蛇菰多糖的分离提取及抗疲劳作用研究

摘要

本文研究了蛇菰粗多糖的提取方法，用乙醇分级沉淀方式对所得的粗多糖进行初步纯化的实验条件；利用TLC及GC测定了蛇菰多糖的单糖组成；并利用所得的蛇菰多糖灌喂小白鼠，进行小鼠抗疲劳作用实验，测定了蛇菰多糖对小鼠数种生理生化指标的影响。研究结果如下： 1)蛇菰粗多糖的提取蛇菰用热水浸提，固液比1：5；浸提温度90-100℃，浸提时间2h；浸提次数2次；浸提液浓缩后去杂，除蛋白；干燥可得含量为27％的蛇菰粗多糖。 2)乙醇分级沉淀把含量为27％的初步纯化的蛇菰多糖蛇菰粗多糖用一定量的水溶解后，采取乙醇分级沉淀的方式进行纯化，收集乙醇浓度为30％时的沉淀多糖，因为此时的多糖含量为多糖总量的90％，得干基多糖含量50％以上的纯化蛇菰多糖。 3)蛇菰多糖的单糖组分测定蛇菰粗多糖及初步纯化的蛇菰多糖采用TLC及GC法进行了组分测定。测定结果表明，蛇菰粗多糖的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖，其摩尔比为1：4.29：0.80：2.23：7.87：11.42；经乙醇分级沉淀初步后纯化的蛇菰多糖的单糖组成为阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖，其摩尔比为0.80：0.28：1.00：1.20。 4)蛇菰多糖的抗疲劳作用用不同剂量的蛇菰多糖灌喂受试小白鼠，连续30d，末次给样30min后，进行小鼠负重游泳实验，并对小鼠的血清尿素氮，血乳酸，肝糖原三个生化指标进行了测定.实验结果表明，50mg/(kg.d)剂量的蛇菰多糖具有显著的抗疲劳作用，其抗疲劳作用优于其他计量组。

目录

摘要：

一前言

1.1多糖的研究概况

1.2多糖的生物活性

1.2.1调节免疫功能，具有抗肿瘤，抗病毒、抗衰老作用

1.2.2抗凝血作用

1.2.3降血糖作用

1.2.4降血脂作用

1.2.5类似肾上腺皮质激素和促肾上腺皮质激素的作用

1.2.6抗溃疡作用

1.2.7抗辐射及阻抗放射性元素和毒素的吸收

1.2.8其他作用

1.3多糖的分离纯化与性质分析

1.3.1多糖的提取

1.3.2多糖的分离

1.3.3多糖的纯化

1.3.4多糖的纯度鉴定

1.3.5多糖分子量的测定

1.3.6多糖的单糖组分的测定

1.4蛇菰多糖的研究进展

1.4.1蛇菰

1.4.2蛇菰的化学组成及生物活性研究

1.4.3蛇菰多糖分离提取及其相关的生物活性研究现状

1.5本论文的研究意义与研究内容

二.实验部分

2.1材料、试剂和仪器

2.1.1实验材料

2.1.2试剂及化学用品

2.2实验方法及实验过程

2.2.1.多糖含量的检测方法

2.2.2.蛋白质的快速定性检测方法

2.2.3蛇菰多糖的分离提纯

2.2.4.单糖组分测定

2.2.5蛇菰多糖抗疲劳作用动物实验

三.结果分析与讨论

3.1苯酚-硫酸法测定条件的确定

3.1.1最大吸收波长的选择

3.1.2标准曲线的绘制

3.2蛇菰多糖的提取

3.2.1乙醇分级沉淀

3.2.2从蛇菰中分离多糖提取物的产品质量

3.3蛇菰多糖的单糖组分测定

3.3.1 TLC测定结果

3.3.2 GC测定结果

3.4蛇菰多糖抗疲劳作用

3.4.1蛇菰多糖对小鼠负重游泳时间的影响

3.4.2蛇菰多糖对小鼠血清尿素氮含量的影响

3.4.3蛇菰多糖对小鼠抗疲劳血清乳酸含量的影响

3.4.4蛇菰多糖对小鼠肝糖原贮量的影响

3.5结论

3.5.1蛇菰粗多糖提取

3.5.2乙醇分级沉淀

3.5.3蛇菰多糖的单糖组分测定

3.5.4蛇菰多糖抗疲劳作用动物实验研究证明

总结

致谢

参考文献