PM2.5慢性暴露对大鼠气道粘液纤毛清除系统的影响及吉诺通的干预作用

摘要

目的：探讨大气细颗粒物（PM2.5）慢性暴露对大鼠气道粘液纤毛清除系统的影响及吉诺通的干预作用。
　　方法：
　　1.建立模型：将48只雄性SD大鼠（220±20g）随机分成3组：PM2.5暴露组（PM组），PM2.5暴露+吉诺通组（PM+CS组），净化器组（FA组），各组按时间点（3个月和6个月）分为2个亚组，均8只大鼠。PM组和PM+CS组吸入石家庄室外空气，分别给予生理盐水1ml/Kg.d及吉诺通混悬液300mg/Kg·d灌胃；FA组大鼠吸入空气净化器过滤的清洁大气，给予生理盐水1ml/Kg·d灌胃。于各时间点处死大鼠。
　　2.BALF行细胞计数及分类。
　　3.肺及气管组织石蜡切片行HE染色，光镜下观察形态学改变。
　　4.扫描电镜观察气管纤毛超微结构改变。
　　5.肺及气管组织的石蜡切片行AB-PAS染色，光镜观察粘液细胞化生情况。
　　6.免疫组化、Western blot和RT-PCR方法检测肺组织MUC5AC蛋白及基因表达水平。
　　7.RT-PCR检测肺组织AQP5 mRNA表达水平。
　　结果：
　　1.各组PM2.5浓度的比较：3个月和6个月期间PM组、室外PM2.5浓度显著高于FA组，PM组较室外PM2.5无统计学差异。
　　2.各组大鼠BALF白细胞总数、中性粒细胞计数、中性粒细胞百分比比较：PM组均显著高于FA组、PM+CS组，PM3+CS组较FA3组无统计学差异，PM6+CS组均显著高于FA6组，PM6组均显著高于PM3组。
　　3.各组大鼠肺和气管组织形态学（HE染色）及炎症评分的比较：炎症评分结果示，PM组显著高于FA组、PM+CS组，PM3+CS组较FA3组无统计学差异，PM6+CS组显著高于FA6组，PM6组显著高于PM3组。
　　4.扫描电镜下各组大鼠气管纤毛超微结构变化：FA组大鼠气管纤毛结构大致正常；PM组大鼠纤毛稀疏、排列紊乱、粘连及倒伏；PM+CS组大鼠纤毛损伤较PM组减轻。
　　5.各组大鼠肺组织AB-PAS染色结果比较：相对着色面积（AB-PAS/Aep）结果示，PM组显著高于FA组，PM3组显著高于PM3+CS组，PM3+CS组较FA3组无统计学差异，PM6组较PM6+CS组无统计学差异，PM6+CS组显著高于FA6组，PM6组显著高于PM3组。
　　6.免疫组化检测各组大鼠肺组织MUC5AC蛋白表达水平的比较：IOD/Sum Area结果示：PM组显著高于FA组、PM+CS组， PM3+CS组较FA3组无统计学差异，PM6+CS组显著高于FA6组，PM6组显著高于PM3组。
　　7.Western blot检测各组大鼠MUC5AC蛋白表达水平的比较：PM组显著高于FA组、PM+CS组，PM+CS组显著高于FA组， PM6组显著高于PM3组。
　　8.各组大鼠肺组织MUC5AC mRNA表达水平的比较：PM组显著高于FA组、PM+CS组，PM3+CS组低于FA3组，PM6+CS组高于FA6组，PM6组显著高于PM3组。
　　9.各组大鼠肺组织AQP5 mRNA表达水平的比较：PM组显著低于FA组、PM+CS组，PM+CS组低于FA组，PM6组显著低于PM3组。
　　10.相关性分析：PM组大鼠肺组织AQP5 mRNA表达明显减少， MUC5AC mRNA表达明显增加，两者呈显著负相关；与PM组相比， PM+CS组AQP5 mRNA表达增多， MUC5AC mRNA表达减少，两者呈显著负相关。
　　结论：
　　1.PM2.5慢性暴露可导致气管和肺脏炎症损伤。
　　2.PM2.5慢性暴露可导致气道粘液纤毛清除系统的损伤，引起纤毛粘连、倒伏、缺失，粘液细胞化生，肺组织MUC5AC表达增加、AQP5表达减少，这可能是PM2.5肺损伤的机制之一。
　　3.吉诺通可通过减轻气管和肺组织炎症损伤、纤毛结构损伤，改善粘液细胞化生情况，使肺组织MUC5AC表达减少、AQP5表达增加，减轻PM2.5慢性暴露引起的气道粘液纤毛清除系统的损伤，减轻PM2.5导致的肺损伤。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 材料

2 方法：

结果

1 各组PM2.5浓度的比较

2 大鼠一般情况：

3 各组大鼠BALF中细胞计数及分类的比较

4 各组大鼠肺和气管组织形态学（HE染色）及炎症评分的比较

5扫描电镜下各组大鼠气管纤毛超微结构变化

6 各组大鼠气管AB-PAS染色结果比较

7 免疫组化检测各组大鼠肺组织MUC5AC表达

8 Western blot检测各组大鼠肺组织MUC5AC表达水平

9 各组大鼠肺组织MUC5AC mRNA表达的比较

10 各组大鼠AQP5 mRNA表达的比较

11 AQP5 mRNA与MUC5AC mRNA表达的相关性分析

附图

附表

讨论

1 PM2.5慢性暴露动物模型的建立及评价

2 PM2.5慢性暴露导致的气管和肺组织的损伤

3 PM2.5慢性暴露对粘液纤毛清除系统的影响

4 吉诺通可减轻PM2.5慢性暴露对气道粘液纤毛清除系统的损伤作用

结论

参考文献

综述:PM2.5暴露对呼吸系统粘液纤毛清除系统的影响

致谢

个人简历