水杨酸对丹参离体培养物丹酚酸B含量及抗氧化性的影响

摘要

丹参是我国重要的传统中药材，近年的研究表明丹参的水溶性成分具有多方面的药理活性，其中最重要的就是丹参水溶性成分的抗氧化活性。丹参水溶性成分主要是酚酸类物质，其中以丹酚酸B含量最为显著。本文用水杨酸处理丹参的三种离体培养物，以期提高丹参离体培养物中丹酚酸B的含量，为从丹参的离体培养物中筛选有效成分丹酚酸B的高产细胞系提供方法和数据参考。
　　本文首先对野生丹参进行了组织培养，以丹参的幼嫩叶片为外植体，进行愈伤组织诱导，优化了激素配比。以愈伤组织的诱导率，生长状态为指标，得出愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L。以70％甲醇为溶剂，采用超声波法提取丹参三种离体培养物的酚酸类物质，利用HPLC法测定培养物中丹酚酸B的含量。结果表明，三种培养物中均含有丹酚酸B，且培养物丛生芽中含量最高，达到50.90mg/g。以不同浓度的水杨酸处理丹参三种离体培养物，研究水杨酸处理对丹参的三种离体培养物的生长和丹酚酸B含量的影响。结果表明水杨酸对丹参三种离体培养物的增殖均有抑制作用，且抑制效应随水杨酸浓度的升高而增强；对于未分化的丹参离体培养物，水杨酸表现出低浓度促进高浓度抑制丹酚酸B的生成，其中0.05mmol/L的水杨酸能较好的提高丹参未分化离体培养物中丹酚酸B含量；而对于已分化的丹参离体培养物，水杨酸则抑制了丹酚酸B的生成。最后研究了经水杨酸处理后的丹参离体培养物中丹酚酸B含量的变化与其抗氧化活性之间的关系。以抑制羟自由基能力、抗脂质过氧能力以及对高铁盐铁氰化钾系统的还原能力为指标进行考察，结果表明丹参酚酸类物质中丹酚酸B含量的高低与其抗氧化性呈正相关。

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第1章 文献综述

1.1 丹参的基本特征

1.2 丹参培养的研究概况

1.2.1 丹参的组织培养

1.2.2 丹参细胞的悬浮培养

1.3 丹参次级代谢产物研究状况

1.3.1 丹参次级代谢产物种类及作用

1.3.2 丹参次级代谢产物的合成及调控

1.4 诱导子的研究概况

1.4.1 诱导子的种类

1.4.2 诱导子的作用机制及特征

1.4.3 水杨酸在提高丹参次级代谢产物方面的研究

1.5 抗氧化性的相关研究

1.5.1 抗氧化剂的研究进展

1.5.2 丹参的抗氧化性研究进展

1.6 本实验的目的意义

第2章 丹参离体培养物的获得及丹酚酸B的含量测定

2.1 引言

2.2 实验材料与方法

2.2.1 实验材料

2.2.2 实验方法

2.3 实验结果与讨论

2.3.1 不同激素配比对丹参愈伤诱导率的影响

2.3.2 丹参不定芽的分化

2.3.3 丹参不定芽的生根及生长情况

2.3.4 丹参再生苗的驯化移栽

2.3.5 丹参悬浮细胞的培养

2.3.6 丹参不同离体培养物中丹酚酸B的含量

第3章 水杨酸处理对丹参离体培养物生长、丹酚酸B含量变化及抗氧化性的影响

3.1 引言

3.2 实验材料与方法

3.2.1 实验材料

3.2.2 实验方法

3.3 实验结果与讨论

3.3.1 水杨酸处理对丹参三种离体培养物生长的影响

3.3.2 水杨酸处理丹参离体培养物丹酚酸B含量的影响

3.3.3 丹参离体培养物酚酸类提取物的抗氧化活性

第4章 结论

参考文献

致谢