在各组均未有明显差异(P＞0.05)，说明这3个位点均不是石家庄市地区汉人结核易感因素。rs8177400无基因多态性。
　　 结论:
　　 1、X2检验发现，TLR2的rs3804099与结核易感性无相关性。控制性别和年龄因素后，TLR2的rs3804099的CC基因型与结核易感性相关，是石家庄地区汉人结核发病的一个危险因素，
　　 2、经单因素和多因素分析，TIRAP的rs7932766等位基因T及基因型CT为石家庄地区汉人结核发病的一个保护性因素。
　　 3、TLR2的rs5743708,TIRAP的rs595209、rs8177374、8177400与石家庄地区汉人结核发病没有相关性。

目录

声明

摘要

英文缩写

前言

材料与方法

1 研究对象

2 实验材料

3 实验方法

结果

1 三组研究对象的一般情况分析

2 三组研究对象的不同SNPs的检测结果

3 三组研究对象基因型的遗传平衡分析

4 单个SNP位点X2检验与TB的关联分析

5 控制性别和年龄后，6个SNPs位点与结核易感性分析

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 固有免疫在分枝杆菌感染中的作用

致谢

个人简历