苹果组培苗多代保存过程中生长特性及生长节奏调控技术研究

摘要

本研究以苹果(Malus domestica Borkh.)品种金矮生、乔纳金、富士和嘎拉试管苗为试材，对不同继代次数苹果组培苗的芽增殖能力、生根能力和叶片再生能力进行研究，以确定长期继代保存的苹果组培苗的生长繁殖能力是否发生变化；通过改变培养温度、增加培养基的渗透压或在培养基中加入生长抑制剂等处理，延缓苹果组培苗生长，以延长继代间隔时间、减少继代次数；同时对延缓生长和恢复生长后的苹果组培苗SOD、POD酶活性及MDA含量进行了测定，以检测苹果组培苗逆境下延缓生长的生理代谢变化，为确定苹果组培苗适宜的种质保存时间，筛选适合的延缓生长方法提供依据。试验结果表明: 1.苹果组培苗在继代5代以内时，继代增殖倍数、生根和叶片不定芽再生能力均较低，不适合进行快速繁殖和离体再生。 2.苹果种质保存组培苗继代13次以后，其芽增殖能力，生根能力和叶片再生能力均稳定在较高水平，经20年左右1OO多次(富士200多次)继代培养保存后，4个品种器官生长、繁殖能力无明显变化。 3.低温条件抑制试管苗生长效果明显，苹果试管苗适宜的低温处理为接种后在25℃条件下缓苗5～10d再移至3～8℃培养，这样可保存试管苗1～1.5年继代一次，茎尖成活率达100％。 4.提高培养基琼脂、蔗糖浓度或添加甘露醇都能提高培养基渗透压，抑制试管苗生长，且随着浓度增加，抑制作用愈发明显，但琼脂、甘露醇处理中有部分茎尖死亡；综合比较，60g/L蔗糖处理延缓试管苗生长效果较好。同一处理下品种间有差异，富士延缓生长的效果好于乔纳金。 5.在室温下添加B9、CCC、PP333、ABA等生长抑制剂的处理中，以80mg/L B9效果较好，不但存活率高，而且试管苗的生长状况较好。 6.在培养基中提高蔗糖、琼脂浓度，添加甘露醇增加渗透压，或者在培养基中添加B9、CCC、PP333、ABA等生长抑制剂，均能使乔纳金和富士的试管苗SOD、POD活性提高，MDA含量降低。不同处理的不同浓度对保护酶活性和MDA含量影响不同。对恢复生长后的试管苗生理活性测定表明，当代SOD、POD活性和MDA含量就恢复到处理前水平。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要英文缩略词表

声明

1引言

1.1继代次数对组培苗生长、繁殖及遗传稳定性的影响

1.1.1继代次数对组培苗玻璃化的影响

1.1.2继代次数对组培苗生长势的影响

1.1.3继代次数对组培苗表型性状的影响

1.1.4继代次数对组培苗增殖能力的影响

1.1.5继代次数对组培苗生根能力的影响

1.1.6继代次数对组培苗再生能力的影响

1.1.7继代次数对组培苗基因表达特性的影响

1.1.8继代次数对组培苗内源激素含量的影响

1.2延缓组培苗生长的研究进展和技术措施

1.3逆境条件下植物生理代谢的变化与苹果组培苗延缓生长保存

2材料与方法

2.1试验材料

2.2试验设计与方法

2.2.1不同继代次数苹果组培苗芽增殖情况的研究

2.2.2不同继代次数苹果组培苗生根情况的研究

2.2.3不同继代次数苹果组培苗离体叶片再生情况的研究

2.2.4延缓苹果组培苗生长的技术研究

2.2.5延缓生长的苹果组培苗恢复生长

2.2.6延缓生长和恢复生长后苹果组培苗SOD活性的测定

2.2.7延缓生长和恢复生长后苹果组培苗POD活性的测定

2.2.8延缓生长和恢复生长后苹果组培苗MDA含量的测定

2.2.9结果调查与统计方法

3结果与分析

3.1不同继代次数苹果组培苗生长、繁殖特性研究

3.1.1不同继代次数苹果组培苗增殖能力的研究

3.1.2不同继代次数苹果组培苗生根能力的研究

3.1.3不同继代次数苹果组培苗叶片再生能力的研究

3.2苹果组培苗延缓生长技术措施

3.2.1培养温度对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.2提高琼脂浓度对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.3提高蔗糖浓度对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.4附加甘露醇对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.5 B9对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.6 CCC对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.7 PP333对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.8 ABA对苹果组培苗延缓生长的效应

3.2.9温度与蔗糖综合处理对苹果组培苗的延缓生长的效应

3.2.10温度与B9综合处理对苹果组培苗延缓生长的效应

3.3苹果组培苗延缓生长和恢复生长处理后生理代谢的变化

3.3.1琼脂浓度对苹果组培苗延缓生长、恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的影响

3.3.2蔗糖浓度对苹果组培苗延缓生长、恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的影响

3.3.3甘露醇浓度对苹果组培苗延缓生长、恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的影响

3.3.4 B9对苹果组培苗延缓生长、恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的影响

3.3.5 CCC对苹果组培苗延缓生长、恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的影响

3.3.6 PP333对苹果组培苗延缓生长、恢复生长后SOD、POD活性和MDA含量的影响

3.3.7温度与蔗糖综合处理对苹果组培苗延缓生长SOD、POD活性和MDA含量的影响趋势

3.3.8温度与B9综合处理对苹果组培苗延缓生长SOD、POD活性和MDA含量的影响趋势

4 讨论

4.1苹果组培苗多代保存过程中生长特性的研究

4.2适宜苹果组培苗种质保存的技术措施

4.2.1适宜苹果组培苗种质保存的低温措施

4.2.2提高渗透压对苹果组培苗延缓生长的效果

4.2.3适宜苹果组培苗种质保存的生长抑制剂种类及浓度

4.3苹果组培苗延缓生长保存后生理代谢变化

5结论

参考文献

附录

在读期间发表的学术论文

作者简介

致谢