瓜蒌通脉丸对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的：瓜蒌通脉丸（由瓜蒌、党参、丹参、延胡索、三七、赤芍、白芍组成）是在多年临床观察筛选效方的基础上，由汤剂改变为丸剂而成，具有理气化痰，活血化瘀通络之功，临床观察已证实对心血管疾病有较好的疗效。为了进一步探讨其作用机制，参考相关文献采用连续皮下注射异丙肾上腺素的方法复制大鼠急性心肌缺血损伤模型，并给予药物干预，观察其对心肌缺血大鼠心电图ST 段变化、心肌酶、硫化氢以及血清和心肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶、超氧化物歧化酶、丙二醛含量的影响，探讨瓜蒌通脉丸对大鼠缺血心肌损伤的保护作用机制，为进一步临床应用提供实验依据。方法：选用SD大鼠50只（体重180～210g，雌雄不拘），大鼠自由饮水进食，饲养于18℃～22℃明暗各12小时的清洁级动物实验室内，基础饲料适应性喂养5天后，随机分为5组：正常对照组（简称正常组）；模型对照组（简称模型组）；瓜蒌通脉丸低剂量组（简称低剂量组）；瓜蒌通脉丸高剂量组（简称高剂量组）；美托洛尔组（简称对照组）；每组各10只。除正常组外，各组每天均皮下注射ISO 5mg/kg，连续10d，复制大鼠冠心病心肌缺血模型。正常组皮下注射等量的生理盐水。大鼠造模的同时，瓜蒌通脉丸高、低剂量组分别给予4、2g/（kg·d）瓜蒌通脉丸灌胃，对照组按0.1g/（kg·d）的标准灌胃，正常组和模型组等灌服等容积的生理盐水，1次/日。于末次注射ISO后，大鼠称重，禁食不禁水12h，水合氯醛3mL/kg 腹腔注射麻醉，仰卧位固定，四肢皮下插入针状电极，连接BL-420E+生物机能实验系统，记录标准Ⅱ导联心电图ST 段的变化。然后在麻醉状态下颈动脉采血，将血样低温离心，分离血清或血浆，检测NO、NOS、SOD、MDA、H2S 含量的变化。取血后迅速开胸剖取心脏，在心尖部取适量的心肌组织，将心肌组织在预冷的生理盐水中漂洗2次，除去血液，滤纸拭干，用分析天平称重，以生理盐水制成10％匀浆，检测NO、NOS、SOD、MDA 含量的变化。硝酸盐还原酶法测定NO 含量，吸光度法测定NOS 活性；MDA、SOD的含量检测严格按照试剂盒说明书进行。血浆中H2S的检测采用敏感硫电极法。所有数据均采用SPSS13.0软件进行统计分析。结果：1瓜蒌通脉丸对ISO 所致大鼠心肌缺血心电图ST 段的影响模型组大鼠心电图ST 段的变化（0.94±0.33）明显高于正常组（0.13±0.09）（P＜0.01)，显示心肌缺血造模成功。经药物干预后高剂量组和对照组大鼠心电图ST 段的变化值（0.37±0.21、0.51±0.25）均明显低于模型组（P＜0.01)。高剂量组和对照组之间比较无显著性差异(P＞0.05)。2 瓜蒌通脉丸对血清心肌酶的影响模型组血清LDH、CK 含量（749.3±168.23、3218.5±674.2）较正常组（334.5±148.5、1557.3±539.5）明显升高(P＜0.01)，表明心肌缺血造模成功；经药物干预后，各用药组LDH、CK 含量较模型组均明显降低(P＜0.05 或P＜0.01)；瓜蒌通脉丸高剂量组（1751.6±562.7）在降低血清CK 含量方面优于低剂量组（2 397.8±1001.4）和对照组（2381.8±489.8）(P＜0.05)；各用药组在降低血清LDH 含量方面的比较无显著性差异(P＞0.05)。