聚(甲基丙烯酸甲酯)杂化整体柱的制备及其在蛋白分离中的应用

摘要

随着高效液相色谱法（HPLC）在生命科学，环境科学，药物分析测定等领域中的广泛应用，作为HPLC系统核心的色谱柱的研究也越来越炙手可热。自八十年代发展起来的一种新型的色谱分离固定相-整体柱，因其具有制备简单，通透性好，机械强度高，能实现快速、高效分离等优点逐渐在色谱柱研究中占据主要地位。本文从两个方面改善了整体柱的制备条件，并合成了新型杂化整体柱。
　　本文首先以甲基丙烯酸甲酯为功能单体，以偶氮二异丁腈为引发剂，以FeCl3为无机催化剂，以NaHSO3为无机添加剂和调节剂，通过反相原子转移自由基聚合（R-ATRP）法制备了阳离子交换杂化整体柱。考察了影响整体柱制备的主要因素，如单体和交联剂的比例和致孔剂类型的选择。通过扫描电镜、压汞法、红外光谱法对该整体柱的结构进行了表征。并通过考察流速与柱压降的关系对该整体柱的机械稳定性和渗透性进行了评价。将该整体柱用作HPLC的固定相分别对人血清中白蛋白（HSA）和三种混合蛋白进行了成功分离，并考察了盐浓度和pH值对HSA保留行为的影响。
　　其次，本文还以乙烯基三乙氧基硅烷和三甲氧基硅烷为反应前体，经醋酸水解后，与有机单体甲基丙烯酸甲酯进行缩合反应，制备了有机-无机杂化整体柱。结果证明，该整体柱具有良好的机械稳定性和较均匀的孔结构。此外还将该整体柱用作HPLC的固定相对人血清中免疫球蛋白（IgG）以及混合蛋白进行了成功的分离，最后考察了盐浓度和pH值对IgG色谱保留行为的影响。
　　最后，本文还尝试了以甲基丙烯酸丁酯为有机单体，制备有机-无机杂化整体柱，并将其作为HPLC的固定相对鸡蛋清中的溶菌酶实现了快速分离（4min）。

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第1章 绪论

1.1 引言

1.2 整体柱的简介

1.3 整体柱的制备机理

1.4 整体柱的应用

1.5 存在问题与展望

第2章 阳离子交换杂化整体柱的R-ATRP制备及其对人血清中白蛋白的分离

2.1 引言

2.2 实验部分

2.3 结果与讨论

2.4 本章小结

第3章 聚（甲基丙烯酸甲酯）硅胶杂化整体柱的制备及其对人血清中免疫球蛋白的分离

3.1 引言

3.2 实验部分

3.3 结果与讨论

3.4 本章小结

第4章 聚（甲基丙烯酸丁酯）硅胶杂化整体柱的制备及其对鸡蛋清中溶菌酶的分离

4.1 引言

4.2 实验部分

4.3 结果与讨论

4.4 本章小结

参考文献

硕士研究生期间发表的论文

致谢