消脂护肝胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠GSH-PX、SOD、MDA的影响

摘要

目的： 本课题采用高脂饲料联合四环素腹腔注射制备大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型，通过与西药东宝肝泰对照，观察中药消脂护肝胶囊对NAFLD大鼠模型肝匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等的影响，深入阐释消脂护肝胶囊防治NAFLD的作用机制，为研制和开发新药奠定基础。 方法： 健康雄性SD大鼠72只，正常喂养在20±3℃、明暗各12小时的动物实验室内，1周后，按体重分层随机分为6组，分别为空白组、模型组、东宝肝泰组(东宝组)和消脂护肝胶囊高(消高组)、中(消中组)、低(消低组)剂量组，每组12只。空白组予普通饲料喂养，其余5组均予高脂饲料(84％基础饲料+10％猪油+5％蛋黄粉+1％胆固醇)喂养，并于造模第1天腹腔注射四环素15mg/100g鼠重，1周后每6天一次腹腔注射四环素10mg/100g鼠重，共计6次。自造模的第2周起，除空白组外，各组均按1ml/100g·d分别灌服生理盐水及相应药物，每日1次。消脂护肝胶囊高、中、低剂量组分别按0.15g/100g、0.075g/100g、0.0375g/100g剂量灌胃，用量相当于成人用药量的20倍、10倍、5倍；东宝肝泰灌胃剂量为0.06g/100g，用量相当于成人用药量的10倍。每周称鼠重一次，并相应调整用药剂量。第7周(末次腹腔注射后1周)实验结束时处死全部实验动物。方法：隔夜禁食，次日以10％水合氯醛溶液0.3ml/100g鼠重腹腔注射麻醉后，自腹主动脉采血，之后迅速取出肝脏称肝湿重；取肝左叶1块0.5cm×1cm×0.3cm组织置于10％磷酸缓冲甲醛液固定，备作光镜病理切片；再取肝左叶1块500mg制成10％肝匀浆；所采血液室温静置30分钟后分离血清备用。检测并观察各组大鼠：(1)肝匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)；(2)血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)；(3)血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)；(4)肝组织病理学；(5)肝指数。 结果： 1.与空白组比较：模型组肝指数、血清ALT、AST、TC、TG水平、肝匀浆MDA均有显著升高(P<0.01)，肝匀浆GSH-PX、SOD显著降低(P<0.01)；病理组织学呈中-重度脂肪变。 2.与模型组比较：各用药组肝指数、肝匀浆MDA、血清ALT、AST、TC、TG均有不同程度下降，消脂护肝胶囊高、中、低剂量组及东宝组肝组织GSH-PX、SOD均有显著升高(P<0.05)。以消脂护肝胶囊高、中剂量组疗效最优(P<0.01)，东宝组次之(P<0.05)。 消脂护肝胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠GSH-PX、SOD、MDA的影响 3.与东宝组相比：消高组的肝指数、病理组织学改善明显；血清ALT、AST、TC、TG显著降低，肝匀浆MDA显著降低，GSH-PX、SOD显著升高(P<0.01)；消中组优于东宝组。 4.与消脂护肝胶囊低剂量组相比，高、中剂量组在降低肝匀浆MDA、升高GSH-PX、SOD方面有明显优势(P<0.01)；消脂护肝胶囊高、中剂量组之间比较无显著性差异(P>0.05)。 结论： 1.采用高脂饲料联合四环素腹腔注射可以成功复制大鼠NAFLD模型，造模时间短，成功率高，较接近临床NAFLD的发病机制，是一种较为理想的造模方法。 2.消脂护肝胶囊可有效降低NAFLD模型大鼠的肝指数、血清ALT、AST、TC、TG水平，改善病理组织学变化，具有显著的阻止肝脂肪变的发生与发展的作用； 3.NAFLD的形成和发展与肝匀浆MDA、GSH-PX、SOD水平密切相关。NAFLD的形成和发展与MDA呈正相关，与GSH-PX、SOD呈负相关； 4.消脂护肝胶囊可降低肝组织MDA含量，升高GSH-PX、SOD水平，阻止或减轻氧应激和脂质过氧化反应；这可能是其防治NAFLD的重要机制之一； 5.无论从实验疗效指标(TC、TG、ALT、AST、病理学等)还是从肝匀浆MDA、GSH-PX、SOD调控情况来看，消脂护肝胶囊防治NAFLD的效果均明显优于东宝肝泰对照组； 6.随着剂量的增加，消脂护肝胶囊实验疗效指标、实验观察指标(肝匀浆MDA、GSH-PX、SOD)均获得更明显的改善，说明该药在所选范围内存在一定量效关系。

目录

论文说明：中英文词语对照

声明

前言

材料与方法

1.实验材料

2.实验方法

3.统计方法

实验结果与分析

1.一般情况

2.各组大鼠腹腔解剖所见及体重、肝指数的比较

3.各组大鼠肝组织病理学变化

4.各组大鼠血清ALT、AST的比较

5.各组大鼠血清TC、TG的比较

6.各组大鼠肝匀浆GSH—PX、SOD、MDA的比较

理论探讨

1.中医学对非酒精性脂肪肝的认识

2.现代医学对非酒精性脂肪肝的认识

3.对脂肪肝动物模型的研究

4.导师学术思想

5.消脂护肝胶囊的组成与方义

6.消脂护肝胶囊防治非酒精性脂肪肝的机制探讨

结论

致谢

参考文献

附录