睡眠剥夺对大鼠不同脑区5羟色胺1A受体、多巴胺受体基因表达的影响

摘要

背景：
　　现有证据表明，在睡眠剥夺期间与清醒期间有着不同的基因表达。睡眠剥夺对5-HT、DA等神经递质的改变已有相关的研究，但它们之间的平衡转换和协同作用的调节机制目前尚不清楚。
　　目的：
　　通过检测大鼠在不同时间睡眠剥夺三个脑区（海马、下丘脑、纹状体）5-HT受体1A、DA受体D1基因和DA受体D2基因表达改变情况，分析睡眠剥夺对这些基因表达的影响，探讨不同神经递质通路参与睡眠调节的差异。
　　方法：
　　1、选择10周龄雄性SD大鼠24只。分别进行24小时、48小时、72小时REM睡眠剥夺。
　　2、采用旷场实验检测动物潜伏期、水平分数、直立次数。验证睡眠剥夺体力和精神疲劳模型。
　　3、每组取大鼠海马、下丘脑、纹状体三个脑区脑组织，利用RT-PCR技术分别检测5羟色胺1A受体和多巴胺D1R、D2R基因的表达情况。
　　4、应用SPSS11.5统计软件对实验数据进行相应的统计与处理。计量资料进行统计分析选用均数±标准差((x)±s)。两组间均数进行对比与分析采用独立样本t验;多组间均数进行比较采用单因素方差分析，进行两两比较采用LSD检验，进行相关性分析采用Pearson相关，P＜0.05表示统计结果的差异具有显著性。
　　结果：
　　1、SD大鼠经过睡眠剥夺后进行旷场实验，水平得分及垂直得分均有很大的波动，大鼠对环境的认知能力明显下降，体力、精神疲劳。说明睡眠剥夺对机体的精神活动产生抑制。
　　2、睡眠剥夺影响了大鼠海马(F=56.203，P=0.000)和纹状体（F=77.288，P=0.000）区域5-HT1A的基因表达，差异具有统计学意义，在海马和纹状体区域各睡眠剥夺组大鼠的表达量均高于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，在海马剥夺72小时组高于剥夺24小时(P=0.005)和48小时(P=0.010)组，纹状体区域则各组动物的差异均具有统计学意义（P＜0.05）。各组大鼠下丘脑区域5-HT1A的基因表达差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　3、睡眠剥夺影响了大鼠海马(F=74.708，P=0.000)、纹状体(F=80.687，P=0.000)区域D2基因的表达，差异具有统计学意义，各睡眠剥夺组大鼠在海马和纹状体区域的表达量均低于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，剥夺时间长的动物基因表达量也更低，海马与纹状体脑区基因表达量各组动物的差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。各组大鼠下丘脑区域D2R的基因表达表达差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　4、相关分析显示对照组各脑区5-HT1A和D2R基因的表达不存在相关性，睡眠剥夺24小时在海马(r=-0.868，P=0.025)、纹状体(r=-0.883，P=.02)、下丘脑(r=-0.841,P=0.036)两个基因的表达均呈负相关，睡眠剥夺48小时和72小时在海马(r=-0.881，P=0.02; r=-0.878, P=0.021)、纹状体(r=-0.735，P=0.006; r=-0.855, P=0.03)两个基因的表达也呈负相关。
　　5、睡眠剥夺对大鼠海马、纹状体和下丘脑区域D1R基因表达表达差异不具有统计学意义(P＞0.05)。
　　结论：
　　睡眠剥夺大鼠在海马和纹状体5-HT1A与D2R基因表达均发生显著变化，5-HT1A基因表达增高、D2R基因表达下降，并呈负相关，表明5-羟色胺系统和多巴胺系统在受体水平对睡眠节律的调节具有协同性。

目录

声明

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 主要试剂和仪器

1．3 主要溶液配制

1．4 动物模型

1．5 行为学测试

1．6 逆转录--聚合酶链反应

1．7 统计学处理

2 结果

2．1 睡眠剥夺对大鼠自主行为的影响

2．2 睡眠剥夺对大鼠不同脑区5-HT1A基因表达的影响

2．3 睡眠剥夺对大鼠不同脑区D1基因表达的影响

2．4 睡眠剥夺对大鼠不同脑区D2基因表达的影响

2．5 睡眠剥夺大鼠不同脑区5-HT1A基因和D2基因表达的相关性

3 讨论

3．1 睡眠剥夺动物模型评价

3．2 睡眠剥夺对SD大鼠不同脑区5-HTIA受体mRNA表达的影响

3．3 睡眠剥夺对SD大鼠不同脑区多巴胺D1R、D2R mRNA表达的影响

3．4 睡眠-觉醒是多个神经递质相互协同作用的结果

4 小结

参考文献

综述 睡眠与5-羟色胺、多巴胺的研究

附录

攻读学位期间发表文章情况

致谢

个人简历