金龟子绿僵菌的胞外酶与毒力相关性及应用技术研究

摘要

对实验室筛选保存的金龟子绿僵菌菌株M11-8-7、M7-5-7、M7-10、M6-448、M8-5-83和M8-6-291，利用Folin-酚试剂法测定了蛋白酶活性、利用DNS法测定了几丁质酶活性、利用酸碱滴定的方法测定了脂肪酶活性;以黄粉虫作为标准试虫对其进行了毒力的测定。通过对毒力和胞外酶的活性之间的相关性，发现胞外蛋白酶活性和毒力之间存在较高线性关系其方程为y=47.79-12.19x，R2=0.8978，但是几丁质酶和脂肪酶的活性和毒力之间并没有线性关系。研究筛选出M11-8-7和M7-10为酶活性高且毒力强的菌株。
　　通过调整发酵中蒸馏水的比例，选择出致病性高、发酵效果好，且不易污染的金龟子绿僵菌M11-8-7菌株，并进行了田间应用试验。试验结果显示4500亿孢子/亩金龟子绿僵菌对桃小食心虫有着良好的致死效果。5万亿孢子/亩和10万亿孢子/亩防治花生蛴螬相对于空白对照的增产效果分别为32.98％和36.8％，防虫效果分别为56.25％和87.5％，防治效果分别为52.08％和76.77％。在田间施用动物粪肥后对金龟子绿僵菌有着一定的影响，加鸡粪和羊粪的处理使得绿僵菌防治效果不明显，但是加牛粪和清水对照处理中绿僵菌防治效果分别为66.08％和74.69％。

目录

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摘要

引言

1 绿僵菌

1．1 绿僵菌的分类地位及其生物学性状

1．2 绿僵菌的侵染过程及致病机理

1．3 影响绿僵菌的外界因素

1．4 金龟子绿僵菌的胞外酶

2 桃小食心虫

2．1 桃小食心虫的发生和危害

2．2 影响桃小食心虫生长发育的外部因素

2．3 桃小食心虫的防治

3 蛴螬

3．1 蛴螬的发生和危害

3．2 影响蛴螬生长发育的外部因素

3．3 蛴螬的防治

4 拟研究目标与内容

第一章 金龟子绿僵菌胞外酶活性与毒力的相关性研究

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果与分析

2．1 酪氨酸标准曲线

2．2 培养时间对绿僵菌胞外蛋白酶活性的影响

2．3 六株金龟子绿僵菌的蛋白酶活性和毒力

2．4 葡萄糖标准曲线

2．5 培养时间对绿僵菌胞外几丁质酶活性的影响

2．6 六株金龟子绿僵菌的几丁质酶活性

2．7 培养时间对绿僵菌胞外脂肪酶活性的影响

2．8 六株金龟子绿僵菌的脂肪酶活性

3 讨论

第二章 金龟子绿僵菌发酵条件的改良及应用技术的研究

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2．结果与分析

2．1 固体发酵中水分比例的影响

2．2 对桃小食心虫的防治效果

2．3 花生田防虫增产效果

2．4 花生田与动物粪肥混用后的防治效果

3 讨论

结论

参考文献

作者简历

在读期间发表论文

致谢