红藻氨酸致癫痫大鼠脑内NOS动态表达及托吡酯干预的实验研究

摘要

【目的】研究红藻氨酸(Kainic acid，KA)致SD大鼠颞叶癫痫发作及托吡酯(Topiramate，TPM)干预后大鼠行为、脑电图及一氧化氮合酶的三种不同亚型nNOS、iNOS、eNOS在大鼠脑内不同部位和不同时间的表达，探讨nNOS、iNOS、eNOS诱导产生的一氧化氮在大鼠颞叶癫痫中的作用及TPM对三种不同亚型nNOS、iNOS、eNOS的影响，探讨TPM的其他可能的抗癫痫机制。 【方法】右侧侧脑室内缓慢微量注射KA 0.2 μ1，浓度为2 μ g/μ 1，诱导成年SD大鼠癫痫持续状态发作，建立SD大鼠颞叶癫痫模型。分为(1)正常对照组；(2)KA组：癫痫大鼠，未用TPM治疗；(3)KA+TPM组：癫痫大鼠，TPM治疗组。观察大鼠行为学变化；描记SD大鼠脑电图；在1d、1w、2w、3w、4w用免疫组织化学方法观察nNOS、iNOS和eNOS在SD大鼠脑内不同部位的表达。 【结果】(1)行为学观察：正常对照组大鼠未观察到癫痫发作；KA组在KA右侧侧脑室内注射后大鼠癫痫的发生率为83.2％，KA+TPM组为82.6％；KA组76.6％大鼠出现癫痫持续状态，在1w，2w，3w，4w分别观察到有61.0％，26.3％，78.3％，100％的大鼠出现自发性发作，死亡率为58.5％；KA+TPM组21.7％大鼠出现癫痫持续状态，1w观察到有24.1％的大鼠出现自发性发作，2w以后未观察到癫痫发作，死亡率为21.1％。(2)脑电图表现：癫痫大鼠表现为棘波节律，单个棘波，尖波，棘慢波，尖慢波等，有时可见阵发的棘波节律。(3)NOS的表达：正常对照组nNOS、iNOS、eNOS在大鼠海马的CA1、CA2、CA3区、齿状回，颞叶及丘脑均有少量的表达。KA组：KA致癫痫后，nNOS主要表达在CA1、CA2、CA3区及颞叶，以急性期增高明显，在慢性期，在CA2、CA3区及颞叶的表达也增高。急性期iNOS在各区表达均增高，慢性期在齿状回和丘脑的的表达增高。急性期eNOS在CA1、CA2区及齿状回表达增高，而在CA3区表达却减少，慢性期在各区表达都增高。KA+TPM组：TPM干预后，明显降低KA致癫痫后nNOS在CA1、CA2、CA3区及颞叶的表达，以1d时降低明显；在CA2、CA3区及颞叶，减少KA所致的慢性期nNOS表达上调。TPM还降低KA致癫痫后1d时iNOS在CA1、CA3区、齿状回及丘脑的表达；在齿状回，减少KA所致的慢性期iNOS表达上调。TPM干预后明显降低KA致癫痫后不同时间eNOS在各区的表达，在急性期，以CA1、CA2区及齿状回降低明显，而在CA3区，eNOS表达亦较对照组降低，在慢性期，抑制KA所致的eNOS在各区表达的上调。 【结论】侧脑室内微量注射KA可诱导SD大鼠出现类似人类颞叶癫痫的表现和相似的脑电图改变，是一成功的研究癫痫发病机制的动物模型。TPM治疗能明显减轻KA诱导的癫痫发作，降低SD大鼠癫痫持续状态的发生率，自发性发作的发生率和死亡率。KA致癫痫发作后，大鼠脑内不同亚型NOS在不同的时间和部位表达不同。TPM治疗能不同程度地降低nNOS、iNOS、eNOS的表达，TPM可能通过下调NOS的活性，起到抗癫痫作用。

目录

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摘要

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述：一氧化氮与癫痫及托吡酯的抗癫痫机制

致谢