3 瓜蒌通脉丸对血清及心肌组织NO 含量影响与正常组（40.7±4.8、11.34±2.48）相比， 模型组血清和组织中NO（28.7±3.8、6.34±1.24）的含量显著降低（P＜0.01）。经药物干预后，各用药组大鼠的血清及组织中NO 含量显著升高（P＜0.05 或P＜0.01）。其中，瓜蒌通脉丸高（41.7±5.1、11.17±2.41）、低（40.8±3.6、10.78±2.36）剂量组在血清及组织中升高NO 含量方面优于对照组（36.2±4.1、8.57±1.83） (P＜0.05 或P＜0.01)，而高、低剂量组之间比较无统计学意义（P＞0.05)。4 瓜蒌通脉丸对血清及心肌组织NOS 活性的影响模型组与正常组比较，模型组血清和组织中NOS（12.72±3.06、0.68±0.19）活性显著降低（P＜0.01）。经药物干预后，各用药组血清及组织中NOS 活性均能显著升高(P＜0.05 或P＜0.01)。但各用药组相比较，无显著性差异(P＞0.05)。5 瓜蒌通脉丸对血清及心肌组织MDA、SOD的影响模型组血清及组织中（4.39±1.25、3.91±0.66）MDA 含量较正常组（2.66±1.06、1.93±0.37）明显升高(P＜0.01)，而模型组血清及组织中（74.70±15.70、52.58±9.24）SOD较正常组（130.60±26.57、76.85±6.36）明显降低(P＜0.01)；经药物干预后，各用药组均能降低血清及组织中MDA 含量和升高SOD的活性(P＜0.05 或P＜0.01)；瓜蒌通脉丸高（120.73±26.43、73.89±7.55）、低剂量组（118.45±26.52、70.09±8.26）在升高血清及组织SOD 活性方面优于对照组（95.78±18.74、62.35±8.86）(P＜0.05 或P＜0.01)；而各用药组在降低MDA 含量方面比较无显著性差异(P＞0.05)。6 瓜蒌通脉丸对血浆H2S浓度的影响各组大鼠血浆中H2S浓度存在显著差异，模型组（16.20±2.86）较正常组（24.69±4.05）相比，H2S浓度明显降低（P＜0.01）。给予药物干预后，瓜蒌通脉丸高（20.45±2.99）、低剂量组（23.81±3.88）及对照组（19.08±2.49）H2S浓度显著升高(P＜0.05 或P＜0.01)。瓜蒌通脉丸低剂量组在升高血浆H2S 方面优于高剂量组及对照组(P＜0.05 或P＜0.01)。而高剂量组与对照组之间比较无统计学意义（P＞0.05)。结论：1.瓜蒌通脉丸能明显改善急性心肌缺血大鼠心电图ST 段的变化，降低心肌酶LDH、CK的活性。说明瓜蒌通脉丸可能通过改善心肌的血氧供应，减轻心肌缺血损伤程度和范围，保护和稳定心肌细胞，从而达到治疗心肌缺血的作用。2.瓜蒌通脉丸能提高心肌缺血大鼠血清及心肌组织中NO、NOS的含量，促进内源性NO生成和释放，扩张血管、保护血管内皮功能，从而发挥抗心肌缺血作用。3.瓜蒌通脉丸能够升高血清及心肌组织中SOD活力，降低MDA含量，说明瓜蒌通脉丸具有抗脂质过氧化作用，防治心肌缺血过程中脂质过氧化反应造成的心肌细胞损伤，从而保护心肌细胞。4.瓜蒌通脉丸能提高心肌缺血大鼠血浆中H2S的含量，扩张血管、降低血压、抑制平滑肌细胞增殖，保护缺血心肌，以达到治疗心肌缺血的目的。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英文缩写

声明

第1章综述中医药防治心肌缺血实验研究概况

第2章实验研究

第3章结论与讨论

参考文献

附录

致谢

攻读学位期间取得的成果