PPAR-γ激动剂在不同浓度葡萄糖条件下对胰岛β细胞株NIT-1的IRS-2、FOXO1 mRNA表达和细胞凋亡影响

摘要

目的：探讨PPAR-γ激动剂罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下，对体外培养的胰岛β细胞株NIT-1细胞中IRS-2、Fox01 mRNA表达和细胞凋亡的影响。
　　 方法：将胰岛β细胞株NIT-1按5×104个细胞/孔置于24孔培养板，培养48小时后，随机进入各浓度葡萄糖处理组：5.6组(含葡萄糖5.6mmol/L)、11.1组(11.1 mmol/L)、16.7组(16.7mmol/L)、22.5组(22.5mmol/L)及27.6组(27.6mmol/L)再培养24小时，分别加入10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L罗格列酮，设立空白对照。继续培养48h，随后收集培养上清及细胞。采用放免法检测胰岛素水平，免疫荧光染色法检测细胞凋亡，应用Real-time PCR相对定量方法检测各组的IRS-2及Fox01mRNA表达。
　　 结果：(1)在同一糖浓度下，加入不同罗格列酮浓度干预，结果各糖浓度组均表现为10-5mol/L罗格列酮浓度干预组，胰岛素水平最高，随罗格列酮浓度降低，胰岛素分泌水平逐渐下降(p＜0.05)，10-7mol/L浓度组与无罗格列酮组比较无明显差异(p＞0.05)。无论罗格列酮干预与否，各糖浓度组细胞凋亡呈现相同的趋势，即随着糖浓度的升高，细胞凋亡增加。16.7组、22.5组与27.6组在10-5mol/L罗格列酮干预下细胞凋亡明显减少(p＜0.05)。其余各组予罗格列酮干预后细胞凋亡无显著性差异(p＞0.05)。
　　 (2)加入10-5mol/L的罗格列酮干预，同一葡萄糖浓度下，罗格列酮干预组IRS-2 mRNA的表达显著高于对照组(p＜0.05)。不同浓度葡萄糖组，无论罗格列酮干预与否，各组IRS-2 mRNA的表达均表现相同趋势，即葡萄糖浓度为11.1mmol/L时，IRS-2mRNA表达水平最高，之后随葡萄糖浓度增加而减少。
　　 (3)加入10-5mol/L的罗格列酮干预，22.5组、27.6组在罗格列酮作用下Fox01mRNA的表达显著低于对照组(p＜0.05)。不同浓度葡萄糖组，无论罗格列酮干预与否，各组Fox01 mRNA的表达均表现相同趋势，即随葡萄糖浓度增加而增加(p＜0.05)。
　　 结论：高浓度葡萄糖通过上调Fox01mRNA表达、抑制IRS-2 mRNA的表达阻碍胰岛β细胞增殖、诱导胰岛细胞凋亡。罗格列酮可能通过作用于胰岛β细胞直接或间接的调节Fox01及IRS-2 mRNA的表达来调控胰岛β细胞的增殖及功能、抑制凋亡；提示通过调控Fox01mRNA表达、IRS-2 mRNA的表达，可有效影响胰岛β细胞的分泌功能和细胞的增殖、凋亡。

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文摘

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论文说明：中英文缩略词表

声明

前言

第一部分罗格列酮对胰岛β细胞株NIT-1胰岛素分泌功能及细胞凋亡的影响

第二部分Real-time PCR相对定量法检测罗格列酮干预下NIT-1细胞IRS-2及Fox01基因的变化

讨论

结论

参考文献

综述 罗格列酮与胰岛素信号传递中的IRS-2、FOX01及胰岛素抵抗关系的研究进展

致谢