熄风化痰活血饮对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤模型Bcl-2的影响

摘要

目的：观察熄风化痰活血饮对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤模型的影响，探讨熄风化痰活血饮治疗急性脑缺血再灌注损伤的部分作用机理，为临床今后进一步开发有效的治疗急性缺血性中风的中医药提供科学依据。 方法：选用SD健康大鼠60只，体重在320±20g，雌雄各半，随机分为6组：假手术组、模型组、尼莫地平组、熄风化痰活血饮高、中、低剂量组，采用插线法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。假手术组和模型组给予蒸馏水3ml/100g·d；尼莫地平组给予尼莫地平混悬液3ml/100g·d(0.6mg/100g)；熄风化痰活血饮高、中、低剂量组分别给予临床用药量的25、20、15倍水煎浓缩液灌胃，用量均按人与大鼠体表面积等效剂量折算，各组等容灌胃，每日2次；灌胃6天后，第7天采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，造模前2h最后一次给药，第24h后腹主动脉取血进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测，断头取脑组织称重后，常规固定，HE染色，进行病理组织学观察，并应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记技术(TUNEL)检测脑神经细胞凋亡，应用免疫组化法检测Bcl-2染色细胞阳性数。 结果：模型组大鼠脑指数、神经体征评分明显高于假手术组(P<0.05)，与模型组相比，熄风化痰活血饮高剂量、中剂量组大鼠脑指数、神经体征减轻最为明显(P<0.01)；与假手术组相比，模型组大鼠血清MDA明显升高，血清SOD明显降低，Bcl-2染色阳性细胞数明显降低、神经细胞凋亡阳性细胞数明显增高(P<0.01)，有显著性差异；与模型组相比，给药组动物血清SOD明显升高、血清MDA明显降低、神经细胞凋亡阳性细胞数明显降低(P<0.01)，Bcl-2染色阳性细胞数明显升高(P<0.05)，有显著统计学意义；与尼莫地平组相比，熄风化痰活血饮高剂量组脑指数、凋亡细胞数、血清MDA明显降低，血清SOD、Bcl-2明显升高(P<0.05)；脑组织切片TTC染色显示模型组大鼠脑组织梗死区域最大，各给药组大鼠脑组织缺血区域明显减小；病理组织学检查发现模型组动物大脑组织出现不同程度水肿，神经细胞轴索肿胀、断裂等缺血样改变，给药组动物上述病变明显减轻。 结论：熄风活血化痰饮对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，作用同于尼莫地平组，在熄风化痰活血饮大、中、小剂量各治疗组中，尤以熄风化痰活血饮高剂量、中剂量组效果最好。熄风化痰活血饮能明显改善急性脑缺血再灌注大鼠神经体征、脑水肿，可通过上调脑组织Bcl-2，血清SOD；下调血清MDA水平，对抗急性脑缺血再灌注时自由基对脑组织的损伤作用，抑制细胞凋亡。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

材料与方法

1实验材料

1.1实验动物

1.2实验药品

1.3主要实验试剂

1.4主要实验器材

2实验方法

2.1动物分组及处理

2.2急性脑缺血大鼠模型复制

2.3观察指标及指标测定方法

2.4数据处理

结果

1.整体状况比较

2.各组大鼠神经体征评分和体重比较

3.各组大鼠脑指数比较

4.各组大鼠Bcl-2水平的变化

5.各组大鼠神经细胞凋亡

6.各组大鼠脑组织梗死面积及病理学改变

7.各组大鼠血清SOD、MDA的改变

理论探讨

1中医对急性脑缺血的认识

2导师学术思想

2.1肝肾阴虚为本

2.2风、痰、瘀是急性缺血性中风的主要病理因素

2.3熄风化痰活血法是急性缺血性中风（急性脑缺血）的基本治法

2.4熄风化痰活血饮的方义分析及药理作用

3熄风化痰活血饮对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤模型的影响

结论

致谢

参考文献

附录