来曲唑对贵州香猪睾丸细胞作用的研究

摘要

内源性雌激素是动物体内产生的一类具有广泛生物活性的类固醇类化合物，在雌性和雄性动物的生殖系统发育和生殖活动中均有重要作用。研究表明，内源性雌激素发挥其生物学功能除依赖雌激素受体外，也可通过调节性激素、促性腺激素和NO的表达进而影响雄性的生殖功能。而雄性动物体内雌激素主要来是以睾酮为前体经芳香化酶催化生成的，因此芳香化酶活性被抑制可有效降低雄性动物体内E2水平。来曲唑（Letrozole）是第三代非类固醇类芳香化酶抑制剂，它能有效降低雄性动物体内雌激素水平，是一个很好的研究内源性雌激素作用的试剂。因此本试验以性未成熟的贵州香猪为研究对象，来曲唑为研究试剂，采用体内和体外研究方法，用免疫组织化学法、ELISA和细胞培养技术来分析内源性雌激素对贵州香猪精子发生过程中雌激素受体、性激素、促性腺激素、一氧化氮合酶等因子表达变化的影响，为全面认识内源性雌激素对雄性哺乳动物睾丸发育的影响提供基础资料。通过研究得到以下体内和体外研究结果：
　　1、发现降低幼年香猪体内内源性雌激素能够使睾丸生殖细胞数量显著减少(P<0.05)，生精小管细胞数显著减少(P<0.05)，并促进幼年香猪睾丸支持细胞数显著增多（P<0.05）；而体外研究发现，降低内源性雌激素能够使体外混合培养的睾丸细胞活性显著减少（P<0.05）。上述结果说明，幼年香猪睾丸细胞的增殖受雌激素的影响。
　　2、发现降低香猪体内内源性雌激素能够使香猪体内黄体生成素含量显著减少（P<0.05），而 T、卵泡刺激素含量显著增多（P<0.05）；而体外混合培养的试验组睾丸细胞培养液中的E2含量显著减少（P<0.05），而 T显著增多（P<0.05）。体内外研究结果表明，内源性雌激素含量的变化能够影响生殖激素的合成及分泌。
　　3、发现降低香猪体内内源性雌激素能够使香猪体内的eNOS、iNOS、nNOS、NOS含量及eNOS表达率均显著增多（P<0.05），而雌激素受体表达率显著减少(P<0.05)。同时发现，eNOS只在睾丸生殖细胞的细胞质中表达；而睾丸生殖细胞和支持细胞核中均有ERα受体表达，但ERβ仅在睾丸生殖细胞的细胞核中表达。
　　综上所述：降低内源性雌激素能够引起睾丸支持细胞数目增多、生殖细胞数目减少，且ERs、eNOS、iNOS、nNOS、NOS、和生殖激素的表达呈一定的变化规律，可能在睾丸的生长、发育和成熟过程中起重要的调节作用。而雌激素可能是通过影响ERs、生殖激素和 NOS的表达来影响香猪睾丸的生长、发育和成熟，进而导致幼年香猪生殖系统异常。

目录

第一章 文献综述

1 雌激素在雄性体内的合成及其对睾丸细胞的作用

2 雌激素受体

3一氧化氮在雄性生殖系统的分布及作用

4 促性腺激素FSH、L H在雄性生殖系统中的作用

5 来曲唑研究进展

第二章 来曲唑对幼年香猪睾丸细胞的影响

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第三章 来曲唑对幼年雄性香猪体内性激素及促性腺激素表达的影响

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第四章 来曲唑对幼年香猪睾丸组织中雌激素受体分布及表达的影响

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第五章 来曲唑对体外培养香猪睾丸细胞生长发育及性激素分泌的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨 论

第六章 来曲唑对贵州香猪体内一氧化氮合酶表达的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨 论

致谢

参考文献

附录Ⅰ 文中缩写词中英文对照

附录Ⅱ 发表文章与参与科研项目

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