酸枣叶片再生和阜平大枣无芽茎段再生不定芽的研究

摘要

本研究以酸枣试管苗叶片、阜平大枣无芽茎段为试材，对影响叶片离体再生不定芽的因素如基本培养基成分、生长调节剂种类及浓度配比、接种材料类型、培养方式以及培养条件等进行了系统研究，成功建立了酸枣的离体叶片再生体系；还研究了在MS基本培养基中，灭菌时间、暗培养时间以及植物生长调节剂对阜平大枣无芽茎段再生不定芽的影响。
　　 主要研究结果如下：
　　 1.获得高效的酸枣叶片再生体系：
　　 （1）通过对不同培养基的筛选，确定MS或WPM是适合酸枣离体叶片再生的基本培养基。碳源为30g/L的蔗糖。
　　 （2）不同植物生长调节剂对叶片再生影响很大。研究发现，细胞分裂素6-BA和TDZ都可以诱导酸枣叶片再生不定芽，但6-BA诱导的再生率非常低，故诱导酸枣叶片再生的细胞分裂素宜选用TDZ，浓度为0.5mg/L；低浓度的生长素可以诱导叶片再生不定芽，诱导酸枣离体叶片再生不定芽的生长素为IBA 0.10mg/L。
　　 （3）通过研究发现，继代10～15代、叶龄30～40d的叶片再生效果较好，再生植株和继代植株的叶片再生效果无显著性差异。
　　 （4）通过对光周期的研究发现，暗培养对叶片再生不定芽是必要的，经过暗培养处理可显著提高叶片再生率，随着每天光照时间的增长，再生率有所下降，光照时间越长，愈伤组织增长的越多。
　　 （5）通过在培养基中附加一定浓度的AgNO3、胰蛋白胨、蛋白胨，发现附加1～2 mg/L AgNO3、500～1000 mg/L胰蛋白胨对提高叶片不定芽的再生率有利，蛋白胨不能促进酸枣叶片再生。
　　 （6）本试验采用两步培养法，首先将叶片接种在分化培养基上，暗培养21天，然后转到MS基本培养基上诱导不定芽再生，此方法中叶片不容易变褐，不定芽伸长较快，且不容易玻璃化，再生率比一步培养法显著提高。
　　 2.MS+6-BA 0.5mg/L +IBA0.1mg/L+GA30.1 mg/L是适合酸枣再生植株伸长的培养基。
　　 3.MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L是适合酸枣再生植株增殖的培养基。
　　 4.1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L是再生植株生根的培养基，暗培养5d，生长素作用10d后转入不含生长素的培养基中，再生率为98.85％。
　　 5.MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L是适合阜平大枣无芽茎段再生不定芽的培养基。

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1 引言

2 材料与方法

3 结果与分析

4 讨论

5 结论

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