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咳嗽颗粒对咳嗽变异性哮喘模型大鼠肺组织病理及血清IFN-γ/IL-4的影响

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前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1 体征观察

2 咳嗽次数测定结果

3 各组大鼠血清IFN-γ检测结果

4 各组大鼠血清IL-4检测结果

5 肺组织病理学观察

理 论 探 讨

1 祖国医学对CVA发病机制的认识

2 现代医学对CVA发病机制的认识

3 导师学术思想

4 咳嗽颗粒治疗CVA的机理探讨

5 咳嗽变异性哮喘大鼠模型

6 实验结果分析

结论

致谢

参考文献

附录 文献综述

附录2 病理图片

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摘要

目的:制备能够较好模拟小儿咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)的大鼠模型,结合现代医学相关研究,运用现代显微及免疫分子生物学技术,通过观察各组大鼠肺组织病理变化及测定与分析血清 IFN-γ、IL-4 含量及IFN-γ/IL-4,观察咳嗽颗粒加味对咳嗽变异性哮喘模型大鼠肺组织结构及免疫功能的影响,进而探讨咳嗽颗粒调节咳嗽变异性哮喘肺组织病理及免疫功能紊乱的作用机制,为临床用药提供有力的实验室证据。
  方法:根据咳嗽变异性哮喘豚鼠模型的方法复制咳嗽变异性哮喘大鼠模型。60只健康Wistar大鼠随机分为6组,每组10只。A组:正常对照组;B组:CVA模型组;C组:小儿肺热咳喘颗粒组。D组:咳嗽颗粒低剂量组;E组:咳嗽颗粒中剂量组;F组:咳嗽颗粒高剂量组。正常饲养3天后开始实验,除正常对照组外,其余各组均在第 1、8天每只大鼠腹腔注射10%卵蛋白(OVA)和氢氧化铝混合溶液1ml致敏。从第15天起,B、C、D、E、F组大鼠置于密闭有机玻璃罩内,给予含1%OVA溶液的生理盐水超声雾化激发20分钟,每天一次,共10天,激发前30分钟,C、D、E、F组分别灌胃给药治疗。第 26天,进行咳嗽次数测定,腹主动脉取血分离血清进行 IFN-γ、IL-4细胞因子水平的测定,处死大鼠留取肺组织行病理学检查。
  结果:1 与正常组比较,CVA模型组咳嗽次数明显增加,有显著性差异(P<0.05);与CVA模型组相比,小儿肺热咳喘颗粒治疗组、咳嗽颗粒各剂量组咳嗽次数明显减少,有显著性差异(P<0.05);与小儿肺热咳喘颗粒组比较,咳嗽颗粒各剂量组咳嗽次数相对减少,有显著性差异(P<0.05);与高剂量组相比,低、中剂量组咳嗽次数相对多,有显著性差异(P<0.05)。2 与正常组比较,CVA模型组血清 IFN-γ值明显降低,具有显著性差异(P<0.05);与模型组比较,小儿肺热咳喘颗粒组、咳嗽颗粒各剂量组血清 IFN-γ明显升高,具有显著性差异(P<0.05);与小儿肺热咳喘颗粒组比较,咳嗽颗粒各剂量组血清 IFN-γ 相对升高,具有显著性差异(P<0.05),高剂量组与低、中剂量组比较有显著性差异(P<0.05)。3 与正常组比较,CVA 模型组血清 IL-4 值明显升高,具有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,小儿肺热咳喘颗粒组、咳嗽颗粒各剂量组血清 IL-4明显降低,具有显著性差异(P<0.05);与小儿肺热咳喘颗粒组比较,咳嗽颗粒各剂量治疗组血清 IL-4值相对降低,具有显著性差异(P<0.05),与高剂量组相比,低、中剂量组比较有显著性差异(P<0.05)。4 与正常组相比,CVA 模型组肺内各级支气管壁黏膜上皮细胞损伤程度、粘液栓形成比例及大小、炎细胞浸润和周围肺泡受累等病理变化明显严重;与模型组比较,小儿肺热咳喘颗粒组,咳嗽颗粒低、中、高剂量组病理变化明显减轻;咳嗽颗粒各剂量组较小儿肺热咳喘组病变减轻;高剂量组与低、中高剂量组比较减轻。
  结论:1 咳嗽颗粒可明显降低咳嗽变异性哮喘模型大鼠慢性气道炎症反应的程度。2 咳嗽颗粒可明显提高咳嗽变异性哮喘模型大鼠血清 IFN-γ 的含量,降低血清 IL-4的含量,调节 CVA模型大鼠血清 INF-γ/IL-4免疫失调方面具有明显的效果。

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