Eg5、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

摘要

肺癌是目前全世界死亡率最高的癌症之一。近年发病和死亡人数均呈上升趋势，2003年世界卫生组织(WHO)公布的发病率是120万/年，死亡率是110万/年。在肺癌的发生发展过程中，了解其分子水平上细胞癌变及生长的机制，是预防和治疗肺癌的基础，具有十分重要的意义。
　　Eg5是一种有丝分裂驱动蛋白，具有高度保守的N端马达结构域，能够水解ATP并向微管正极移动，是具有ATP酶活性和运动特性的马达分子，是迄今为止了解较多的驱动蛋白。Eg5蛋白的表达与细胞有丝分裂比例相关，因而推测其蛋白水平可能与肿瘤生长速度有关，一系列临床前期和临床研究结果也支持这一推测。Saijo研究发现Eg5在非小细胞肺癌中表达明显高于正常的肺组织，且Eg5表达阳性的非小细胞肺癌患者预后更差。Eg5的抑制剂可以导致细胞凋亡，是当前肿瘤靶向治疗的研究热点。增值细胞核抗原Ki-67是一种与细胞周期相关的蛋白质，其功能与有丝分裂密切相关，在细胞增值中是不可缺少，目前多种恶性肿瘤可以通过检测Ki-67抗原了解恶性肿瘤的细胞增值活性。Ki-67表达与肺癌发生、发展有关，是一个不良预后因素，对肺癌的诊断治疗及预后评价有重要的参考价值。
　　目的:探讨Eg5和Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理特征的关系，分析Eg5和Ki-67在非小细胞肺癌发生发展中的作用机制。了解肺癌的发病机制，并筛选出Eg5高表达病例，选择性应用Eg5拮抗剂，为肺癌的术后治疗提供用药依据。
　　方法:回顾性分析2012.1-2013.12年间河北省邯郸市中心医院手术切除非小细胞肺癌确诊标本，患者术前均未接受放疗或化疗。选取87例各种类型的非小细胞肺癌标本及20例肺良性病变（肺结核8例，支气管扩张6例，肺大泡6例）作为阴性对照。成功制备58组织芯片蜡块3个（部分标本采集两个位点），经连续切片共得到有效样本79例，肺良性病变标本20例，采用免疫组织化学染色（两步法），检测肺癌石蜡标本Eg5、Ki-67蛋白表达情况。用HMIAS-2000病理图像分析系统测得阳性细胞的灰度值，分析不同肺组织中Eg5、Ki-67蛋白表达强度的变化规律及与肺癌临床病理特征之间的关系，并随访患者生存期。用SPSS16.0统计分析软件进行处理，采用x2检验和相关性检验比较有无统计学意义，P＜0.05表达差异具有统计学意义。
　　结果:
　　1非小细胞肺癌组织Eg5蛋白阳性总表达率为64.6％，在各型癌组织中以腺鳞癌阳性表达率最高80％。其次为腺癌71.4％。在不同类型的非小细胞肺癌组织中Eg5阳性表达率与肿瘤类型无显著统计学意义（X2=2.988，P＞0.05）。非小细胞肺癌Eg5蛋白表达与淋巴结转移密切相关，差异有统计学意义（X2=7.361，P＜0.05)。在淋巴结转移数目的分析中发现，Eg5与淋巴结转移数量呈明显相关性，淋巴结转移数目越多，Eg5蛋白阳性表达强度越强（X2=23.304，P＜0.001）。
　　2非小细胞肺癌Eg5蛋白表达与肿瘤的分化程度有显著相关性，肿瘤分化程度越差，Eg5蛋白阳性表达强度越强，差异具有统计学意义(X2=6.127，P＜0.05)。
　　3 Ki-67在各种类型非小细胞肺癌中阳性总表达率为64.6％，在各类型非小细胞肺癌中Ki-67的阳性表达率与肿瘤类型无显著统计学差异（X2=6.974，P＞0.05）。
　　4非小细胞肺癌Ki-67蛋白的表达与淋巴结转移有显著统计学差异（X2=10.298，P＜0.05）。在淋巴结转移数目的分析中发现，Ki-67与淋巴结转移数量呈相关性，转移数目越多，Ki-67阳性蛋白表达率越高(X2=8.468，P＜0.05)。
　　5在非小细胞肺癌中，Eg5的表达与Ki-67的表达呈弱的正相关性，即:Ki-67蛋白阳性表达率越高，Eg5的阳性表达强度越强（相关系数=0.0406，P＜0.05）。
　　结论:
　　1 Eg5在非小细胞肺癌中的表达与淋巴结是否转移存在显著统计学差异，淋巴结转移组的Eg5阳性表达率明显高于淋巴结无转移组，且淋巴结转移数目越多，Eg5蛋白阳性表达率越高。此外，在非小细胞肺癌中Eg5蛋白的表达与肿瘤的分化程度存在显著统计学差异，肿瘤分化程度越低，Eg5阳性蛋白表达率越高。
　　2 Ki-67蛋白在各种类型的非小细胞肺癌中均有表达，且表达差异不大，表达率在15％-55％。并且淋巴结转移组的Ki-67表达率明显高于淋巴结无转移组。在淋巴结转移数目分析中显示淋巴结转移数目越多，Ki-67蛋白阳性表达率越高。
　　3 Eg5与Ki-67的表达呈弱的正相关性，相关系数为0.0406。
　　4 Eg5可以作为非小细胞肺癌的分子靶点，应用Eg5拮抗剂进行新辅助治疗，可以提高治疗效果，减轻治疗痛苦，延长患者生存期。
　　5组织芯片手工制做，程序简单、经济方便，是一种简便可行，高效稳定的技术方法，能满足相关科研课题和实际工作的需要。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 实验方法

3 对照设置

4 结果判定

5 统计学处理

结果

1 组织芯片制备、HE染色及免疫组化染色结果

2 非小细胞肺癌组织中Eg5蛋白表达与临床病理特征的关系

3 非小细胞肺癌组织中Ki-67蛋白表达与临床病理特征的关系

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 驱动蛋白Eg5的研究现状及临床意义

致谢

个人简历