不同剂量2-甲氧基雌二醇对雌激素受体在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织表达的影响

摘要

目的：探讨在低氧性肺动脉高压大鼠模型中，不同剂量的2-甲氧基雌二醇（2-methoxyextradiol，2ME）对其肺组织中雌激素受体（estrogen receptor，ER）表达的影响，探索2ME对低氧性肺动脉高压（hypoxic pu lmonary hypertension，HPH）及肺血管重塑的作用机制。
　　方法：
　　健康雌性SD大鼠50只，按随机数字表法平均分为5组，分别为假手术+常氧组、去势+低氧组、去势+低氧+2ME低剂量组、去势+低氧+2ME中剂量组、去势+低氧+2ME高剂量组。假手术+常氧组大鼠行腹腔切开找到双侧卵巢后未进行特殊处理直接还纳缝合，将大鼠置于正常空气环境中；去势大鼠均行卵巢切除术，术后2ME干预组分别给予不同浓度2ME（72μmol·kg-1·d-1、240μmol·kg-1·d-1、720μmol·kg-1·d-1）皮下注射，并将大鼠置于常压低氧箱内饲养，连续饲养8周，以建立HPH模型。观察大鼠一般状况变化，应用右心导管法即肝素化后的聚乙烯导管经颈外静脉插管，经上腔静脉、右心室进入肺动脉，测量肺动脉压力，测压后留取血标本、肺组织、心脏，并应用公式计算右心室肥厚指数（right ventricule hypertrophy index，RVHI），HE染色观察肺小动脉重塑情况。采用ELISA试剂盒检测大鼠血清中2ME水平。采用免疫组化方法检测ERα、ERβ、PCNA在肺组织的定位及表达情况。
　　结果：
　　1大鼠的一般状况
　　低氧环境下的大鼠逐渐出现活动量减少、食水减少、体重下降、体毛晦暗易脱落、呼吸频率加快，最终主要表现为安静休息，低氧8周的大鼠无死亡。与假手术+常氧组大鼠体重（313.67±7.024）相比，去势+低氧组（258.33±7.572）体重增长速度缓慢；与去势+低氧+2ME高剂量组（308.33±6.028）相比，去势+低氧组大鼠体重增长速度减慢，有统计学差异。（见Fig.3）
　　2大鼠血流动力学改变（mPAP）
　　与假手术+常氧组大鼠的mPAP（13.23±0.85）比较，去势+低氧组的mPAP（30.95±1.53）明显升高；与去势+低氧组比较，给予不同剂量2M E干预的各组大鼠mPAP（去势+低氧+2ME高剂量组mPAP为17.44±0.84；去势+低氧+2ME中剂量组mPAP为21.20±0.77；去势+低氧+2ME低剂量组mPAP为22.46±1.30）均下降，且去势+低氧+2ME高剂量组m PAP下降最明显，2ME低、中剂量两组相比，无统计学差异。（见Fig.4）
　　3大鼠肺小血管及右心室形态学变化
　　光镜下，假手术+常氧组肺动脉管壁细胞分布均匀连续，无水肿或坏死；而去势+低氧组大鼠肺小动脉管壁增厚，平滑肌细胞数目增多，管腔变窄；2ME干预组大鼠上述形态学改变相对较轻，以去势+低氧+2ME高剂量组改变为最轻。（见Fig.1）
　　与假手术+常氧组大鼠RVHI（0.22±0.02）相比，低氧状态下的RV HI均增大；与去势+低氧组（0.31±0.01）相比，2ME干预的各组大鼠R VHI均减小，但三种剂量之间无统计学差异。（见Fig.5）
　　4大鼠血清中2ME含量的变化
　　与假手术+常氧组大鼠血清中2ME含量（9.42±1.05）相比，去势+低氧组血清中2ME含量（7.88±0.46）下降，给予2ME干预后血清中2 ME含量升高，且去势+低氧+2ME高剂量组（11.37±0.64）升高最明显。（见 Fig.6）
　　5免疫组化
　　ERα、ERβ、PCNA在肺组织中均可见表达，阳性反应呈棕黄色，定位在细胞核，偶见于细胞质。假手术+常氧组的切片可见ERα、ERβ染色呈阳性；去势+低氧组的ERα表达减少，PCNA染色呈深棕黄色强阳性反应；2ME干预组ERα表达增多，PCNA表达减少。（见Fig.2）
　　结论：
　　1 2ME能有效改善大鼠低氧性肺动脉高压及肺血管重塑。
　　2 2ME能通过调节ERα的表达从而对低氧性肺动脉高压起保护性作用。

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前言

材料与方法

1 材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 大鼠的一般状况

2 大鼠血流动力学改变（mPAP）

3 大鼠肺小血管及右心室形态学变化

4大鼠血清中2ME含量的变化

5 免疫组化

附图

讨论

结论

参考文献

综述: 结核菌素试验对结核病感染的临床意义

致谢

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