DNA修复基因遗传多态性与上皮性卵巢癌患者铂类化疗临床预后关系的研究

摘要

目的:铂类药物的抗肿瘤的机制在于与细胞内的DNA结合，形成Pt-DNA加合物，导致DNA的链间或链内交联，引起DNA复制障碍，从而抑制肿瘤细胞分裂。DNA损伤修复系统如果及时修复了Pt-DNA加合物，则会导致铂类药物的耐药;而DNA修复能力的下降则导致铂类药物疗效的提高。因此，个体DNA修复能力的改变可能是影响铂类药物疗效的重要原因。DNA损伤修复系统中以核苷酸切除修复(NER)和碱基切除修复(BER)途径与铂类化疗的关系最密切，是修复Pt-DNA加合物的最主要的途径。本研究拟探讨NER和BER途径的核心基因XPC、XPD和XRCC1单核苷酸多态(SNPs)与上皮性卵巢癌患者铂类化疗应答和临床预后的关系。
　　 方法:213例上皮性卵巢癌(EOC)患者为2001年12月至2008年6月于河北医科大学第四医院妇产科进行手术治疗的北方汉族妇女，术前未行放射或化学治疗，术后均经组织病理学检查确诊。采用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)或引物介导的限制性聚合酶链反应(PIRA-PCR)技术对上述患者的XPC、XPD和XRCC1基因上的8个SNPs位点(XPC Ala499Val、Lys939Gln、PAT+/-; XPD Asp312Asn、Lys751Gln; XRCC1 Arg194Trp、Arg280His、Arg399Gln)进行基因分型，结合临床病例回顾，比较不同基因型与患者化疗应答和预后的关系。
　　 数据分析采用SPSS13.0统计软件进行处理。基因型和等位基因频率分布比较采用x2检验，以非条件logistic回归方法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio，OR)及其95％可信区间(confidence interval，CI)。生存分析采用Kaplan-Meier法，各因素水平间比较用Log-rank及Breslow分析，Cox回归模型进一步分析预后相关因素（患者年龄、肿瘤分化程度、病理类型、临床分期、残余病灶）。P＜0.05作为差异有显著性的标准。
　　 结果:
　　 1、卵巢癌患者化疗敏感组与不敏感组之间XPC、XPD和XRCC1基因上的8个SNPs位点的基因型和等位基因频率分布无统计学差异(P值均大于0.05)。
　　 2、携带XPC Lys939Gln多态Lys/Lys基因型和Lys/Gln+Gln/Gln基因型的患者在接受铂类化疗后的中位无疾病进展生存时间(PFS)分别为25和12个月，Kaplan-Meier单因素分析，两者相比差异有统计学意义(P=0.039)。但进一步的Cox回归多因素分析显示，XPC Lys939Gln多态的基因型及等位基因频率分布与EOC患者铂类化疗后的PFS无关联。
　　 3、XPC Ala499Val、PAT+/-;XPD Asp312Asn、Lys751 Gln和XRCC1Arg194Trp、Arg280His、Arg399Gln7个单核苷酸多态位点的基因型和等位基因频率分布与上皮性卵巢癌患者铂类化疗后的PFS无相关性。
　　 4、携带XPC Lys939Gln多态Lys/Lys基因型和Lys/Gin+ Gln/Gln基因型的患者在接受铂类化疗后的中位总生存时间(OS)分别为31.1和27.8个月，Kaplan-Meier单因素分析，两者相比有统计学差异(P=0.048)。进一步的Cox回归多因素分析显示，与Lys/Lys基因型相比，携带Gln等位基因的EOC患者总生存时间明显减少(HR=1.75，95％ CI=1.06～2.91)。
　　 5、XPC Ala499Val、PAT+/-;XPD Asp312Asn、Lys751 Gln和XRCC1Arg194Trp、Arg280His、Arg399Gln7个单核苷酸多态位点的基因型和等位基因频率分布与上皮性卵巢癌患者铂类化疗后的OS无相关性。
　　 结论:
　　 1、XPC、XPD和XRCC1基因多态性可能与上皮性卵巢癌患者铂类化疗的敏感性无关。
　　 2、XPC、XPD和XRCC1基因多态性可能与上皮性卵巢癌患者铂类化疗的PFS无关。
　　 3、XPC基因Lys939Gln多态可能与中国北方妇女上皮性卵巢癌患者铂类化疗的临床预后密切相关。
　　 4、XPC Ala499Val、PAT+/-;XPD Asp312Asn、Lys751Gln和XRCC1Arg194Trp、Arg280His、Arg399Gln7个单核苷酸多态位点可能与上皮性卵巢癌患者铂类化疗后的OS无相关性。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 主要实验仪器及设备

2 主要实验试剂

3 研究对象

4 外周血白细胞DNA的提取

5 XPC SNPs基因分型

6 XPD SNPs基因分型

7 XRCC1 SNPs基因分型

8 化疗方案及疗效评价

9 统计学分析

结果

1 一般特征

2 8个SNPs与卵巢癌患者铂类化疗应答的关系

3 XPC Ala499Val，PAT+／-，Lys939Gln多态性与患者临床预后的关系

4 XPD Asp312Asn、Lys751Gln；XRCC1 Arg194Trp、Arg280His、Arg399Gln SNPs的基因型分布与临床预后的关系

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 DNA修复基因单核苷酸多态性与卵巢癌患者铂类化疗应答及预后的相关性研究进展

致谢

个人简历