舍曲林对模型大鼠缺血性脑卒中后抑郁发生的预防机制探讨

摘要

背景： 脑卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）是脑卒中最为常见的并发症之一，常表现为脑卒中后出现心境障碍并可伴随认知功能的损伤。应用抗抑郁剂预防卒中后抑郁的产生，对提高患者生活质量、增进神经功能康复意义重大。酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B，TrkB)为脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophicfactor，BDNF)的受体之一，环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response elementbinding protein，CREB)为信号转导通路一个关键的调节子，它们表达的变化有可能通过间接改变BDNF从而影响PSD的发生。 目的： 1、观察脑缺血模型大鼠应用舍曲林后行为学的改变，了解舍曲林对脑缺血模型大鼠抑郁症状发生的影响。 2、明确TrkB、CREB在PSD模型大鼠中海马区的表达状况，探讨PSD预防治疗对TrkB、CREB的影响。 方法： 1、选用改良双侧颈总动脉结扎术制备全脑缺血模型大鼠，并在此模型的基础之上联合孤养法、慢性不可预见性温和刺激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)制备PSD模型大鼠，并对实验大鼠给予舍曲林灌胃以模拟患者口服舍曲林。将实验大鼠按相应条件分为空白对照组、抑郁组、PSD组、舍曲林预防组。 2、通过测量实验大鼠体重并记录大鼠体重的变化;利用蔗糖水消耗试验检测大鼠的兴趣感以及对奖赏的反应性;利用旷场试验(open field test，OFT)检测实验大鼠的自主探索能力、自发运动能力等，通过所得数据共同评估模型的抑郁状态。 3、通过免疫组织化学技术检测实验大鼠海马TrkB、CREB蛋白的表达，运用半定量逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）技术检测实验大鼠海马TrkB、CREB mRNA的表达，探讨TrkB、CREB与PSD预防治疗的关系。 结果： 1、行为学测定: ①与空白对照组和舍曲林预防组相比，PSD组和抑郁组大鼠体重的增长速度缓慢。应激开始后第7天、第14天、第21天PSD组和抑郁组大鼠体重与空白对照组和舍曲林预防组体重相比差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05)，舍曲林预防组体重与空白对照组体重相比差异无统计学意义（P＞0.05）; ②PSD组和抑郁组大鼠的蔗糖水消耗量少于空白对照组和舍曲林预防组，应激开始后第7天、第14天、第21天PSD组和抑郁组大鼠体重与空白对照组和舍曲林预防组相比差异有统计学意义(P＜0.01)，舍曲林预防组体重与空白对照组体重相比差异无统计学意义(P＞0.05); ③应激开始之后的第7天、第14天、第21天PSD组和抑郁组实验大鼠OFT的水平、垂直运动以及平均速度均低于空白对照组和舍曲林预防组，差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05），舍曲林预防组体重与空白对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05); 2、免疫组织化学检测: ① PSD组和抑郁组模型大鼠海马各区TrkB的平均光密度值均低于空白对照组，差异有统计学意义(FCA1=526.47，PCA1=0.000;FCA2=581.95，PCA2=0.000;FA3=760.84，PCA3=0.000)，舍曲林预防组TrkB的平均光密度值与空白对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05); ②PSD组和抑郁组模型大鼠海马各区CREB的平均光密度值均低于空白对照组，差异有统计学意义(FCA1=42.90,PCA1=0.000; FCA2=38.60，PCA2=0.000; FCA3=18.42，PCA3=0.000)，舍曲林预防组CREB的平均光密度值与空白对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）; 3、半定量RT-PCR检测: ①PSD组和抑郁组模型大鼠海马TrkB mRNA的相对表达量均低于空白对照组，差异有统计学意义(PPSD=0.010，P抑郁=0.021);预防组模型大鼠海马TrkB mRNA的相对表达量高于PSD组，相比差异有统计学意义（P预防=0.023）。 ②PSD组模型大鼠海马CREB mRNA的相对表达量均低于空白对照组和预防组，与空白对照组相比差异有统计学意义(PPSD=0.011)，预防组模型大鼠海马CREBmRNA的相对表达量高于PSD组，相比差异有统计学意义(P预防=0.012)。 结论： (1)对脑卒中大鼠预防使用舍曲林可降低PSD的发生。 (2)预防组大鼠海马区TrkB、CREB表达上调，可能参与其药物预防的生物学机制。

目录

声明

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 实验动物

1．2 主要试剂

1．3 主要仪器

1．4 实验方法

1．5 统计学处理

2 结果

2．1 一般情况

2．2 行为学测定

2．3 免疫组织化学检测结果

2．4 总RNA完整性和纯度

2．5 TrkB、CREB mRNA半定量RT-PCR结果

3 讨论

3．1 卒中后抑郁动物模型

3．2 舍曲林预防治疗PSD

3．3 PSD预防治疗的神经营养学说

3．4 TrkB、CREB在PSD预防治疗中的作用

4 小结

参考文献

综述 卒中后抑郁预防治疗的研究现状

中英文词汇对照表

攻读学位期间发表文章情况

致谢

个人简历