衰老和脂多糖对小鼠眼球P2X7受体及其变异体表达的影响

摘要

目的：了解衰老和脂多糖对小鼠眼组织P2X7R及其变异体表达的影响，为进一步研究P2X7R在衰老和炎症相关疾病中的作用提供理论依据和参考。
　　方法：年轻（4月龄）和年老（18月龄）的C57BL/6雄性鼠腹腔注射O111:B4大肠杆菌LPS0.5 mg/kg（LPS组）或生理盐水（对照组），0、3、24、48或72h后处死。检测炎症因子（IL-1β，IL-18，IL-6，TNF-α）和P2X7R及其变异体的mRNA表达水平及P2X7R蛋白表达水平。
　　结果：1、衰老对眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-αmRNA表达的影响：年老鼠对照组24h和72h IL-1β和TNF-αmRNA表达；24、48和72h IL-18 mRNA表达；3、24、48和72h IL-6 mRNA表达均高于年轻鼠对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。
　　2、衰老对眼组织P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的影响：未刺激年老鼠P2X7R-V2和P2X7R-V4 mRNA表达高于年轻鼠，差异有统计学意义（P<0.05）。年老鼠对照组3、24、48和72h P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4 mRNA表达均高于年轻鼠对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。未刺激年老鼠 P2X7R蛋白表达水平（0.118±0.034）是年轻鼠（0.052±0.004）的2.27倍。年老鼠对照组3、24、48和72h P2X7R蛋白表达均高于年轻鼠，且在3h和24h差异有统计学意义（P<0.05）。
　　3、LPS对年轻鼠眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-αmRNA表达的影响：LPS在72h上调 IL-1βmRNA表达、在3h上调IL-6 mRNA表达，差异均有统计学意义（P<0.05）。LPS在各个时间点对IL-18和TNF-αmRNA表达均无影响，差异无统计学意义（P>0.05）。
　　4、LPS对年轻鼠眼组织P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的影响：LPS在3h和72h上调P2X7R-V1 mRNA表达；在48h和72h上调P2X7R-V2 mRNA表达；在3h和24h上调 P2X7R-V3 mRNA表达，差异均有统计学意义（P<0.05）。LPS组与对照组各个时间点P2X7R-V4 mRNA表达差异均无统计学意义（P>0.05）。LPS处理后24h，P2X7R蛋白表达有增高的趋势，但在其它时间点对P2X7R蛋白表达影响不大（P<0.05）。
　　5、LPS对年老鼠眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-αmRNA表达的影响：LPS在24h下调IL-1β、IL-18 mRNA表达；在72h下调TNF-αmRNA表达，差异均有统计学意义（P<0.05）。LPS组和对照组的IL-6 mRNA表达差异在各个时点均无统计学意义（P>0.05）。
　　6、LPS对年老鼠眼球P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的影响：LPS在24h下调P2X7R-V1 mRNA表达；在3h和24h下调P2X7R-V3和P2X7R-V4 mRNA表达，差异均有统计学意义（P<0.05）。LPS在各个时间点对P2X7R-V2 mRNA表达均无影响，差异无统计学意义（P>0.05）。LPS组P2X7R蛋白表达均低于对照组，只是差异无统计学意义（P>0.05）。
　　7、年轻鼠LPS组与年老鼠LPS组眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-αmRNA表达的比较：年老鼠48h IL-1βmRNA、24h IL-18 mRNA、24h和48hIL-6 mRNA表达均高于年轻鼠，差异均有统计学意义（P<0.05）。
　　8、年轻鼠LPS组与年老鼠LPS组眼组织P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的比较：年老鼠P2X7R-V1 mRNA表达在24h高于年轻鼠、P2X7R-V2 mRNA表达在24h和72h均高于年轻鼠、P2X7R-V3和P2X7R-V4 mRNA表达在24、48和72h均高于年轻鼠，差异均有统计学意义（P<0.05）。年老鼠LPS组各个时点的蛋白表达水平都高于年轻鼠，只是差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：1、体内衰老上调眼组织中P2X7受体及其剪接变异体的表达。
　　2、LPS差异性调节年轻鼠和年老鼠的P2X7受体及其剪接变异体的表达。