XRCC1基因多态性与肝细胞癌发生风险的单纯病例研究和Meta分析

摘要

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC，以下简称肝癌)，是世界上最常见的恶性肿瘤之一，高居世界肿瘤死因谱第三位，严重威胁着人们的健康与生命。我国是肝癌高发国家之一，广西是我国肝癌高发区，其死亡率约为34.74/10万，位于广西肿瘤死因谱首位。肝癌病程短，病死率高，目前无有效延长病人生存时间的治疗方法，因此，肝癌的一、二级预防成了急需解决的重要公共卫生问题。
　　肝癌病因复杂，是遗传和环境因素相互作用的结果，而且其发生、发展具有明显的种族、地域及个体差异。以往研究结果显示，肝癌的主要致病因素有:病毒性肝炎感染、食物中黄曲霉毒素污染、饮用水藻类毒素污染以及吸烟饮酒等生活不良习惯等。但是，即使生活在肝癌致病因素高暴露的人群中，也只有少部分人最终发展为肝癌，不同遗传多态性的个体对环境致病因素的易感性不同，且易感基因本身不足以引起疾病，或者说在疾病发生过程中只起到“微效”作用，遗传因素与特定的环境因素相结合，才能更好的解释肝癌发生的机制。环境中的致癌物进入人体后在多种酶的作用下，经过生物转化最终形成终致癌物，从而对其主要靶器官产生慢性毒作用，而DNA修复酶则在防止基因突变方面具有重要作用。研究显示，许多DNA修复酶基因多态性可能与肝癌易感性存在一定的相关性，如X射线损伤交叉互补修复酶1基因(XRCC1)、着色性干皮病基因D(XPD)、人8-羟基鸟嘌吟糖苷酶1(hOGG1)等。近年来，关于DNA修复酶基因多态性、基因-环境对肝癌发生的影响已广泛引起重视，但至今尚无定论，研究结果也不一致。本研究选择参与DNA损伤修复通路的碱基切除修复(baseexcision repair，BER)的XRCC1基因，应用单纯病例研究方法，探讨XRCC1基因与某些环境危险因素交互作用对肝癌发生风险的影响，同时运Meta分析方法，对XRCC1基因多态性与肝癌发病风险相关的文献研究结果进行合成分析和定量合并，探讨XRCC1基因多态性与肝癌发生的相关性。
　　第一部分 XRCC1基因多态性与环境因素在肝细胞癌发生中交互作用的单纯病例研究
　　目的:
　　探讨某些环境暴露因素与XRCC1基因多态性的交互作用对肝癌发生危险性的影响。
　　方法:
　　采用以医院为基础的单纯病例研究方法。病例来源于2007年6月～2010年12月在广西医科大学第一附属医院和广西中医学院第一附属医院住院的所有同意参与调查并经临床相关诊断，未接受过化疗和放射治疗的新发肝癌患者共500例，采用课题组设计的流行病学调查问卷，经由专门培训的调查员对研究对象进行调查，内容包括研究对象基本情况、既往史、个人史、家族史、吸烟史和饮酒史等资料，并收集病人体格检查和实验室检查结果。采集研究对象4ml外周血，以酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbent assay，ELISA)对其进行HBV感染五项指标和HCV抗体检测;以酚-氯仿法提取全基因组的DNA，采用TaqMan MGB实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-PCR)技术检测XRCC1基因单核苷酸多态性。应用SPSS13.0 for windows统计软件对所收集的数据进行统计分析，运用二分类Logistic回归模型进行基因-环境、基因-基因的交互作用效应分析，用比值比(odds ratio，OR)及其95％可信区间(confidence interval，CI)表示关联强度。Hardy-Weinberg遗传平衡吻合度检验应用SHEsis软件。
　　结果:
　　(1)研究对象一般情况:研究对象按照XRCC1基因的野生型和突变型分类，两组之间年龄、性别、民族、职业和婚姻状况等方面差异均无统计学意义(P＞0.05）。
　　(2)基因-环境交互作用:XRCC1-280与e抗体对肝癌的发生有正相乘交互作用（校正后，P=0.047，OR=1.809，95％CI为1.007～3.249）;XRCC1-194与饮酒对肝癌的发生有正相乘交互作用（校正后，P=0.041，OR=1.496，95％CI为1.016～2.204）;XRCC1-194与表面抗体阳性对肝癌的发生有负相乘交互作用(校正后，P=0.045，OR=0.0576，95％CI为0.336～0.987)。XRCC1三个位点的突变等位基因与吸烟、慢性HBV感染、食鱼生史、家族史，肝炎病史、核心抗体、e抗原、抗HCV、AFP等之间均未见交互作用。
　　(3)基因-基因交互作用:XRCC1突变等位基因对肝癌具有相乘交互作用。同时携带至少一个XRCC1-194(CT/TT)突变等位基因和至少一个XRCC1-280(GA/AA)突变等位基因的个体肝癌发病风险增加2.595倍(ORadj=3.595)。同时携带至少一个XRCC1-194（CT/TT）突变等位基因和至少一个XRCC1-399(GA/AA)突变等位基因的个体肝癌发病风险增加1.790倍(ORadj=2.790)。同时携带至少一个XRCC1-280（GA/AA）突变等位基因和至少一个XRCC1-399(GA/AA)突变等位基因的个体肝癌发病风险增加1.310倍(ORadj=2.310)。
　　结论:
　　(1)携带XRCC1-194突变等位基因与饮酒对肝癌可能存在交互作用;携带XRCC1-194突变等位基因与表面抗体对肝癌可能存在交互作用。
　　(2)携带XRCC1-280突变等位基因与e抗体对肝癌可能存在交互作用。
　　(3)同时携带XRCC1-194，XRCC1-280和XRCC1-399任意两个的突变等位基因对肝癌的发生可能有交互作用。

目录

声明

中英文对照表

摘要

前言

第一部分 XRCC1基因多态性与环境因素在肝细胞癌发生中交互作用的单纯病例研究

1．研究对象与方法

2．结果

3．讨论

4．存在问题及展望

5．小结

参考文献

第二部分 XRCC1基因多态性与肝细胞癌易感性关系的Meta分析

1．研究对象与方法

2．结果

3．讨论

4．小结

参考文献

综述

附录

致谢

攻读学位期间发表的学术论文及参与课题