结核易感标志物和血清标志物的研究

摘要

结核病，是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）引起并经呼吸道传播的一种慢性传染病，严重的危害人类健康。病原菌主要侵入人体的肺部，以肺结核病(pulmonary tuberculosis，PTB）最为常见。近年来，由于人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）流行、药物的滥用导致MTB耐药的出现，再加上人们对结核菌并没有引起足够重视，使得世界范围内的结核病又死灰复燃。尽管全球通过扩展直接观察与短程治疗战略及投入大量的资金来提高结核病治疗的完成率，但低下的疾病病例检出率仍然是结核病控制的主要障碍，导致结核病成为发病率和死亡率最高的感染性疾病之一。提高病人的检出率并及时治疗病人是有效控制结核病传染源，遏制结核病流行的最重要措施。目前临床上结核病的诊断方法有多种，都由于各种原因都无法满足临床上辅助诊断与指导用药的需要，因此，迫切需要发现新的标志物应用于发现病人和结核病的有效防控。
　　血清中的蛋白具有非常重要的生理功能，主要包括参与人类机体的代谢、免疫、运输、物质交换、信号调节、凝血作用。在病理状态下血清中低丰度蛋白质的组成和数量通常会发生变化，因此这些具有重要生物学功能的表达量很低的蛋白质对于疾病的监测和诊断有着重要的意义。为了发现结核病的血液标志物，首先需要确定结核病人特别是肺结核病病人是否存在血液标志物，因此，本研究第一部分针对近年来结核的易感标志物研究进行系统的文献分析。研究发现，结核的遗传易感性是由多基因所决定的，其中有关人类白细胞抗原(human leucocyte antigen，HLA)等位基因多态性与结核病易感性的相关性备受关注。因此，通过对现有文献的分析从基因水平上确认在血液中可以找到与结核病相关的易感性标志物。
　　基因是遗传信息的携带者，而生命活动的执行者却是蛋白质，与易感性基因标志物相比，蛋白质标志物可能与结核病的相关性更大。相对和绝对定量的同位素标记（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）标记的基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-fight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）作为新学科及蛋白组学研究技术平台，为发现肺结核病的血清标志物提供了新思路，蛋白质组学及其相关技术让人类能够熟知细胞和生命有机体在特定时间和空间内所表达的全部蛋白质。因此，本研究的第二和第三部分利用相对定量的蛋白组学技术发现和验证血清蛋白性激素结合球蛋白（sex hormone-binding globulin，SHBG）、微管蛋白α-3E链（Tubulin alpha-3E chain，TBA3E）分别作为肺结核病和耐多药肺结核病的有价值的候选标志物。
　　第一部分结核病易感标志物的关联性分析
　　目的：采用Meta分析的方法对国内外已发表的有关于HLA-DRB1、HLA-DQ基因多态性与结核病易感性的文献进行综合分析，寻找结核病相关的易感基因。
　　方法：在PubMed和EMBASE中，应用关键词

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主要缩略语

中文摘要

英文摘要

前言

参考文献

第一部分 结核病易感标志物的关联性分析

前言

1.材料与方法

2.结 果

3. 讨 论

参考文献

第二部分 基于iTRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术发现肺结核病血清潜在标志物

前言

1.材料与方法

2 结果

3. 讨论

参考文献

第三部分 基于iTRAQ标记结合MALDI-TOF-MS技术发现耐多药肺结核血清潜在标志物

前言

1.材料

2实验结果

3.讨论

参考文献

综述：结核病生物标志物的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文