2014年石家庄地区围产期妇女B族链球菌的耐药性及其耐药基因的研究

摘要

目的:
　　1、掌握石家庄地区围产期妇女B族链球菌的耐药性和流行情况，指导临床合理用药。
　　2、采用PCR方法对B族链球菌耐药基因进行扩增以确定其基因型别，掌握石家庄地区围产期妇女B族链球菌的分子流行病学特点。
　　方法:
　　1、菌株来源
　　收集石家庄市第四医院2014年1月至2014年12月从妊娠35～37周妇女的阴道分泌物中分离出的不重复B族链球菌菌株。用梅里埃ATB细菌鉴定仪并结合CAMP抑制试验进行B族链球菌菌株鉴定。
　　2、鉴定及药敏试验
　　用梅里埃ATB细菌鉴定仪并结合CAMP抑制试验进行B族链球菌菌株鉴定。药物敏感试验应用K-B纸片法进行。以CLSI M100-S23文件(2013版)为标准进行药敏结果判断。
　　3、检测细菌的耐药基因
　　选取与B族链球菌红霉素耐药相关6种耐药基因。采用PCR技术进行基因扩增。在琼脂糖凝胶中对扩增的基因进行电泳分离，置于紫外凝胶成像系统进行观察结果，以maker为标准进行判断，产物大小与目的基因相同为阳性，进行照相保存其影象。
　　4、 DNA测序分析
　　从耐药基因阳性的mreA、mefA、ermA、ermB和mefE基因中随机选取2～4株PCR产物进行DNA测序，并将测得的DNA序列与GenBank数据库进行比对，确定其基因亚型以及有无核苷酸序列的改变。
　　结果:
　　1、B族链球菌的检出率
　　石家庄市第四医院2014年1月至2014年12月，对妊娠35～37周妇女阴道分泌物共计3504份标本进行培养，分离出B族链球菌96株，检出率为2.74％。
　　2、B族链球菌药敏试验结果
　　对分离出的96株B族链球菌进行了临床常用的14种抗菌药物耐药性测定，结果显示:
　　(1)头孢曲松（Ceftriaxone/CRO）、哌拉西林(Piperacillin/PIP)、哌拉西林/他唑巴坦(Piperacillin-Tazobactam/TZP)、头孢哌酮/舒巴坦(Cefperazone-Sulbactam/SCF)、头孢孟多(Cefamandole/MA)、头孢硫脒(Cefathiamidine/CHM)全部敏感。
　　(2)阿莫西林/克拉维酸(Amoxycillin-Clavulanie acid/AMC)、氨苄西林/舒巴坦(Ampicillin-Sulbactam/SAM)、头孢唑林(Cefazolin/CZ)、头孢呋辛(Cefuroxime/CXM)、青霉素(Penicillin/P)出现部分耐药，耐药率分别为3.13％、2.08％、2.08％、1.04％、1.04％。
　　(3)红霉素(Erythromycin/E)、克林霉素(Clindamycin/CC)、阿奇霉素(Azithromycin/AZM)均出现了较高的耐药率，分别为(75/96)78.13％、(72/96)75.00％、(76/96)79.17％。
　　3、B族链球菌耐药基因结果
　　对红霉素耐药的75株B族链球菌进行基因检测，检测出耐药基因mreA、mefA、ermA、ermB和mefE的阳性率分别为94.67％，44.00％，2.67％，73.33％，40.00％;没有检出ermC耐药基因。其中不携带耐药基因的有1株(1.33％)，携带1种耐药基因的有7株(9.33％)，携带2种耐药基因的有35株(46.67％)，携带3种耐药基因的有15株(20.00％)，携带4种耐药基因的有16株(21.33％)，携带5种耐药基因的有1株(1.33％)。
　　4、基因测序的结果
　　对五组阳性率较高的mreA、mefA、ermA、ermB和mefE基因随机选取2～4株进行核苷酸序列，经与GeneBank的参考基因序列对比显示同源性为100％，没有发生基因突变。
　　结论:
　　1、2014年石家庄地区围产期妇女阴道分泌物B族链球菌检出率为2.74％，存在较高的红霉素、克林霉素和阿奇霉素的耐药现象。
　　2、检出的B族链球菌耐药基因阳性率从高到低依次为mreA、ermB、mefA、mefE和ermA型。
　　3、mreA、mefA、ermA、ermB和mefE五种耐药基因与GeneBank的参考株核苷酸序列同源性为100％，没有发生基因突变。
　　4、医院应加强B族链球菌的耐药性及耐药基因的监测，指导临床更加科学、有效的使用抗菌药物。

目录

声明

摘要

英文缩写

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 B族链球菌感染及耐药机制的研究进展

致谢

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