CIAPIN1基因在膀胱癌组织中的表达及其与临床预后的相关性研究

摘要

膀胱癌（Bladder cancer）严重威胁患者的生命与健康，是泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤之一。尽管我国膀胱癌的发病检出率较欧洲低，但随着人口平均寿命的逐年递增，生活条件及医疗水平的提高，加之环境污染的日益加重等，我国膀胱癌的发病率检出率逐年增加而且呈年轻化的趋势。临床上超过65％的膀胱癌患者初诊时即为非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)，日前主要治疗方法是经尿道膀胱肿瘤电切术（TUR-BT)，由于手术后的极高复发率往往导致治疗失败，随之而来的高死亡率。因此，要想降低这种高死亡率，及早的发现是有效手段之一。深入研究膀胱癌的发病机制，将有助于我们从基因水平寻找膀胱癌发病的根本、探索其中的机制及敏感、特异的预后指标，进而为膀胱癌提供重要的临床诊断价值。
　　CIAPIN1（Cytokine-induced apoptosis inhibitor1）是一种新型的细胞死亡抑制因子，可以对抗细胞凋亡，因此引起科学家注意。CIAPIN1的编码序列包含939bp，编码312个氨基酸，分子量为16.5kDa。它由N-末端区域中的甲基转移酶结构和C-末端中的类似Cx2Cx24Cx2C锌指样结构组成。CIAPIN1可以抑制多种刺激所导致的凋亡，这些刺激包括死亡受体的激活、生长因子的阻断、电离辐射、病毒感染和基因毒性损伤等，而且CIAPIN1还可以有效的调节肿瘤的生长。越来越多的证据表明，大多数人类实体瘤和血液恶性肿瘤中都会发现CIAPIN1的高表达。癌细胞中CIAPIN1表达的水平与临床病情的发展呈数量相关，并且其表达量可以作为患者预后是否良好的一个标记。然而，CIAPIN1在膀胱癌中的表达及其作用尚无报道。
　　本研究就CIAPIN1基因在膀胱癌中的表达及其与生存率的相关性分析，为膀胱癌的诊断和治疗提供理论依据。
　　目的：探讨CIAPIN1在膀胱癌中的表达及其与患者生存率的相关性分析。
　　方法：
　　1通过收集膀胱癌根治术患者的癌及癌旁组织，组织匀浆并提取总RNA。
　　2通过qRT-PCR分别检测CIAPIN1和增殖标志基因Cyclin D1的mRNA在膀胱癌及癌旁组织中的表达并进行统计分析。
　　3利用Graphpad prism5对qRT-PCR数据进行Pearson's correlation分析，分别分析CIAPIN1与Cyclin D1的线性相关性。
　　4通过Western blot检测CIAPIN1的蛋白水平在膀胱癌及癌旁组织中的表达并进行统计分析。
　　5利用ATCG数据库(OncoLnc)搜索CIAPIN1在膀胱癌中的表与患者的生存率之间的关系，从而考察CIAPIN1对预后的影响。
　　结果：
　　1 CIAPIN1的转录水平在膀胱癌组织中显著上调。
　　通过qRT-PCR检测CIAPIN1和细胞周期依赖性蛋白D1（Cyclin D1）在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达，结果显示CIAPIN1的mRNA在膀胱癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P<0.01）。荧光定量PCR结果显示，与癌旁组相比，Cyclin D1的mRNA表达水平在膀胱癌组织中显著上升。
　　2 CIAPIN1与Cyclin D1的转录水平在膀胱癌组织中呈正相关关系。
　　利用上述qRT-PCR检测到膀胱组织中CIAPIN1和Cyclin D1的表达数据，在 Graphpad prism5上进行统计处理并进行统计学 Pearson's correlation分析，结果所示， CIAPIN1与增殖标志基因Cyclyin D1的mRNA表达在膀胱组织中存在线性相关关系（R=0.5153，P=0.0168）。
　　3在膀胱癌发展过程中CIAPIN1的蛋白表达显著上调。
　　通过Western blot检测癌及癌旁组织中CIAPIN1的表达，结果显示，与癌旁组织相比，CIAPIN1的蛋白水平在膀胱癌组织中的表达显著上调，而其内参基因β-actin在癌组织和癌旁组织中的表达均没有明显变化。将Western blot的结果进行灰度值扫描，并进行统计学分析，同样显示CIAPIN1的蛋白水平在膀胱癌组织中的表达增加明显（P<0.05）。
　　结论：
　　1 CIAPIN1的mRNA及蛋白质水平在膀胱癌组织中的表达显著高于癌旁组织，参与膀胱癌的发生发展。
　　2与癌旁组织相比，Cyclin D1的mRNA在膀胱癌组织中的表达显著上调。
　　3 CIAPIN1与Cyclin D1的转录水平在膀胱癌组织中呈正相关关系。

目录

声明

英文缩写

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

3 统计学处理和相关分析

结果

1 CIAPIN1的转录水平在膀胱癌组织中显著上调。

2 CIAPIN1与Cyclin D1的转录水平在膀胱癌组织中呈正相关关系。

3 在膀胱癌发展过程中CIAPIN1的蛋白表达显著上调。

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:CIAPIN1在癌症中的作用

致谢

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