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牛蛙肥大细胞的形态学和组织化学研究

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摘要

综述 两栖类动物肥大细胞生物学研究进展

实验一、牛蛙解剖组织学的观察

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

实验二、牛蛙肥大细胞的形态学研究

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

实验三、牛蛙肥大细胞的组织化学研究

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

结论

致谢

参考文献

附录

图版

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摘要

目的:研究蛙科动物肥大细胞的组织化学和形态学特征。 方法:在对牛蛙做解剖组织学观察的基础上,通过组织化学(常规和免疫组化)和形态学(光镜与透射电镜观察)技术,以及荧光光度计法,研究了牛蛙肥大细胞的组织化学和形态学性质。 结果: 1、描述了牛蛙的解剖组织学特点。 2、肥大细胞分布于牛蛙各主要组织器官中,其数量、形态有较大差异,以舌,肠,肠系膜和脾中最多,有沿血管周和神经分布的倾向,并可出现于血管中;牛蛙肥大细胞中含有大量特征性的胞浆颗粒,且其在神经束膜中分布较多,有时与神经束膜以突起相接触; 3、Bouin氏液及Carnoy氏液是牛蛙肥大细胞优良的固定液,中性缓冲福尔马林(NBF)固定可显著阻断牛蛙肠黏膜肥大细胞(MMC)的着染,类似于哺乳动物的黏膜肥大细胞。有趣的是,甲苯胺蓝是牛蛙肥大细胞的良好染料,它比阿尔新蓝能更好地显示牛蛙的肥大细胞。 4、舌,肠组织经吖啶橙染色,部分肥大细胞胞浆发出桔红色荧光,表明这些肥大细胞含有肝素蛋白多糖。 5、小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体AA1对牛蛙舌,肠组织及人食管癌组织免疫染色呈阳性反应,类胰蛋白酶阳性细胞多位于牛蛙肠黏膜固有层,少量见于肠绒毛基底部及舌黏膜下腺体周围,与黏膜型肥大细胞的分布区域相一致。 6、荧光光度计法证实牛蛙肥大细胞含有组胺且肠组胺含量具有明显的季节性差异。讨论对牛蛙肥大细胞进行了组织化学和形态学研究,首次证实牛蛙肥大细胞胞浆中含有类胰蛋白酶,同时表明牛蛙肥大细胞中也含有组胺,肝素蛋白多糖。再次证实肥大细胞与血管和外周神经之间存在密切的关系,且舌、肠、脾中数目众多的肥大细胞提示了肥大细胞在宿主防御免疫方面的可能功能。 结论:牛蛙肥大细胞与人类和哺乳动物的肥大细胞有较多的相似性,牛蛙有可能成为肥大细胞生物学研究的理想实验动物,特别是在研究肥大细胞与外周神经和血管的关系,肥大细胞胞浆中组胺及中性蛋白酶等生物活性物质的功能、肥大细胞的异质性及其生物学意义等方面,可能具有重要的意义。

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