变应性鼻炎患者血清维生素D与Treg/Th17细胞的相关性研究

摘要

目的：
　　通过检测变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者血清中维生素D（VD）及外周血调节T细胞（Treg）、Th17细胞的表达水平，研究Treg细胞、Th17细胞及维生素D在AR发病机制中所发挥的作用，并探讨维生素D与Treg/Th17细胞间的相互关系以及对AR患者临床治疗的一种新方法。
　　方法：
　　本实验选取了38例就诊于河北医科大学第二医院耳鼻喉科门诊并通过相关检查确诊变应性鼻炎的患者，列为实验组即AR组；选取来河北医科大学第二医院体检中心进行常规体检者，而且是体检结果无相关疾病者38例，列为对照组。首先对两组受试者进行外周血采集，分别准备一支普通采血管及一支抗凝管。抽取受试者外周静脉血约4 ml于普通采血管中，并进行常规离心，然后收取试管中的上层血清分别装入两个离心管中。一支离心管中的血清用于外周血中25(OH)D3表达水平的检测，选用ELISA即酶联免疫吸附试验中的双抗体一步夹心法进行检测，酶标仪读出需测样本OD值，进一步得到25(OH)D3的浓度值；另一离心管中的血清用来检测总VD含量，采用的方法是电化学发光免疫分析法。另外采集两组受试者外周血约3 ml于抗凝管中，并使静脉血与抗凝剂混合均匀，采用流式细胞术对CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞、CD4+IL-17+Th17细胞表达水平进行检测，这两类数量检测结果分别以CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在总体CD4+T细胞中所占百分率表示及CD4+IL-17+Th17细胞在总体CD4+T细胞中所占百分率表示。后用SPSS21.0软件系统对最后所得出的实验数据进行相关统计学数据分析，本实验属于计量资料的范畴，经过软件正态性检验后，结果显示数据符合正态分布，两组符合完全独立样本，数据可采用两样本t检验。相关性分析则可采用Pearson相关检验。用双侧概率对实验结果进行检验，以α=0.05，P<0.05表示，认为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1 AR组中血清总维生素D含量为（15.069±3.874）ng/mL，对照组中血清总维生素D含量为（22.346±4.260）ng/mL，比较两组血清总维生素D含量，AR组低对照组,（t=-7.791,P<0.05）。表明两组含量存在区别，统计学检验差异存在意义。
　　2 AR组中血清25(OH)D3含量为（14.139±5.013）ng/mL，对照组中血清25(OH)D3含量为（17.045±5.368） ng/mL， AR组血清25(OH)D3含量显著低于对照组,（t=-2.439,P<0.05）。表明血清25(OH)D3含量在两组间存在显著统计学差异。
　　3 AR组中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率为（0.144±0.050）％，对照组中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率为（0.560±0.142）%，AR组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显低于对照组，（t=-17.011,P<0.05）。表明AR组与对照组Treg细胞水平是有一定的差异性，差异存在统计学意义。
　　4 AR组中CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率为（1.148±0.176）%，对照组中CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率为（0.780±0.181）%，AR组CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率明显高于对照组，（t=8.986,P<0.05）。表明AR组与对照组 Th17细胞表达水平是有一定的差异性，差异存在统计学意义。
　　5通过把AR组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达水平占总体CD4+T细胞数中的百分率与血清25(OH)D3含量进行相关性分析后，得出Treg细胞水平与VD含量成正比，两者呈现正相关关系（r=0.713,P<0.05）。
　　6在AR组中把外周血CD4+I L-17+Th17细胞含量占总体CD4+T细胞数的百分率与该组血清25（OH）D3含量进行相关性分析后，得出 Th17细胞水平与VD含量成反比，两者间呈现负相关关系（r=-0.658,P<0.05）。
　　结论：
　　125(OH)D3在体内能够稳定存在2~3周，能够代表血清维生素D的水平，评价体内维生素D状况时就以25(OH)D3含量为标准。在对受试者血清总VD及25(OH)D3含量的测定中，AR组要显著低于对照组，提示血清VD的缺乏有可能影响AR的发病。维生素D可能成为治疗AR，减轻AR患者症状的治疗方法。
　　2外周血中测得Treg细胞含量，AR组要低于健康对照组，测得的Th17细胞含量，AR组要高于健康对照组。在AR组中呈现，Treg细胞数量降低，Th17细胞数量升高的结论，这与我们所知的AR发病机制结论一致，并得到进一步验证，说明Treg细胞负性免疫调节功能在AR中可能受到抑制，AR发生的重要机制之一即可认为是 Treg/Th17细胞间的失调。
　　3 AR组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占总CD4+T细胞的百分率和测得的血清中25(OH)D3含量进行相关性分析，结果示两者呈正相关，同时AR组外周血CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率与血清25(OH)D3进行相关分析结果示两者呈负相关。说明在AR患者中维生素D的含量可能与Treg/Th17细胞失衡存在一定的相关性，维生素D的缺乏可能导致Treg细胞的减少、Th17细胞数量的升高，造成Treg/Th17细胞失衡，引起过敏性鼻炎发生。

目录

声明

英文缩写

前言

材料和方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述:维生素D对变应性鼻炎免疫调节作用的研究进展

致谢

个人简历