小麦耐盐突变体谷氨酰胺合成酶前体Ⅱ的克隆与验证

摘要

本研究利用我室经过小麦花药培养、EMS诱变获得的耐盐性有明显差异的“一粒传”后代耐盐突变体RH8706-49和敏盐突变体RH8706-34为材料，对谷氨酰胺合成酶的前体基因(GS2)进行了研究，GS2蛋白是通过双向电泳发现的小麦耐盐和敏盐突变体的差异蛋白。本实验采用同源克隆的方法，得到了小麦的GS2的eDNA的序列，共包含1690bp，编码区有1284bp，能翻译出427个氨基酸，此基因序列和大麦、水稻、玉米的同源性分别为96.3％，81.4％和77.7％，可见GS2在进化中是非常保守的。谷氨酰胺合成酶前体在植物体中参与了谷氨酰胺合成酶循环，是同化铵的关键酶，在它的作用下可以合成谷氨酸，进一步可以合成脯氨酸，后者是植物盐胁迫后产生的参与细胞渗透调节的小分子有机物，同时GS2对于光呼吸所产生的NH4+的吸收能力提高了，有利于保护PSⅡ的活性。所以GS2是使植物耐盐性提高的一个重要的蛋白。 经Northernbloting分析，GS2在RH8706-49和H8706-34盐胁迫前后均有表达，而在RH8706-49中要比H8706-34中的表达量多。盐胁迫后二者表达量均有所下降，但敏盐突变体H8706-34中下降的更为明显。说明GS2是受盐抑制的基因，并且它的表达可能是在转录水平上被调控的。GS2在RH8706-49中的表达量较多，可能是RH8706-49耐盐性更强的内在原因之一。

目录

摘要

缩略词表

*综述

一、植物耐盐性的研究进展

二、植物基因克隆的方法和策略

三、植物谷氨酰胺合成酶研究进展

*研究报告

第一节小麦谷氨酰胺合成酶前体基因的克隆

第二节GS2的Nothern Bloting分析

结论

附录

参考文献：

致谢

个人简历