枣和酸枣田间愈伤组织途径芽再生技术优化及其在多倍体诱变中的应用

摘要

本研究以116个枣基因型和3个酸枣类型为试材，在田间条件下对影响枝条截面愈伤组织形成和芽再生的相关因素以及秋水仙素处理次数对多倍体的诱变效果进行了研究，优化了田间愈伤组织途径芽再生技术体系，并应用于枣和酸枣多倍体诱导，获得了9个多倍体材料。主要研究结果如下:
　　1.基因型对愈伤组织诱导有很大影响。在119个基因型中，出愈伤的基因型共113个，占供试总量的94.95％。根据愈伤组织的诱导从易到难将供试基因型分为5类。A类（75％＜出愈率≤100％）占供试基因型的56.30％;B类(50％＜出愈率≤75％)占24.37％;C类（25％＜出愈率≤50％）占10.92％;D类（0＜出愈率≤25％）占3.36％;E类（出愈率为0）占5.05％。
　　2.基因型对芽再生能力亦有很大影响。在119个基因型中，截面愈伤诱导出芽的基因型共96个，占供试总量的80.67％。根据芽再生从易到难将基因型分为5类。Ⅰ类（平均单枝截面出芽数＞3.0）占供试基因型的20.17％;Ⅱ类（2.0＜平均单枝截面出芽数≤3.0）占10.08％;Ⅲ类（1.0＜平均单枝截面出芽数≤2.0）占16.81％;Ⅳ类（0＜平均单枝截面出芽数为≤1.0）占33.61％;Ⅴ类(平均单枝截面出芽数为0)占19.33％。
　　3.对出愈率与平均单枝截面出芽数进行了相关性分析，结果表明，二者相关性不显著;同时发现，愈伤组织等级对出芽数有一定的影响，随着愈伤量的提高，单枝截面愈伤出芽数有一个升高的过程，5级愈伤的单枝出芽数较多，可达2.86个，愈伤组织环超过截面半径的1/2的6级愈伤组织芽再生能力稍微有所下降。
　　4.枝条粗度在一定程度上影响出芽能力，直径为1.4-1.9cm的枝条比较容易芽再生，30d后的平均单枝截面出芽数可达2个，显著高于粗度为0.9-1.4cm和1.9-2.4cm枝条的出芽数;树冠上部枝条的芽再生能力显著高于中下部枝条;枝条水平位置和角度对芽再生能力没有显著影响。
　　5.秋水仙素处理次数对多倍体诱变效果有明显影响。与0.05％秋水仙素处理1次相比，处理2次时，各基因型的出愈率平均下降24.01％，平均单枝截面出芽数减少1.61个，平均诱变率下降2.52％。
　　6.优化了田间愈伤组织途径芽再生技术体系，具体的操作流程是:在5月中旬或者下旬，选择位于树体上部、直立、茎粗1.4～1.9cm的健壮枝条进行截枝，用1.5ml诱导剂(4.0mg·L-1 TDZ+2.0mg·L-1AgNO3)处理截面形成层24h，之后截面用湿泥保湿，直到芽体长达2cm左右。
　　7.共获得9个多倍体材料，其中四倍体种质3个，分别来自于乐金1号、运城婆婆枣和宁夏长枣;三倍体种质2个，分别来自于骏枣和磨盘枣;二、四混倍体4个，分别来自于茶壶枣、骏枣、太谷铃铃枣和洪赵小枣。

目录

声明

摘要

缩略词目录

1 引言

1．1 植物多倍化的研究意义

1．1．1 多倍体植株的特点

1．1．2 多倍化植物推动了生物的进化

1．1．3 植物多倍化与人们生活息息相关

1．2 果树多倍体的人工诱导途径

1．2．1 物理诱导

1．2．2 化学诱导

1．2．3 原生质体融合

1．3 果树倍性鉴定研究进展

1．3．1 形态学鉴定

1．3．2 染色体数目鉴定

1．3．3 分子水平鉴定

1．4 枣多倍体研究进展及本研究意义

2 材料与方法

2．1 材料

2．2 试验地土壤和气候条件

2．3 试验方法

2．3．1 田间愈伤组织途径芽再生技术体系的优化

2．3．2 田间愈伤组织多倍体诱导技术体系的优化

2．3．3 优化的田间愈伤组织途径芽再生技术在多倍体诱变中的应用

2．3．4 再生芽的倍性鉴定

2．3．5 试验结果统计分析

3 结果与分析

3．1 田间愈伤组织途径芽再生的影响因素

3．1．1 基因型对愈伤组织诱导的影响

3．1．2 基因型对芽再生能力的影响

3．1．3 愈伤组织等级对芽再生能力的影响

3．1．4 出愈率与单枝截面出芽数的相关性

3．1．5 枝条状态对芽再生能力的影响

3．1．6 田间愈伤组织途径芽再生的优化技术体系

3．2 秋水仙素处理次数对芽再生和多倍体诱导效果的影响

3．2．1 秋水仙素处理次数对愈伤组织诱导的影响

3．2．2 秋水仙素处理次数对芽再生能力的影响

3．2．3 秋水仙素处理次数对诱变效果的影响

3．3 优化的田间愈伤组织途径芽再生技术在多倍体诱变中的应用

3．3．1 再生芽的倍性鉴定

4 讨论

4．1 田间愈伤组织途径影响愈伤组织诱导和芽再生的因素

4．2 枣树多倍体诱变率低的原因分析

4．2．1 基因型对诱变率的影响

4．2．2 秋水仙素处理浓度，次数与处理时间对诱变率的影响

4．3 嵌合体现象和非整数加倍现象

5 结论

参考文献

作者简介

致谢