pH响应的抗原和免疫激动剂共载体系的构建及其抗肿瘤免疫治疗研究

摘要

由于纳米载体能够提高肿瘤相关抗原（TAAs）被抗原呈递细胞的摄取率，因此，基于纳米载体肿瘤免疫治疗策略被认为是非常有前景得治疗手段。然而，目前的肿瘤相关抗原装载手段太过复杂，而且其负载率并不理想，更重要的是，基于纳米载体的肿瘤免疫治疗策略往往无法有效的活化CD8+T淋巴细胞，从而导致较低的肿瘤治疗效果。因此，发展一种更为理想的肿瘤相关抗原运载体系，对于抗肿瘤的免疫治疗具有重大的意义。
　　本研究制备了一个结构简单但功能强大的基于pH响应的金属有机框架（MOFs）。通过一步法直接将TAA装载到金属有机框架纳米材料中，在溶酶体的酸性环境中，由于金属配体键不稳定，MOFs纳米材料发生降解；从而促进纳米材料从内涵体/溶酶体中逃逸，进而增加抗原的交叉呈递。此外，未甲基化的胞嘧啶核苷酸-鸟嘌呤核苷酸（CpG）通过Watson Crick碱基配对与MOFs中的鸟苷三磷酸腺苷（GMP）结合，CpG能够进一步增强CD8+T细胞的活性。实验结果表明，MOFs共载抗原和佐剂的合成方法非常简单、方便、有效，在体外和体内实验结果均表明共载体系无明显毒性。该方法具有较高的抗原负载能力，最大抗原包封率约为55％（w/w）。此外，我们建立了B16-OVA的小鼠荷瘤模型，结果显示，给予pH响应的共载体系治疗的小鼠的肿瘤得到很好的抑制（100%存活）。最后，我们通过对肿瘤组织进行免疫组化分析，表明共载体系治疗的肿瘤组织发现大量的杀伤性细胞毒性T淋巴细胞的浸润，证明抗肿瘤的作用是激活免疫应答产生的。结果表明，构建的具有pH响应溶酶体逃逸能力的共载体系能够通过诱导细胞免疫对癌症进行治疗。

目录

声明

缩略语说明

第1章 绪论

1.1 研究背景

1.2 肿瘤疫苗的发展

1.3 佐剂的发展

1.4 纳米载体免疫治疗肿瘤方面的研究

1.5 金属有机框架纳米材料的应用背景

1.6 立题依据

第2章 pH响应MOF纳米材料的制备与表征

2.1 试剂与仪器

2.2 纳米材料的制备

2.3 纳米材料的表征

2.4 实验结果与讨论

2.5 本章小结

第3章MOF-OVA@CpG纳米疫苗免疫治疗肿瘤的效果

3.1实验与仪器

3.2 实验方法

3.3 实验结果与讨论

3.4 本章小结

第4章 MOF-OVA@CpG免疫治疗肿瘤的机制研究

4.1 试剂与仪器

4.2 实验方法

4.3 实验结果与讨论

4.4 本章小结

总结

参考文献

致谢

攻读学位期间取得的科研成果