δ-catenin和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及意义

摘要

目的：神经胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,也是最难治疗的神经系统恶性肿瘤。神经胶质瘤目前采用手术治疗及术后的综合治疗。近年来，随着医疗水平的不断进步，诊疗措施的不断完善，神经胶质瘤的治疗效果有所提升，但仍不理想，患者的生存率以及中位生存时间并无明显的改善。而判断其病理分级和肿瘤的增殖和侵袭性的研究有着非常重要的意义。
　　连环蛋白δ-catenin是 p120ctn家族的重要成员。之前研究认为δ-catenin主要在脑组织中表达，δ-catenin在参与影响神经细胞的形态中有着重要的作用。目前许多文献报道，其异常表达与多种肿瘤的发生存在十分密切关联。人体的许多肿瘤组织或者细胞中都出现了δ-catenin的过表达现象。有研究报道δ-catenin在星形细胞瘤中的过表达与神经胶质瘤的生物学行为有较强的相关性，有希望成为星形细胞瘤恶性生物学行为的新标志物，并可能成为未来治疗的新靶点。但δ-catenin在其他种类的神经胶质细胞中表达情况未见报道。
　　增殖细胞核抗原（Ki-67）是一种非组蛋白的核蛋白质。Ki-67与细胞增殖关系密切，Ki-67可准确反映肿瘤细胞增殖活性状态，它与肿瘤转移、增值、患者预后情况关系密切。更有很多研究用其作为细胞的增殖指数。Ki-67在正常细胞中极低表达而在增殖细胞中高表达的性质，使它可以用作细胞增殖标记物，目前已经成为检测胶质瘤肿瘤活性的可靠的指标。
　　本研究通过用免疫组织化学及Real-Time PCR的方法检测12例正常脑组织及55例Ⅰ-Ⅳ级神经胶质瘤中δ-catenin的表达情况，并与神经胶质瘤患者通过免疫组织化学及Real-Time PCR的方法检测出的Ki-67表达水平及病理分级进行比较，以研究δ-catenin在多种神经胶质瘤中的表达情况、生物学行为及对肿瘤预后的影响。
　　方法：本实验选取了自2014年10月至2015年12月在河北医科大学第二医院神经外科三病区住院并行手术治疗的原发性神经胶质瘤患55例，以及正常脑组织（取自脑外伤患者）12例，并按WHO2007标准分为三个组，分别为低级别组（WHOⅠ-Ⅱ级）、高级别组（WHOⅢ-Ⅳ级）以及正常对照组（取自脑外伤患者的正常脑组织），留取其肿瘤及正常脑组织标本通过免疫组织化学及Real-Time PCR的方式检测δ-catenin及Ki-67及表达情况。
　　最终得出的实验数据用SPSS19.0软件进行分析，最后测得免疫组化结果的δ-catenin及Ki-67在组织中阳性表达率比较采用χ2检验。P<0.01为有统计学意义。Real-Time PCR结果用单因素方差分析检验。P<0.01为有统计学意义。
　　结果：
　　1、δ-catenin在正常的胶质细胞中无表达；在本实验55例神经胶质瘤细胞中，有33例为δ-catenin阳性表达（阳性率60％），阳性信号在细胞浆中均有定位，在计数中在正常脑组织、节细胞胶质瘤、少突胶质细胞瘤以及胶质母细胞瘤中各有1例可见细胞核黄染。其中9例节细胞胶质瘤（WHOⅠ级），有1例阳性表达（阳性率11.1%），少突胶质细胞瘤（WHOⅡ级）8例，有2例阳性表达（阳性率25%），星形胶质细胞瘤（WHOⅡ级）15例，有1例阳性表达（阳性率6.67%），间变性星形细胞瘤（WHOⅢ级）8例，有6例阳性表达（阳性率75%），间变性少突胶质细胞瘤（WHOⅢ级）3例，有2例阳性表达（阳性率66.7%）,间变性室管膜瘤（WHOⅢ级）4例，有4例阳性表达（阳性率100%）,胶质母细胞瘤（WHOⅣ级）7例，有6例阳性表达（阳性率85.7%）,中枢神经系统原始神经外胚层肿瘤（WHOⅣ级）1例，有1例阳性表达（阳性率100%）。
　　2、胶质瘤组织中δ-catenin表达分数与胶质瘤级别间的比较
　　δ-catenin在正常对照组12例中无阳性表达，在低级别胶质瘤组（Ⅰ-Ⅱ级）中阳性表达率为12.5%（4/32），在高级别胶质瘤组（Ⅲ-Ⅳ级）中阳性表达率为82.6%（19/23），有显著统计学差异（P<0.01）。
　　3、胶质瘤组织中δ-catenin表达分数与胶质瘤组织中Ki-67表达具有显著相关性（R=0.556,P<0.01）。
　　4、Real-Time PCR的结果
　　δ-catenin的表达情况与神经胶质瘤的病理学分级呈正相关性。Ki-67的表达情况与神经胶质瘤的病理学分级呈正相关性。在正常对照组、低级别组及高级别组中的δ-catenin与Ki-67表达呈显著相关性（R=0.809,P<0.01）。
　　结论：
　　1、δ-catenin在正常的神经胶质细胞中未见表达，δ-catenin在节细胞胶质瘤、星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、间变型星形细胞瘤、间变型少突胶质细胞瘤、间变型室管膜瘤、胶质母细胞瘤及中枢神经系统原始神经外胚层肿瘤中均可见阳性表达。
　　2、δ-catenin在正常脑组织中及神经胶质瘤组织中的表达存在差别（神经胶质瘤组织中的表达明显高于正常脑组织），并且其表达在低级别组及高级别之间明显差别（高级别组中的表达明显高于低级别组），具有统计学意义，且与神经胶质细胞瘤的组织病理学分级呈正相关。
　　3、Ki-67表达情况在正常组、低级别胶质瘤组以及高级别胶质瘤组之间存在明显差异（高级别组明显高于低级别组高于正常组），验证了前人的研究结论。
　　4、δ-catenin与Ki-67在正常脑组织、低级别胶质瘤组及高级别胶质瘤组织中的表达呈显著相关性。
　　5、δ-catenin可能参与了神经胶质细胞瘤的病情进展并且与疾病的进展起到重要作用，δ-catenin能促进胶质瘤细胞的增殖与侵袭，有望成为对神经胶质瘤生物学行为及预后评价的重要指标，甚至有望成为神经胶质细胞瘤治疗的新靶点。

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中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1实验材料

2免疫组织化学实验方法

3.荧光定量PCR（Real-Time PCR）试验方法

4数据统计方法

结果

1 δ-catenin正常的胶质细胞中无表达

2 胶质瘤组织中δ-catenin表达分数在实验分组间的比较

3 胶质瘤组织中Ki-67表达分数与胶质瘤级别间的比较

4 胶质瘤组织中δ-catenin表达分数与胶质瘤组织中Ki-67表达分数比较

5 Real-Time PCR的结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

附录

综述: 神经胶质瘤、δ-catenin及Ki-67的研究现状

致谢

个人简历