提高牛胚胎移植供体和受体利用率的研究

摘要

牛的胚胎移植主要包括供受体同期发情、供体超数排卵和受体移植等。胚胎移植的成本高、妊娠率低是制约其发展的瓶颈。针对胚胎移植在产业化推广中遇到的问题，本文对其中的关键技术环节进行了研究分析，目的是提高胚胎移植供受体利用率，降低成本，促进胚胎移植产业化推广。 为了探讨超强度重复超排的效果，本试验对21头西门塔尔牛进行了连续七次的重复超排，两次处理之间间隔20-30天。结果表明，供体牛第一次与第二次超排有效率分别为95％、95.2％，其余各次均为100％。无论从回收胚数还是可用胚数来看，第三次超排效果最好，但前五次间比较差异不显著(P>0.05)。第六次、第七次虽然供体牛超排有效率很高，但在平均回收胚总数和平均可用胚数方面明显下降，显著低于前五次超排(P<0.01)。随着超排次数的增加，重复超排所获A级胚胎百分比逐步下降，第五次于前四次比较差异极显著(P<0.01)。B级胚胎百分比逐步上升，第五次最高为57.29％，显著高于前四次(P<0.01)。前四次间比较差异不显著。按第一次超排结果，分别以回收可用胚数1-4枚、5-8枚、8枚以上把供体牛分为三组。统计了前五次的平均可用胚情况，第一组、第二组、第三组第一次超排的平均可用胚分别为1.80枚、6.83枚、13.40枚(P<0.01)，第二次至第五次第三组都极显著高于前两组(P<0.01)，表明个体差异影响超排效果。在供体牛的饲料中添加尿素，第一组供体的第一次超排和第二次超排的平均可用胚数分别为4.70和6.80枚，差异显著(P<0.05)，第一次超排第一组和第二组可用胚数分别为4.70和8.18，差异极显著(P<0.01)。如表7所示，经过三次超排的供体牛移植妊娠率为47.83％，未超排牛为58.33％，普通黄牛为45.16％，三者间差异不显著。表明三次以下的超数排卵不影响供体牛的繁殖性能。 两种同期发情方法中，CIDR处理的受体利用率为76.59％，一次PG处理的受体利用率为69.78％，两者差异极显著(P<0.01)。把性别鉴定的雄性胚胎切割分为四个均匀的组织块，在移植过程中分别加入不同数量的组织块，胚胎和一块组织块共移植的受体群妊娠率为58.33％，高于对照组的47.13％，差异不显著。胚胎和两个组织块共移植的受体群妊娠率低于对照组，差异不显著。胚胎和孤雌胚胎共移植，妊娠率为61.36％，显著高于对照组(P<0.05)，与加一块组织块的受体无显著差异，但孤雌胚胎现场操作简便，易于推广。在河北地区，10月份的移植妊娠率为51.25％，高于其6—7月份的41.70％(P<0.05)，12月份妊娠率最低为37.45％。常规胚胎的早期囊胚妊娠率最高，为52.74％，显著高于桑椹胚、囊胚和扩张囊胚(P<0.01)。桑椹胚的妊娠率显著高于囊胚和扩张囊胚，但低于早囊。常规胚胎的早期囊胚在从发情到移植间隔8天的受体牛组中妊娠率最高，为58.09％，高于7天、7.5天、8.5天移植的妊娠率，但差异不显著。鲜双半胚和鲜全胚的妊娠率分别为56.25％和55.56％，产犊率分别为75.00％和55.56％，差异不显著。 通过对重复超排、同期发情受体的利用率以及提高胚胎移植妊娠率的研究，我们得出了一系列可靠的结论，在提高胚胎移植供受体的利用率方面有重要的指导意义。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词

声明

1引言

1.1胚胎移植技术的研究进展

1.2胚胎移植的主要技术环节

1.2.1同期发情

1.2.2胚胎移植

1.3超数排卵的研究进展

1.3.1超数排卵的机理

1.3.2超数排卵的常用药物及方法

1.3.3超排方法

1.3.4重复超排

1.3.5存在的问题

1.3.6提高超排效果的几点措施

1.4研究的目的和意义

2材料与方法

2.1试验时间与地点

2.2试验动物和胚胎

2.3药品和仪器

2.4供体牛的超排处理

2.5受体牛的同期发情

2.6胚胎解冻方法

2.7胚胎的切割

2.8孤雌胚胎的培养方法

2.9冲胚

2.10胚胎移植

2.11统计

3结果与分析

3.1提高胚胎移植供体牛利用率的研究

3.1.1超排重复次数对超排效果的影响

3.1.2重复超排对胚胎质量的影响

3.1.3个体差异对重复超排的影响

3.1.4饲料中添加尿素对超数排卵效果的影响

3.1.5超数排卵对牛胚胎移植妊娠率的影响

3.2提高胚胎移植受体牛利用率的研究

3.2.1不同的同期发情方法对受体牛利用率的影响

3.2.2胚胎和胚胎组织块共移植对妊娠率的影响

3.2.3胚胎和孤雌胚胎共移植对妊娠率的影响

3.2.4两种胚胎移植方法对妊娠率的影响

3.2.5季节对妊娠率的影响

3.2.6胚胎的胚龄对妊娠率的影响

3.2.7胚胎与受体牛同步程度对妊娠率的影响

3.2.8双半胚、全胚移植对妊娠率的影响

4 讨论

4.1超排重复次数对超排效果的影响

4.2重复超排对胚胎质量的影响

4.3个体差异对重复超排的影响

4.4尿素对超数排卵效果的影响

4.5超数排卵对胚胎移植妊娠率的影响

4.6不同的同期发情方法对受体牛利用率的影响

4.7胚胎和组织块共移植对妊娠率的影响

4.8胚胎和孤雌胚胎共移植对妊娠率的影响

4.9两种提高胚胎移植妊娠率方法的比较

4.10季节对胚胎移植妊娠率的影响

4.11胚龄对移植妊娠率的影响

4.12胚胎与受体牛同步程度对移植妊娠率的影响

4.13双半胚、全胚移植对妊娠率的影响

5结论

参考文献

附录

在读硕士期间发表的学术论文

作者简介

致谢