贵农6号小麦抗白粉病基因的分子标记

摘要

小麦种质贵农6号是用中燕96-3（母本）与贵农21（父本）为杂交亲本，从F2开始，运用常规育种方法并结合分子标记辅助选择技术，严格按照矮秆、兼抗、优质、高产等标准对杂种后代进行系统选育，经多代选育而成的新种质。本文运用SCAR，SSR技术，采用分离群体分组分析法（BulkedSegregateAnalysis，BSA），对小麦抗病种质贵农6号抗白粉病基因进行分子标记，验证得出小麦贵农6号含有抗白粉病基因Pm21，SCAR筛选出1条与抗白粉病基因紧密连锁的引物，并对抗病和感病群体进行了验证。
　　1、以感病品种藁98143与抗病种质贵农6号杂交，对杂交后代242个单株F2分离个体和双亲，以小麦白粉病当前流行生理小种315号接种进行抗病性鉴定。结果其中的183个单株表现抗病，59个单株表现感病，卡方（χ2）测验表明，χ20=0.033<χ20.05，1=3.841，说明F2群体的抗感分离比例符合3R:1S，初步确定贵农6号白粉病抗性是由一对显性基因控制。
　　2、依据BSA方法建立抗病池和感病池，通过SCAR实验，引物Pm21D,E能在抗病亲本贵农6号和抗病池中扩增出大小约为1265bp的标记带，而在感病亲本藁98143和感病池中不能扩增出该标记带，经3次重复均能得出相同的结果。用F2分离群体进行单株分析，结果抗病单株中均有此标记，感病单株均无此标记带。说明贵农6号含有抗白粉病基因Pm21，Pm21基因目前已被定位于6VS染色体上。
　　3、用特异引物D-L,R对贵农6号抗病亲本与藁98143感病亲本和抗病池感病池及杂交后代的F2代抗感单株进行SCAR检测。结果在贵农6号和抗病池中都能扩增出140bp标记，而在感病亲本和感病池中均缺乏该标记，用F2分离群体进行遗传连锁性分析，结果F2的183个抗病单株中有179个抗病单株有此标记，其余4个抗病单株和及F2的59个感病单株均无此标记，经计算，标记与抗病基因间的遗传距离为2.12±0.015cM，说明D-L,R的SCAR标记与贵农6号抗白粉病基因紧密连锁，在杂交育种过程中易于伴随抗病基因遗传，因此可有效利用该标记进行分子辅助选择。
　　4、以贵农6号×藁98143亲本组合及其F2代群体为材料，利用6AS上的SSR标记进行抗白粉病基因的SSR标记筛选，结果所用引物只在感病材料有扩增产物，抗病材料无扩增带。位于6AL上的SSR引物在抗感材料间都有扩增。

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第一部分、文献综述

1.1 小麦白粉病的危害及现状

1.2 小麦白粉病抗性基因的来源及鉴定

1.3 分子标记常用分析方法

1.4 分子标记技术

1.5 本研究的目的意义

引言

第二部分、贵农 6 号小麦抗白粉病基因的分子标记研究

1.材料与方法

2 实验方法

3 结果与分析

4. 结论与讨论

致谢

参考文献

附录：

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