绵马贯众可溶性粉质量检测方法的建立及安全性和药效学评价

摘要

绵马贯众可溶性粉是根据实验室前期研究证实具有抗家禽病毒功能，为了申报新兽药，本论文建立了质量检测方法，开展了毒理学和实验室验证工作，具体方法如下:
　　 (1)质量检测方法的建立:利用TLC和可见分光光度法建立制剂检测方法。
　　 (2)稳定性试验:按照新兽药研制规程，取三批样品进行影响因素试验、加速试验和长期留样试验。
　　 (3)安全性评价:分别以急性毒性试验、最大耐受量试验和亚慢性毒性试验评价药物的安全性。
　　 (4)有效性验证:90只21日龄SPF鸡，分成药物测试组、左旋咪唑组、环磷酰胺组、药物+环磷酰胺组和空白对照组，连续口服14天。停药7天后，测定其生长性能、免疫器官指数、ND抗体水平和外周血淋巴细胞数量。同时，取60只21日龄SPF鸡，分成3个药物测试组、黄芪多糖组、病毒对照组和健康对照组，以鸡传染性法氏囊病毒LX株为攻毒株，验证药物对雏鸡的保护效果。
　　 结果:(1)建立了绵马贯众素ABBA为检测对象的TLC定性检测法以及可见分光光度定量检测法，可溶性粉中总间苯三酚含量为99.03mg/g。
　　 (2)稳定性试验显示可溶性粉应密闭、避光保存，有效期为一年。
　　 (3)急性毒性试验显示给药量达到6g/kg/d无死亡和中毒现象，属于实际无毒;最大耐受量为6.25g/kg/d;亚慢性毒性试验显示给药量到达6.25g/kg/d时，对鸡体重、血常规、血液生化指标、脏器指数和实质脏器等均无明显影响。
　　 (4)连续口服绵马贯众可溶性粉14天后，与空白对照组相比，绵马贯众药物组相对增重率可达115％。与环磷酰胺组相比，绵马贯众药物法氏囊指数和胸腺指数明显较高，差异显著(P＜0.05)，并显著提高CD8+T淋巴细胞分群比例，具有缓解环磷酰胺造成的免疫抑制，提高机体免疫力的功效。
　　 (5)人工感染鸡传染性法氏囊后，绵马贯众可溶性粉以100 mg/kg体重连续口服5天80％以上攻毒鸡只可以存活，高剂量组增重率高于病毒对照组2个百分点，且显著提高免疫器官指数，并呈现一定剂量关系。
　　 结论:建立的质量检测方法实现对绵马贯众可溶性粉的质量控制，口服后对家禽的安全性高。以100 mg/kg口服后通过提高家禽免疫力，从而发挥防治人工感染传染性法氏囊病的功效。

目录

声明

摘要

第一章 绵马贯众可溶性粉抗病毒研究进展

第一节 绵马贯众概述

1 化学成分研究进展

2 药理活性研究进展

3 本课题的研究目的和科学意义

第二章 绵马贯众可溶性粉的质量检测方法的建立

1 材料

1．1 药品

1．2 试剂

1．3 仪器

1．4 溶液的配制

2 方法

2．1 绵马贯众可溶性粉性状

2．2 绵马贯众可溶性粉的定性鉴别

2．3 可见分光光度法测定总间苯三酚含量

3 结果

3．1 线性关系

3．2 仪器的精密度、重现性和稳定性

3．3 加样回收率试验

3．4 样品含量测定

4 讨论

5 小结

第三章 绵马贯众可溶性粉稳定性研究

1 材料

1．1 试剂和仪器

1．2 样品来源

2 方法

2．1 考察指标

2．2 稳定性试验

2．3 长期试验

3 结果

3．1 高温试验结果

3．2 光照试验结果

3．3 加速试验结果

3．4 长期试验结果

4 讨论

4．1 影响因素试验

4．2 加速试验

4．3 长期试验

5 小结

第四章 绵马贯众可溶性粉毒理学研究

1 材料

1．1 设备和试剂

1．2 药物

1．3 试验动物

2 方法

2．1 急性毒性试验

2．2 最大耐受量试验

2．3 亚慢性毒性试验

3 结果

3．1 急性毒性试验

3．2 最大耐受量试验

3．3 亚慢性毒性试验

4 讨论

4．1 绵马贯众可溶性粉的急性毒性

4．2 绵马贯众可溶性粉的亚慢性毒性

5 小结

第五章 绵马贯众可溶性粉药效学研究

第一节 绵马贯众可溶性粉免疫增强试验

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

5 小结

第二节 绵马贯众可溶性粉口服治疗传染性法氏囊效果评价

1 材料

2 方法

3 结果

4 分析与讨论

5 小结

第七章 结论

参考文献

在读期间发表论文

作者简历

致谢