慢性乙肝患者肝组织CD8+细胞表面CD28的表达与肝组织病变的关系

摘要

目的：检测慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B, CHB）患者肝组织内CD8+T淋巴细胞表面CD28的表达情况，观察其表达与肝组织炎症分级的关系，探讨乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus, HBV）感染过程中肝组织病变及HBV清除的免疫机制，为慢性乙肝的临床治疗提供理论依据。
　　方法：随机选择慢性乙肝患者60例，肝穿活检抽取肝组织，免疫组化双标记法检测肝组织内CD8+CD28+及CD8+CD28-T淋巴细胞，免疫组化单标记法检测肝组织内肿瘤坏死因子-α（Tumour necrosis factorα, TNF-α）及Fas配体（Fas ligand, Fas-L）的表达。
　　结果：⑴慢性乙型肝炎患者肝组织内 CD8+CD28+细胞和 CD8+CD28-细胞数量较对照组明显增加，差异有统计学意义。⑵对不同肝组织病变的慢性乙肝患者进一步研究，慢性乙型肝炎中、重度患者肝组织内 CD8+CD28+细胞数量较健康对照组明显增加，轻度患者 CD8+CD28+细胞数量较对照组明显降低，差异有统计学意义。⑶慢性乙肝患者肝组织内 CD8+CD28-细胞数量随着肝组织炎症加重而逐渐减少，各组间差异有统计学意义。⑷慢性乙肝患者肝组织内TNF-α及Fas-L表达较对照组明显增加，并随着肝组织炎症加重而逐渐增加，各组间差异有统计学意义。⑸肝组织病变相同时，谷丙转氨酶（Alanine transaminase, ALT）正常的患者Fas-L表达率高于ALT异常患者，两者间差异有统计学意义；而两者TNF-α的表达无明显差异。
　　结论：⑴肝组织内CD8+T淋巴细胞表面CD28分子的表达强度与肝组织病变密切相关，肝组织内 CD8+CD28+T淋巴细胞可作为判断慢性乙肝患者肝组织损伤的一个免疫学指标。⑵CD28可促进 CD8+细胞表达 TNF-α、Fas-L，通过肝细胞坏死和凋亡两个途径参与肝组织病变，在ALT正常患者则可能主要以凋亡途径为主。⑶肝组织内CD8+CD28-T细胞可能是乙肝持续感染的主要原因。

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前言

材 料 和 仪 器

1、研究对象

2、主要试剂

3、实验仪器

实 验 方 法

实验分组：

肝组织切片的制备:

肝组织TNF-α及Fas-L免疫组化单标记（S-P法）检测方法：

肝组织CD8+CD28+免疫组化双标记检测：

结果判断：

统计学处理：

实 验 结 果

1.正常对照组与慢性乙肝组肝组织内CD8+CD28+ 、CD8+CD28－T细胞的检测结果

2.肝组织炎症分级与CD8+CD28+ 、CD8+CD28－T细胞的关系

3. 慢性乙肝组血清ALT与肝组织CD8+CD28+ 、CD8+CD28－T细胞的关系

4.正常对照组与慢性乙肝组肝组织内TNF-α、Fas-L的检测结果

5. 肝组织炎症分级和ALT与TNF-α、Fas-L表达的关系

讨论

一、CD28在慢性乙肝患者肝组织CD8+细胞表面的表达及其意义

二、CD28对CD8+T淋巴细胞相关细胞因子及Fas-L的影响

三、CD8+CD28－T细胞在慢性乙肝持续感染中的作用

四、结语

结论

参考文献

致谢

附录

附录A.中英文缩略词对照表

附录B.个人简历

附录C 综述:乙肝患者CD8+T细胞中CD28表达的研究进展