白木香内生真菌Botryosphaeria rhodina A13固体发酵产物研究

摘要

内生真菌（endophytic fungi）通常是指生长在健康植物体根、茎、叶等组织细胞间隙或细胞内对植物体没有明显病害的真菌，是植物微生态系统的重要组成部分。研究表明，植物内生真菌能够产生多种结构类型的活性代谢产物。来源于药用植物的内生真菌能够产生和宿主植株相同或者相似的生物活性物质，因此药用植物内生真菌是发现天然活性物质的重要资源。本研究前期从药用植物白木香中分离获得一株内生真菌Botryosphaeria rhodinaA13，经离体实验表明，该菌株能诱导离体白木香树枝结香。为此，我们对分离自白木香中的内生真菌Botryosphaeria rhodina A13固体发酵代谢产物进行了研究。
　　本研究以白木香木屑为培养基质对菌株 A13进行固体发酵培养，将发酵产物的乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，应用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱、薄层制备和重结晶等方法分离石油醚部分和乙酸乙酯部分，共分离得到21个单体化合物。根据波谱数据和理化性质鉴定出16个化合物，分别是：豆甾-4-烯-3-酮(1)、豆甾-5-烯-3β-醇-7-酮(2)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(3)、(22E,24S)-5α,6α-环氧基-24-甲基胆甾-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(4)、5,4'-二羟-7-甲氧基黄酮(5)、香草酸(6)、对甲氧基苯甲酸(7)、尿嘧啶(8)、2-甲氧基对苯二酚(9)、2-甲基-3,5-羟基色酮(10)、对羟基苯甲酸(11)、6-羟基-7-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(12)、6,7-二甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(13)、(5S,6R,7S,8R)-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四羟基色酮(14)、6-羟基-2(2-苯乙基)色酮(15)和4'-羟基-2-(2-苯乙基)色酮(16)。所有化合物均为首次从该属真菌中分离得到。其中化合物12~16是沉香特征性成分2-(2-苯乙基)色酮类化合物。
　　以神经胶质瘤细胞SF-268、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460、肝癌细胞HePG-2为供试细胞株，采用SRB法测定单体化合物1和化合物4的细胞毒活性，结果显示化合物4有细胞毒活性，其对乳腺癌细胞MCF-7和大细胞肺癌细胞NIC-H460的IC50分别为34.22μg/mL和37.97μg/mL。

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前言

第一章 文献综述

1.1白木香的研究进展

1.2人工结香技术研究进展

1.3内生真菌的研究概况

1.4研究目的及意义

1.5设计思路

第二章 Botryosphaeria rhodina A13的固体发酵培养及其产物的分离

2.1实验材料

2.2仪器设备

2.3实验方法

第三章 化合物结构鉴定与波谱数据

3.1主要实验试剂

3.2主要仪器设备

3.3结构鉴定与分析

3.4化合物波谱数据

第四章 部分单体化合物抗肿瘤活性研究

4.1实验材料

4.2仪器设备

4.3实验方法

4.4结果与分析

第五章 总结与讨论

参考文献

致谢

附录

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