高山蓍地上部分化学成分及药理活性研究

摘要

蓍属植物约有200种，广泛分布于北温带，该属大多植物在民间常用作消炎剂、发汗剂、利尿剂、止痉药，也常用于治疗痛经，风湿痛，出血等。目前报道的从蓍属植物中分离得到的主要成分有倍半萜、黄酮、木脂素、挥发油等。现代药理研究发现该属植物的提取物大都具有抗菌消炎、抗肿瘤、解痉等作用。高山蓍(Achillea alpina L.)为菊科(Compositae)蓍属(Achillea)多年生草本植物，别名羽衣草、蚰蜒草、锯齿草，主要分布在我国内蒙古、河北、山西、宁夏、甘肃东部、东北等地区，西伯利亚、日本、朝鲜、蒙古和远东地区也有发现。《中国药典》记载，蓍草具有解毒利湿，活血止痛的作用，常用于乳蛾咽痛，泄泻痢疾，肠痈腹痛，热淋涩痛，湿热带下，蛇虫咬伤。作为药典收录品种，有关其化学成分的研究却寥寥无几，为进一步促进蓍属植物的开发利用，本课题以高山蓍地上部分为研究对象，对其石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇四个萃取部分进行了系统的分离纯化，并对分离得到的单体化合物进行了结构鉴定及活性筛选。
　　目的：以高山蓍地上部分为研究对象，利用各种柱色谱、制备薄层色谱、制备高效液相色谱及重结晶等手段对高山蓍不同极性部分进行系统的分离纯化，得到单体化合物。通过现代波谱技术(UV、MS、1D NMR、2D NMR等)，鉴定出单体化合物的结构，通过MTT法筛选其中的活性成分，以期望得到结构新颖的有活性的单体化合物。
　　方法：自然干燥的高山蓍地上部分9.3 kg粉碎后用95％工业乙醇回流提取，提取液过滤浓缩得浸膏约1634.2 g，将浸膏分散于饱和食盐水中，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液浓缩后得四部分不同极性部位浸膏，分别重197g、152g、45.3g、165g。采用常规的硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、聚酰胺柱色谱、大孔吸附树脂柱色谱、制备薄层色谱、制备型高效液相色谱以及重结晶等分离纯化技术对这四部分进行系统的分离纯化，得到单体化合物，利用UV、MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMQC、HMBC、NOESY等现代光谱、波谱技术对单体化合物进行结构鉴定，MTT法对单体化合物进行抗肿瘤活性筛选。
　　结果：通过对高山蓍地上部分进行的系统分离，共得到30个化合物，其中确定了26个化合物的结构。包括7个倍半萜类化合物、12个黄酮类化合物、2个苯丙素类化合物、2个甾体类化合物、2个生物碱类化合物、1个脂肪酸类化合物，结果如下：β-谷甾醇,11β,13-dihydroparthenolide，11β,13-dihydroreynosin，11β,13-dihydrosantamarin，柳穿鱼黄素，对羟基桂皮酸酯，6-(4′-hydroxy-1′,5′-dimethyl-5′-hexenyl)-3-methyl-2-cyclohexenone， compressanolid，洋艾素，1,10-epoxydihydroparthenolide，9,16-二羰基-10,12,14-三烯十八碳酸，麦黄酮，半齿泽兰素，矢车菊黄素，artapshin，β-胡萝卜苷，芹菜素，芹菜素-7-O-葡萄糖苷，高车前素，2-hydroxy-4(1H)-quinolinone，2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4b]indole-3-carboxylic acid，绿原酸，木樨草素-7-O-葡萄糖苷，异鼠李素-3-O-芸香糖苷，芦丁，麦黄酮-7-O-葡萄糖苷。体外抗肿瘤实验发现化合物麦黄酮，芹菜素和高车前素对人胃癌细胞 SGC-7901，人胃黏膜上皮细胞癌细胞GES-1，人肺癌细胞 A549和 NCI-H292有较强的生长抑制活性，柳穿鱼黄素和矢车菊黄素对以上肿瘤细胞的增殖有较弱的抑制作用，其他化合物的抗肿瘤活性则更弱或是没有。
　　结论：通过利用比较合理可行的提取分离手段对高山蓍石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇部分进行了系统分离，共鉴定了26个化合物的结构。其中没药烷型倍半萜6-(4′-hydroxy-1′,5′-dimethyl-5′-hexenyl)-3-methyl-2-cyclohexenone为首次从自然界分离得到的新化合物，愈创木烷型倍半萜内酯compressanolide，9,16-二羰基-10,12,14-三烯十八碳酸,麦黄酮，生物碱2-hydroxy-4(1H)-quinolinone，2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4b]indole-3-carboxylic acid首次从蓍属中分离得到，吉马烷型倍半萜内酯11β,13-dihydroparthenolide，1,10-epoxydihydroparthenolide，桉叶烷型倍半萜内酯11β,13-dihydroreynosin，11β,13-dihydrosantamarin, artapshin，黄酮类化合物柳穿鱼黄素，矢车菊黄素，芹菜素,高车前素首次从高山蓍中分离得到。其中麦黄酮，芹菜素和高车前素对肿瘤细胞有较强的生长抑制活性。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1 仪器与药品

1.1 实验仪器

1.2 药材、试剂和肿瘤细胞

2. 方法

2.1 高山蓍地上部分的提取

2.2 高山蓍地上部分化学成分的分离

2.3 单体化合物抗肿瘤活性的初步研究

结果

1 化合物结构鉴定结果

2 单体化合物的活性初筛结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:蓍属植物倍半萜类成分和药理活性研究进展

致谢

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