黄芪多糖、人参皂甙Rb1对猪口蹄疫疫苗的佐剂效果及相关机理研究

摘要

本试验目的旨在以两种补气中药成分为代表，对中药成分作为疫苗佐剂机制进行研究。进行本试验期望得到一种新型的、经济的猪口蹄疫疫苗的佐剂，提高现有疫苗的保护力，降低现有疫苗的副作用，降低猪口蹄疫的发病率，减少劳动费用，即这种佐剂能刺激机体产生较强的体液免疫和细胞免疫反应，同时，通过对佐剂作用机制的探索，将给新的佐剂开发提供一些试验方法，具有良好的研究意义。试验以常用补气中药黄芪和人参的主要有效成分——黄芪多糖和人参皂甙Rb1为代表，首先黄芪多糖和人参皂甙Rb1直接与口蹄疫疫苗混匀，通过肌肉注射免疫小鼠和猪，观察口蹄疫抗体效价的变化。试验结果：小鼠一免15d抗体效价与对照组差异不显著HAlog2＜7(p＞0.05)，二免后的小鼠抗体效价HAlog＞7与对照组比较差异极显著(p＜0.01)；黄芪多糖(0.5mg/只)+疫苗组、黄芪多糖(0.1mg/只)+疫苗组和人参皂甙Rb1(0.01mg/只)+疫苗组与对照组差异极显著(p＜0.01)，黄芪多糖(0.05mg/只)+疫苗组和人参皂甙Rb1(0.002mg/只)+疫苗组与对照组差异显著(p＜0.05)。经过免疫的猪一免后抗体效价都没有达到保护免疫效价(HAlog2＜7)，二免15d抗体效价远远高于一免的抗体效价(HAlog2＞7)，二免30d抗体效价比二免15d有些下降，但是高于只经过一免的抗体效价(HAlog2＞7)。总之黄芪多糖和人参皂甙Rb1均能提高小鼠和猪只的口蹄疫抗体效价，并且随着两种成分浓度的增加对抗体效价的影响也随之增强。随后进行大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的培养。通过对内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原和硝酸银鉴定，证明培养的微血管内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原染色为阳性，AgNO3染色后，黑色的硝酸银颗粒沉积在血管内皮细胞边缘即细胞间隙中，呈棕黄色，细胞间以锯齿状结构连接，体现血管内皮细胞呈现典型的多边形。最后黄芪多糖、人参皂甙Rb1和口蹄疫疫苗同时作用细胞，继续培养一段时间观察内皮细胞NO、IL-6和TNF-α分泌量的变化。试验结果：口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)单独作用于肠黏膜微血管内皮细胞，微血管内皮细胞分泌的NO、IL-6和TNF-α极显著的高于对照组(p＜0.01)；黄芪多糖(450μg/mL)和人参皂甙Rb1(40μg/mL)分别与口蹄疫疫苗(0.1μL/mL)联合作用细胞，微血管内皮细胞分泌NO、IL-6和TNF-α比单独疫苗作用减少，比对照组分泌量高(p＜0.05或p＜0.01)。结果表明：黄芪多糖和人参皂甙Rb1均能起到疫苗佐剂的作用，提高口蹄疫疫苗的抗体效价和保护微血管内皮细胞免受损伤的作用。

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文摘

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1引言

2材料与方法

3试验结果

4讨论

5结论

6尚未解决的问题

参考文献

附录 Appendix

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