柴胡疏肝散干预卒中后抑郁模型大鼠海马神经细胞凋亡的证治机理研究

摘要

目的：研究 PSD 模型大鼠海马神经细胞的凋亡及柴胡疏肝散对 PSD 模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响,探索 PSD 的发病机理及 PSD 肝气郁结证与海马神经细胞凋亡的相关性,进一步揭示本病证治机理。
　　方法：1、分组：健康雄性SD大鼠100只,将大鼠随机分为3组：柴胡疏肝散组、PSD 模型组,每组各 40 只,正常对照组 20 只。2、造模及给药：除正常组外,其余 2 组先用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,并按 longa 5 评分标准进行评分,手术1周后开始复合制备PSD大鼠模型,同时柴胡疏肝散治疗组给予中药灌胃21天,PSD模型组蒸馏水灌胃。造模期间给予称重及 OFT行为学评定。3、指标观察：光镜观察海马组织病理形态及凋亡特征变化。4、免疫组化法检测大鼠海马组织Bcl-xl及Bcl-xs蛋白表达情况。
　　结果：1、实验大鼠经过神经缺损评分、体重变化、OFT 行为学测试等方法检验,大多数大鼠出现了病灶对侧肢体不同程度功能障碍,术后 1周肢体功能有所恢复,复合造模3周后PSD模型组大鼠多数出现精神萎靡,四肢活动减少,兴趣缺乏,体重减轻,OFT行为学分值降低,提示 PSD大鼠模型成功。2、病理观察：正常对照组：海马组织细胞排列较规则、紧密,细胞组织结构完整,界限清楚,细胞核明显,核仁清晰,细胞膜较完整。PSD模型组：海马组织神经细胞排列紊乱,神经细胞脱失严重,细胞带不清楚,细胞周围组织疏松、水肿,可见细胞凋亡后的空泡,多数胞核深染、固缩明显。柴胡疏肝散治疗组：海马组织神经细胞排列不紧密,可见少量变性坏死细胞,部分胞核轻度固缩。3、免疫组化分析：PSD 模型组与正常对照组比较,Bcl-xs 蛋白阳性表达升高,Bcl-xl 蛋白表达下降( P<0.01 )；柴胡疏肝散治疗组与 PSD 模型组相比,则 Bcl-xs 蛋白表达下降(P<0.01),Bcl-xl蛋白表达升高(P<0.01)。
　　结论：1、PSD模型大鼠海马组织出现形态损伤及凋亡。2、柴胡疏肝散对PSD模型大鼠的神经损伤有明显的修复、改善作用,柴胡疏肝散可能是通过干预细胞凋亡的发生途径,增强Bcl-xl蛋白的表达,减少诱导Bcl-xs蛋白的表达,从而抑制神经细胞凋亡,进而发挥对PSD的治疗作用,改善PSD的临床症状。3、肝气郁结证是 PSD 的主要证型,柴胡疏肝散对 PSD 模型大鼠干预有效,初步验证肝气郁结证与海马神经细胞凋亡具有相关性。

目录

封面

声明

目录

中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 指标观测方法

4 统计学方法

结果

1 各组大鼠实验分组后体重同一性检验(见表1)

2 各组大鼠死亡情况

3 卒中手术大鼠神经功能缺损情况结果（见表2）

4 各组大鼠体重变化情况结果（见表3）

5 OFT行为学评定结果（见表4、表5）

6 造模实验结果总结

7 光镜观察大鼠海马组织形态

8 免疫组化结果分析（见表6、表7）

理论探讨

1 海马神经细胞凋亡与PSD

2 中医研究

3 现代医学研究

4 建立PSD模型的选择

5 柴胡疏肝散对大鼠海马神经细胞干预的影响

结论

问题与展望

致谢

参考文献

附录